您好,欢迎访问中国热带农业科学院 机构知识库!

甘蔗黄叶病毒CP蛋白基因ihpRNA表达载体构建及烟草转化

文献类型: 会议论文

第一作者: 张雨良

作者: 张雨良 1 ; 熊国如 1 ; 王健华 1 ; 张树珍 1 ; 官梅花 1 ; 杨文君 2 ;

作者机构: 1.中国热带农业科学院热带生物技术研究所农业部热带作物生物技术重点开放实验室,海口 571101

2.中国热带农业科学院热带生物技术

关键词: 甘蔗;黄叶病毒;外壳蛋白;表达载体;烟草转化

会议名称: 中国作物学会甘蔗专业委员会第15次学术研讨会

主办单位: 中国作物学会甘蔗专业委员会

页码: 192-198

摘要: 为提高甘蔗抗病性,本研究根据甘蔗黄叶病毒海南分离物ScYLV-CHN-HN1全基因组序列(GenBank no.HQ342888),利用病毒CP蛋白介导的RNAi技术,针对病毒外壳蛋白CP,设计两对含有酶切位点的特异性引物,CPsf1/CPsr1和CPasf1/CPasr1,以构建好的pMD19-T/CP质粒为模板,pRNAi1017为中间载体,分别合成构建干扰载体的正反向片段pRNAi-CP-F-R,将CP正反向片段分别插入表达载体pCAMBIA2300的相应位置,构建含有发卡结构的RNAi 载体p2300-CP-F-R,经过PstⅠ酶切鉴定,证明载体构建成功.通过农杆菌介导的方法,以干扰表达载体p2300-CP-F-R转化烟草,经过PCR检测,得到12株阳性转基因植株,Southern blot杂交和半定量RT-PCR对其检测,证明干扰片段已经整合烟草基因组中并进行了转录,该结果为RNAi介导抗病毒甘蔗育种研究奠定基础.

分类号: S435.661

  • 相关文献

[1]海南50个甘蔗品种黄叶病毒的分子鉴定. 沈林波,何美丹,冯小艳,王文治,蔡文伟,冯翠莲,张树珍. 2018

[2]以ScYLV和SrMV为材料进行常见PCR引物优化设计. 王洪星,张雨良,罗志文,杨文君,刘志昕. 2014

[3]应用多重SYBR Green-Ⅰ实时荧光定量PCR检测甘蔗黄叶病毒和高粱花叶病毒. 王洪星,张雨良,王健华,章绍延,熊国如,刘志昕. 2014

[4]甘蔗黄叶病毒实时荧光RT-PCR检测体系研究. 王洪星,龚殿,张雨良,王健华,刘志昕. 2014

[5]应用多重RT-PCR检测甘蔗黄叶病毒和高粱花叶病毒. 王洪星,张雨良,罗志文,杨文君,龚殿,孙玉娟,张树珍. 2014

[6]高粱花叶病毒外壳蛋白的原核表达及其抗血清制备. 王洪星,龚殿,孙玉娟,张雨良,王健华. 2014

[7]甘蔗14-3-3基因真核表达载体构建及分析. 罗炼芳,苏俊波. 2013

[8]GNA基因表达载体的构建及遗传转化甘蔗. 冯翠莲,刘晓娜,张树珍. 2014

[9]小拟南芥ApCBF基因的克隆及转化烟草的初步研究. 任艳利,崔百明,张秀春,周鹏. 2006

[10]甘蔗黄叶病毒CP蛋白基因ihpRNA表达载体构建及烟草转化. 张雨良,熊国如,王健华,张树珍,官梅花,杨文君,刘志昕. 2011

[11]云南胡椒花叶病病原检测及亚组鉴定. 刘向阳,刘爱勤,周琳. 2014

[12]黄瓜花叶病毒CP基因原核表达及抗血清的制备. 秦云霞,曾华金,刘志昕,田娥. 2004

[13]高粱花叶病毒外壳蛋白的原核表达及其抗血清制备. 龚殿,孙玉娟,张雨良,王健华,刘志昕. 2013

[14]番木瓜畸形花叶病毒外壳蛋白基因的克隆及序列分析. 汪倩,谭德冠,吴丽娟,孙雪飘,张家明. 2012

[15]辣椒脉斑驳病毒CP基因的原核表达及其抗血清的制备. 吴育鹏,王健华,冯团诚,张雨良,王小明,刘志昕. 2010

[16]香蕉条斑病毒CP区基因的克隆及其在大肠杆菌中的融合表达. 邱世明,庄军,刘志昕. 2007

[17]利用ID-ELISA技术调查分析海南3种主要番木瓜病毒分布及感病情况. 杨勇,庹德财,沈文涛,言普,黎小瑛. 2015

[18]利用ID-ELISA技术调查海南三种主要番木瓜病毒分布及感病情况. YANG Yong,杨勇,TUO Decai,庹德财. 2015

[19]人α-干扰素2B基因转化番茄,番木瓜的研究(I):人α-干扰素2B基因?…. 周鹏,赵志英. 1998

[20]CryIA(c)和gna融合基因植物表达载体的构建. 冯翠莲,张树珍. 2010

作者其他论文 更多>>