文献类型： 会议论文

第一作者： Bo CHEN

作者： Bo CHEN ¹ ; 陈波 ² ; Feng LIU ¹ ; 刘峰 ² ; Cheng LI ³ ;

作者机构： 1.Department of Acupuncture and Massage,Guiyang College of TCM,Guizhou 550002

2.贵阳中医学院针灸推拿学院,贵州贵阳 550002

3.Department of Acupuncture and Massage,Guiyang Co

关键词： 经脉相关筋膜结缔组织;成纤维细胞;力学刺激;整合素;信号传导通路

会议名称： 第四届中医药现代化国际科技大会

主办单位： 科技部`中国科学院`中国工程院`国家中医药管理局

页码： 00000001-00000006

摘要： 目的：探讨体外压力、摩擦力、张力刺激对来源于经脉相关筋膜结缔组织成纤维细胞的整合素-细胞骨架力学信号传导通路的影响，为针推基本机械力学作用的细胞生物物理学作用原理提供新的实验和理论依据。 方法：体外利用酶消化法获取经脉（督脉）相关筋膜结缔组织成纤维细胞，鉴定后培养建立来源于经脉相关筋膜结缔组织成纤维细胞的细胞生物学实验平台，并运用不同压力、摩擦力、张力对细胞进行刺激，应用荧光显微镜技术观察成纤维细胞整合素β1分布情况并进行定性、半定量分析；观察成纤维细胞在不同机械力刺激后细胞骨架-微丝形态学变化。 结果：(1)不同体外压力、摩擦力、张力刺激对经脉相关筋膜结缔组织成纤维细胞整合素β1表达均有影响，差异有以下不同：①压力刺激：单次刺激各组中，50Kpa组较空白对照组荧光亮度变化不明显，100Kpa和200Kpa组的荧光亮度均较空白组强；多次刺激各组中，50Kpa组的荧光亮度最亮，100Kpa组的亮度次之，200Kpa组的荧光仍然较空白组强；②摩擦力刺激：单次刺激各组中，0.5Hz组较空白对照组荧光亮度变化不明显，1Hz和2Hz组的荧光亮度较空白对照组要亮，以1Hz组的亮度最亮；多次刺激各组中，0.5Hz组的荧光亮度最亮，1Hz组与空白对照组的亮度无明显区别，2Hz组的荧光较空白对照组要暗；③张力刺激：单次刺激各组中，随着刺激强度的增加，荧光亮度逐渐变亮，3000μstrain组的荧光亮度最亮；多次刺激各组中，1000μstrain组的荧光较空白组亮，2000μstrain组的荧光亮度最亮，3000μstrain组与空白对照组的亮度无明显区别。(2)不同体外压力、摩擦力、张力刺激对经脉相关筋膜结缔组织成纤维细胞微丝形态结构及染色有影响，其影响有：①压力刺激：单次刺激各组中，50Kpa和100Kpa组可见微丝与细胞核染色加深，微丝排列较空白对照组无明显区别，200Kpa组可见微丝与细胞核染色明显加深，微丝排列较空白对照组仍无明显区别；多次刺激各组中，50Kpa组微丝及细胞核染色加深，微丝分布较为散乱，少有贯穿细胞全长，100Kpa组较空白对照组微丝及细胞核染色明显深染，微丝明显解聚变短，排列无规则，出现少许点状分布于胞内为解聚后的近肌球蛋白，偶可见细胞膜丝状伪足；200Kpa多次加力组细胞核与微丝更加深染，微丝明显解聚，排列无规则，出现大量点状分布于胞内为解聚后的近肌球蛋白，细胞膜周缘极不规则，可见大量丝状伪足。②摩擦力刺激：单次刺激各组中，0.5Hz和1Hz组较空白对照组变化不大，可见微丝与细胞核染色加深，微丝排列较空白对照组无明显区别，2Hz组可见微丝与细胞核染色明显加深，微丝排列较空白对照组散乱；多次刺激各组中，0.5Hz组较空白对照组微丝及细胞核染色加深微丝分布较为散乱，微丝解聚变短，出现点状分布于胞内，未见丝状伪足，1Hz组细胞核与微丝明显深染，微丝明显解聚变短，排列无规则，出现点状分布于胞内为解聚后的近肌球蛋白，偶可见细胞膜丝状伪足，2Hz组细胞核与微丝更加深染，微丝明显解聚，排列无规则，出现大量点状分布于胞内。③张力刺激：单次刺激各组中，1000μstrain组可见细胞核及微丝染色加深，微丝排列较空白对照组稍乱；2000μstrain组可见细胞核及微丝染色加深，微丝排列较乱，明显解聚变短，排列无规则；3000μstrain组可见细胞核及微丝染色加深，微丝排列较乱，微丝明显解聚变短，排列无规则，偶可见点状颗粒分布于胞内；多次刺激各组中，1000μstrain组可见细胞核及微丝染色加深，微丝明显解聚变短，排列无规则，出现少许点状分布于胞内为解聚后的近肌球蛋白；2000μstrain组可见细胞核及微丝染色加深，微丝明显解聚变短，排列无规则，出现少许点状分布于胞内，出现沿力学方向细胞微丝与细胞核“脱离”；3000μstrain组可见细胞核及微丝染色加深，微丝明显解聚变短，排列无规则，出现少许点状分布于胞内，出现沿力学方向细胞微丝与细胞核“脱离”。 结论：体外压力、摩擦力和张力刺激过程中，经脉相关筋膜结缔组织成纤维细胞整合素—细胞骨架系统中整合素表达量和微丝形态学能发生相应改变。（1）经脉相关筋膜结缔组织成纤维细胞力感受分子整合素β1在感受不同体外压力、摩擦力、张力刺激的共同规律和差异特征是：①共同规律：单次刺激情况下，整合素β1在中重度刺激强度下表达量高，多次刺激情况下，整合素β1在轻中度刺激强度下表达量高。②差异特征：无论单次刺激还是多次刺激情况下，整合素β1在外力刺激下表达量总体虽成增高态势，但多次重度摩擦力刺激情况下，整合素β1表达相对空白状态呈现“翻转”情形，整合素β1表达受到抑制，表达量下降。（2）经脉相关筋膜结缔组织成纤维细胞力传递通路细胞骨架微丝在传导不同体外压力、摩擦力、张力刺激的共同规律和差异特征是：①共同规律：无论单次刺激还是多次刺激情况下，微丝形态结构的改变均呈现渐变特征，并且多次刺激的渐变特征比单次刺激的渐变特征变化明显。②差异特征：微丝在传导张力刺激时，其形态结构的改变比在传导压力和摩擦力刺激时更明显。（3）体外压力、摩擦力和张力刺激过程中，经脉相关筋膜结缔组织成纤维细胞整合素表达量和微丝形态学改变的规律从细胞力学角度可能揭示了针推基本机械力刺激在经脉相关筋膜结缔组织成纤维细胞的物理学信号感受和传导的细胞生物学原理，其针灸推拿学的临床意义可能是：①从信号感受的角度看：在临床治疗上，单次或短时间周期的治疗，可能适宜采用较重手法，使信号感受更为强烈；多次或长时间周期的治疗可能则适宜使用较轻的手法，使经穴的感受保持在较高水平。②从信号传递的角度看：能使经络腧穴受到张力刺激的手法，其信号传递效率更高。

分类号： R329.2