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C型副鸡禽杆菌血凝素基因的克隆表达及生物活性鉴定

文献类型： 会议论文

第一作者： 王宏俊

作者： 王宏俊 1 ; 安烨 1 ; 首都师范大学生命科学院 2 ; 龚玉梅 1 ; 陈小玲 1 ; 张培君 1 ;

作者机构： 1.北京市农林科学院畜牧兽医研究所,北京,100097

2.北京,100037

关键词： 副鸡禽杆菌;血凝素;原核表达;生物活性;基因克隆

会议名称： 中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第十二次学术研讨会

主办单位： 中国畜牧兽医学会

页码： 720-723

摘要： 血凝素是副鸡禽杆菌(Apg)的主要抗原成分之一,鸡只对Apg的免疫力与血凝素抗体滴度成正相关。根据GenBank上已发表的C型Apg Modesto株的血凝素基因序列(AF491827),设计合成了1对特异扩增Apg血凝素基因的引物.以Modesto株Apg中提取的细菌DNA为模板,利用PCR扩增出了1 026bp的血凝素基因,将其克隆到pET-32a载体上,构建了pET-HA原核表达质粒并在BL21大肠杆菌中过量表达。通过Western-blotting及血凝和血凝抑制试验鉴定该重组蛋白的生物学活性。结果显示成功地构建了Modesto株Apg血凝素基因的原核表达载体,表达并纯化了Apg重组血凝素蛋白,该蛋白可以和C型Apg抗血清特异性结合,并且可以凝集鸡红细胞.为进一步研究副鸡禽杆菌血凝素的免疫功能奠定基础。

分类号： S858.31`S852.5

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