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H5N1亚型禽流感病毒核衣壳蛋白原核表达条件的优化

文献类型: 会议论文

第一作者: 邬成业

作者: 邬成业 1 ; 史平玲 2 ; 张改平 3 ; 郝慧芳 3 ; 王爱萍 2 ; 祁艳华 2 ; 卜丹 2 ;

作者机构: 1.郑州大学生物工程系,河南 郑州 450001 河南省动物免疫学重点实验室,河南 郑州 450002

2.郑州大学生物工程系,河南 郑州 450001

3.河南省动物免疫学重点实验室,河南 郑州 450002

关键词: H5N1亚型;禽流感病毒;核衣壳蛋白;原核表达;培养基;单克隆抗体

会议名称: 第五届南京农业大学畜牧兽医学术年会----家禽高效养殖与重大疫病防控研讨会

主办单位: 南京农业大学

页码: 150-152

摘要: 为了提高禽流感核衣壳蛋白(NP)在大肠杆菌中的表达量,试验研究了载体、培养基、温度、转速、诱导时间以及诱导剂IPTG浓度等不同条件对NP融合蛋白表达量的影响。 结果:使用LB培养基于37℃培养3.5 h后,采用终浓度为2 mmol/L的IPTG在28℃、200 r/min诱导培养5 h,pET32a-NP融合蛋白表达量最大;SDS-PAGE检测结果表明pET32a-NP融合蛋白的分子质量与预计大小一致,约为70ku;Western-blot结果表明,pET32a—NP融合蛋白能与抗His标签的单克隆抗体发生特异性反应。说明NP蛋白得到正确表达。

分类号: S852.65

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