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猪瘟病毒E2蛋白IgM抗体间接ELISA检测方法的建立

文献类型： 会议论文

第一作者： 李文良

作者： 李文良 1 ; 毛立 1 ; 张纹纹 1 ; 江杰元 1 ;

作者机构： 1.江苏省农业科学院兽医研究所，农业部兽用生物制品工程技术重点实验室，国家兽用生物制品工程技术研究中心，江苏南京，210014

关键词： 猪瘟病毒;抗体检测;重组E2蛋白;IgM抗体;间接ELISA检测

会议名称： 中国畜牧兽医学会兽医公共卫生学分会第二次全国会员代表大会暨第三次学术研讨会

主办单位： 中国畜牧兽医学会

页码： 364-367

摘要： 采用本实验室构建的表达CSFV E2蛋白的重组大肠杆菌BL21-ΔE2大量表达重组E2蛋白，纯化后作为包被抗原，通过反应条件优化，建立了IgM抗体间接ELIsA检测方法。ELISA抗原最适包被浓度为0.5μg/mL(0.05μg/孔)，待检血清最适稀释度为1:100，作用时间为1.5h，酶标抗体最适稀释度为1:50000，最适作用时间为1h。用该方法检测猪圆环病毒2型(PCV2)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、伪狂犬病病毒(PRV)阳性血清结果均为阴性；批内和批间重复试验变异系数分别为<5%和<10%，表明本方法具有较好的特异性和重复性。应用ΔE2-IgM-ELISA对300份血清样品进行检测，阳性率为77.33%(232/300)，高于IDEXX试剂盒检测阳性率(71.67%，215/300)，与IDEXX试剂盒阳性符合率90.23%(194/215)，总符合率80.33%(241/300)。本试验建立的间接ELIsA方法可用于IgM抗体产生规律的研究以及临床CSFV血清抗体的检测。

分类号： S858.28:S852.659.6

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