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猪Viperin主要抗原区的原核表达及多克隆抗体的制备

文献类型： 会议论文

第一作者： 李文良

作者： 李文良 1 ; 韩林晓 2 ; 毛立 1 ; 杨蕾蕾 1 ; 张纹纹 3 ;

作者机构： 1.江苏省农业科学院兽医研究所农业部兽用生物制品工程技术重点实验室 国家兽用生物制品工程技术研究中心,江苏南京210014

2.南京农业大学动物医学院,江苏南京210095

3.江苏省农业科学院兽医研究所农业部兽用生物制品工程技术重点实验室 国家兽用生物制品工程技术研究中

关键词： 猪蝰蛇毒素;抗原区;原核表达;多克隆抗体

会议名称： 中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第十次学术研讨会

主办单位： 中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会;中国免疫学会兽医免疫分会;中国农业科学院哈尔滨兽医研究所

页码： 246-248

摘要： 采用PCR方法扩增猪Viperin蛋白主要抗原区基因,克隆入原核表达载体pET32a,转化大肠埃希茵BL21构建重组表达菌,经IPTG诱导表达重组蛋白,SDS-PAGE鉴定蛋白得到表达,分子质量约为40 ku.进一步优化蛋白表达条件为:IPTG终浓度为0.6 mmol/L,诱导5h.采用His标签单抗对重组蛋白进行western blot鉴定表明蛋白具有良好的抗原性.将蛋白质纯化后免疫新西兰大白兔,间隔14d免疫四次,并采集血清.用间接ELISA方法测定血清抗体效价,结果表明,经过4次免疫血清抗体效价达到1∶409600,表明其能与Viperin蛋白发生反应,为研究Viperin的功能、建立特异的检测方法奠定了基础.

分类号： S858.28:S852.43

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