文献类型: 会议论文
第一作者: 鲁岩
作者: 鲁岩 1 ; 于海生 2 ; 聂晓华 2 ; 李永清 3 ; 张立国 2 ; 陆承平 1 ;
作者机构: 1.南京农业大学动物医学院微生物与免疫学实验室
2.中国科学院生物物理研究所感染与免疫重点实验室
3.北京市农林科学院畜牧兽医研究所
关键词: 猪细环病毒2型;非结构蛋白;单克隆抗体;基因表达
会议名称: 2013年全国动物疫病与食品安全博士后学术论坛
主办单位: 河南省农科院免疫学实验室
页码: 83-86
摘要: 目前,对于猪细环病毒2型非结构蛋白的研究报道较少.本研究运用原核与真核系统分别表达了非结构蛋白ORF2、ORF2/2以及ORF2/2/3.将原核表达的ORF2与ORF2/2作为抗原免疫小鼠,制备了两株单克隆抗体3C6与5D10.通过ELISA与蛋白质印迹方法鉴定了单克隆抗体的结合区域.免疫荧光试验显示ORF2定位于细胞质,ORF2/2定位于细胞核, ORF2/2/3分布在核周.为了鉴定猪细环病毒2型的非结构蛋白表达谱,构建了环状全长病毒基因组DNA克隆,并用该克隆转染细胞.通过反转录PCR、蛋白质印迹与免疫荧光方法,鉴定了ORF2/2与ORF2/2/3的mRNA剪切形式、蛋白表达及定位情况.综上,本研究首次验证了ORF2/2与ORF2/2/3在蛋白水平的表达.此外,制备的单克隆抗体有利于进一步研究猪细环病毒的蛋白功能及建立相关疾病的诊断方法.
分类号: S582.65:S858.28
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