文献类型: 会议论文
第一作者: 胡敬环
作者: 胡敬环 1 ; 蒋科技 2 ; 张凤英 1 ; 房娅博 1 ; 王景 1 ; 赵明 2 ; 马凌波 1 ;
作者机构: 1.中国水产科学研究院东海水产研究所 上海军工路300号 200090
2.上海海洋大学水产与生命学院 上海临港新城沪城环路999号 201306
关键词: 拟穴青蟹;硫氧还蛋白-1基因;克隆表达;荧光定量聚合酶链反应
会议名称: 2013年全国海水养殖学术研讨会
主办单位: 中国水产学会;浙江省水产学会
页码: 34-35
摘要: 本研究主要运用SMART技术从拟穴青蟹的肝胰腺cDNA文库中分离得到了一条Trx-1 cDNA全长序列。通过Vector NTI Advance 11.5软件比对,并运用MEGA 5.0软件构建系统进化树进行生物学分析,结果显示这条cDNA序列与其他物种Trx-1之间具有较高的同源性,经综合分析确定命名为拟穴青蟹硫氧还蛋白-1基因。SpTrx-1 cDNA由672bp的碱基组成,包含一个318bp的开放阅读框,编码一个分子量约为12.05kDa,等电点约为4.85,由105个氨基酸残基组成的蛋白质。运用荧光定量PCR技术研究了Trx-1基因在拟穴青蟹肝胰腺、血液、心脏、肌肉、鳃和精巢6个组织中的表达,18S rRNA作为内参引物,检测结果显示在6个组织中该基因均有表达,其中在鳃和精巢中的表达量最高,在血液中表达量最低。副溶血性弧菌感染健康成体拟穴青蟹,感染后分别在0、2、4、6、8、12、18、24、48、72、96h取血液。结果表明,SpTrx-1在弧菌感染后表达量差异显著,在0-12h之间变化不明显,12h突然下降,处于最低水平,18h小时开始逐渐上升,在48h显著升高,72h达到最高值,随后缓缓下降,96h恢复正常水平。由此可见,经弧菌刺激后SpTrx-1在血液中有较缓慢的作用过程。本实验为SpTrx-1基因结构和功能的进一步研究提供了理论基础,本研究表明Trx-1基因可能在拟穴青蟹的免疫和抗菌过程中具有重要作用,为深入研究该基因的结构和功能奠定基础。
分类号: Q959.223.630.5
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