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PRRSV ORF6基因的克隆与真核表达载体的构建

文献类型: 会议论文

第一作者: 张利娜

作者: 张利娜 1 ; 张改平 2 ; 唐志鹏 3 ; 温建新 3 ; 席俊 2 ;

作者机构: 1.河南省动物免疫学重点实验室,河南省农业科学院,河南 郑州 450002 中国农业科学院,北京 100081

2.河南省动物免疫学重点实验室,河南省农业科学院,河南 郑州 450002

3.青岛农业大学,山东 青岛 266001

关键词: 猪病毒;ORF6基因;基因克隆;真核表达载体

会议名称: 河南省畜牧兽医学会第七届暨2008年学术研讨会理事会第二次会议

主办单位: 河南省畜牧兽医学会

页码: 81-85

摘要: ORF6是猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒(PRRSV)编码膜蛋白(M蛋白)的基因,其编码的膜蛋白免疫原性强且高度保守。为了构建PRRSV ORF6基因的真核表达载体,本研究以P质粒作为模板,通过聚合酶链式反应(PCR)扩增0RF6基因、回收PCR产物,对回收产物和pVAXJ载体进行双酶切(Nbel、EcoRI),将酶切后的ORF6基因片段与pVAXI载体连接、转化细菌,经抗性筛选、碱裂解法提取质粒、双酶切鉴定阳性克隆。结果表明ORF6基因与pVAI载体连接成功,OPRF6基因真核表达载体初步构建成功。这为PRRSV ORF6 DNA疫苗的研制奠定了基础。

分类号: S852.65`Q786

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