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应用体内诱导抗原技术筛选I型鸭疫里默氏杆菌体内特异性表达基因

文献类型： 会议论文

第一作者： 袁建丰

作者： 袁建丰 1 ; 覃宗华 1 ; 蔡建平 1 ; 谢明权 1 ;

作者机构： 1.广东省农科院兽医研究所 广东省兽医公共卫生公共实验室,广州 510640

关键词： 鸭疫里默氏杆菌;毒力因子;基因序列;体内诱导抗原技术

会议名称： 第二届全国禽病分子生物技术青年学者论坛

主办单位： 中国畜牧兽医学会禽病学分会

页码： 226-227

摘要： 目的：利用体内诱导抗原技术(IVIAT)分析、鉴定RA的体内表达基因谱，初步鉴定RA的毒力因子及其表达产物。方法：7日龄雏鸭攻毒后每日采集血清用ELSIA测定其血清效价，确定最佳康复鸭血清采集时间。康复鸭血清经过与鸭疫里默氏杆菌和基因组表达文库宿主菌的全菌、超声裂解菌液以及热变性抗原的吸附后4℃保存备用。鸭疫里默氏杆菌基因组DNA部分酶切后选择500-2000bp片段参照分子克隆方法构建基因组表达文库。利用吸附后的康复鸭血清对基因组表达文库进行免疫筛选。重复筛选均为阳性的克隆基因，初步鉴定获得基因的功能。结果：ELISA检测结果表明抗体水平在攻毒后第5d降至最低，随后缓慢升高，在12d达到最高；吸附后的血清与菌体裂解抗原的反应明显降低，达到了IVIAT文库血清的要求。结论：筛选获得的序列基本为新发现的RA基因序列。研究结果为进一步确定RA的致病机理和解析保护性抗原组(repertoir)提供了实验和理论经验。

分类号： S858.32:S852.65

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