文献类型： 会议论文
第一作者： 徐福洲
作者： 徐福洲 1 ; 陈小玲 1 ; 杨汉春 2 ; 杨兵 1 ; 王金洛 1 ;
作者机构： 1.北京市农林科学院畜牧兽医研究所,北京,100089
2.中国农业大学动物医学院,北京,100094
关键词： 胸膜肺炎放线杆菌;ApxI毒素基因;同源重组;基因插入失活;基因序列;免疫原性
会议名称： 中国畜牧兽医学会第一届中国养猪生产和疾病控制技术大会
主办单位： 中国畜牧兽医学会
页码： 473-476
摘要： 根据发表的ApxIA基因序列(U05042)设计1对引物,用于自胸膜肺炎放线杆菌血清10型基因组DNA中扩增ApxIC基因,经克隆测序分析后在ApxIC基因下游Xho位点处插入氯霉素抗性基因,构建成功用于转化的重组质粒pUIC-Cm,将该重组质粒经电转化导入胸膜肺炎放线杆菌血清10型野生菌株中进行同源重组,于含有氯霉素的培养基中筛选获得突变菌株HS114C-CmR,通过PCR和SouthernBlotting对突变菌株进行了鉴定,进而对突变菌株的生物学特性进行了研究,结果显示突变菌株的生长特性基本不变而溶血活性和对小鼠的毒力大大降低,通过对突变菌株连续传代后PCR鉴定,显示Cm基因能够稳定遗传,免疫原性试验显示免疫小鼠能够抵抗同源菌株的攻毒,同时对异源菌株的攻毒也具有一定的交叉保护力.该突变菌株的构建为研究具有交叉保护活力的胸膜肺炎放线杆菌弱毒疫苗奠定了坚实的基础。
分类号： S855.12`S852.4
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