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巢式PCR检测猪鼻支原体方法的建立及应用

文献类型： 会议论文

第一作者： 白方方

作者： 白方方 1 ; 武昱孜 1 ; 靳蒙蒙 1 ; 刘茂军 1 ; 冯志新 2 ;

作者机构： 1.江苏省农业科学院兽医研究所·农业部兽用生物制品工程技术重点实验室·国家兽用生物制品工程技术研究中心,南京210014

2.江苏省农业科学院兽医研究所·

关键词： 猪鼻支原体;分子生物学;检测技术;巢式聚合酶链式反应;临床应用

会议名称： 中国畜牧兽医学会家畜传染病分会第八次全国会员代表大会暨第15次学术研讨会

主办单位： 中国畜牧兽医学会

页码： 669-673

摘要： 应用巢式聚合酶链式反应(Nested PCR)建立了一种检测猪鼻支原体(Mycoplasma hyorhinis)的方法,试验中以酚-氯仿法制备模板DNA,根据猪鼻支原体P37序列高度保守区设计2对引物,建立Nested PCR诊断方法。在特异性检测试验中,设计的引物不能扩增出猪絮状支原体、猪滑液支原体、猪肺炎支原体、鸡毒支原体、胸膜肺炎放线杆菌、猪瘟病毒、猪流感病毒、猪圆环病毒及猪呼吸与繁殖综合症病毒等病原体;敏感性试验表明,第一次PCR和第二次PCR的敏感度分别为3.01 mg/L和3.01×10-4mg/L.对41份临床样品肺组织的检测中,普通PCR和巢式PCR的检出率分别为29.3％(12/41)和82.9％(34/41).结果表明巢式PCR方法明显优于常规PCR方法,具有较高的敏感性和实用性,为猪鼻支原体的检测提供了一种新型、可靠的诊断技术。

分类号： S858.28:S852.62

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