文献类型： 会议论文
第一作者： 黄秀芬
作者： 黄秀芬 1 ; 姜良 1 ; 王天坤 2 ; 张林波 3 ; 李永清 2 ;
作者机构： 1.北京市农林科学院畜牧兽医研究所 畜禽疫病防控技术北京市重点实验室,北京100097
2.吉林农业大学生物学院,吉林长春130118
3.昌平区动物预防疫病控制中心,北京102200
关键词： 牛疱疹病毒1型;囊膜糖蛋白;杆状病毒表达系统;基因表达
会议名称： 中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第十次学术研讨会
主办单位： 中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会;中国免疫学会兽医免疫分会;中国农业科学院哈尔滨兽医研究所
页码： 281-284
摘要： 为获得具有生物活性的牛疱疹病毒1型(BHV-1)病毒囊膜糖蛋白gE,采用PCR方法从BHV-1感染的牛肾细胞全基因组中扩增出约1.5 kb的gE基因片段,再将gE基因克隆到新型杆状病毒载体pFastBac-L1C-Bse中,构建重组转移质粒pFB-gE.将pFB-gE转化到杆状病毒基因组的DH 10Bac感受态细胞中,制备重组杆粒rBacmid-gE.将该重组杆粒的DNAE转染昆虫细胞Sf9,获得与gE基因发生重组的杆状病毒.Westem blot及间接免疫荧光试验(IFA)分析结果显示,重组杆状病毒在SF9中表达了分子量大小约为43 ku的gE融合蛋白,该融合蛋白分别与鼠抗His标签单克隆抗体和鼠抗BHV-1多克隆抗体发生特异性结合,表明获得的gE融合蛋白具有良好的免疫反应性.本研究为进一步获得高特异性的诊断抗原奠定基础.
分类号： S858.23:S852.659.1
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