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水稻乙酰辅酶A羧化酶BC功能域的克隆及原核表达载体的构建

文献类型： 会议论文

第一作者： 楚敏

作者： 楚敏 1 ; 赵虎基 2 ; 郑明刚 3 ; 乐锦华 3 ;

作者机构： 1.新疆农科院微生物研究所 乌鲁木齐 830000

2.中国农业大学 北京 100094

3.石河子大学生物工程学院 石河子 832003

关键词： 水稻质体;乙酰辅酶A羧化酶;功能域;基因克隆;原核表达

会议名称： 中国科协第六届青年学术年会卫星会议-新疆第六届青年学术年会暨首届博士生论坛

主办单位： 新疆自治区科协

页码： 1535-1537

摘要： ACCase是一个高度调控的酶，在植物体内有极其复杂的机制控制它的活性。水稻质体中的ACCase是原核型ACCase，目前对ACCase的三个功能域了解较少。本研究通过计算机辅助分析，根据水稻质体ACCase基因序列设计了一对引物，并在引物的3′和5′端分别引入KpnⅠ和SalⅠ酶切位点，使扩增产物能以黏性末端定向插入原核表达载体，同时连接转化效率很高，便于阳性克隆的筛选。利用定向克隆技术将BC片段连接到PQE30载体的TS启动了下游，末端与TS终止了相连。DNA测定了从TS启动了开始的下游碱基，读码框正确。由于ACCase基因大小约7kb是植物中最长的基因之一，国内外未见全长的原核表达研究，今后将近一步研究另外两个功能域，为ACCase基因的原核表达及功能研究奠定基础。

分类号： S511.01

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