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赭曲霉毒素A免疫学快速检测方法的建立

文献类型: 会议论文

第一作者: 孙亚宁

作者: 孙亚宁 1 ; 胡骁飞 1 ; 王方雨 1 ; 邓瑞广 1 ; 张改平 2 ;

作者机构: 1.河南省农业科学院动物免疫学重点开放实验室 河南郑州 450002

2.河南农业大学牧医工程学院 河南郑州 450002

关键词: 饲料;赭曲霉毒素A;免疫学特性;检测技术

会议名称: 2013年全国动物疫病与食品安全博士后学术论坛

主办单位: 河南省农科院免疫学实验室

页码: 262-267

摘要: 为了建立灵敏、特异赭曲霉毒素A的快速检测方法,本试验采用N-羟琥珀酰亚胺酯(N-hydroxysuccinimide NHS)法制备了免疫抗原OTA-BSA,采用1-乙基-3(3-二甲基氨基丙基)碳二亚胺(EDC)法制备了包被抗原OTA-OVA.免疫BALB/C小鼠,获得了高效价的特异性多克隆抗血清,效价可达1∶104,抑制IC50达12.9 ng/mL;经杂交瘤技术建立产抗OTA单克隆抗体(OTAmAb)的杂交瘤细胞株1株.通过体内诱生腹水法制备OTAmAb腹水,纯化后对其亚型、效价、灵敏性、亲和性、特异性等免疫学特性进行鉴定;单抗亚类为IgG1型,间接ELISA效价1∶7.68× 105,IC50为112.8 pg/mL,亲和常数为9.74× 1011 L/mol,与赭曲霉毒素B交叉反应率为17%,与其他常见真菌产物交叉小于0.03%;本试验制备的OTAmAb具有高效、敏感、特异等特点,并可用于ELISA检测饲料及谷物中的OTA,机制影响小,检测准确度高,可以用于OTA的快速检测.

分类号: S816.3

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