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转外源PhyA基因棉花植株的鉴定

文献类型： 会议论文

第一作者： 王霞

作者： 王霞 1 ; 马燕斌 2 ; 吴霞 2 ; 孙璇 2 ; 张树伟 2 ; 王新胜 2 ; 李燕娥 2 ;

作者机构： 1.运城学院生命科学系,山西运城 044000

2.山西省农业科学院棉花研究所,山西运城 044000

关键词： 棉花;转外源PhyA基因;蛋白表达;抗体检测

会议名称： 中国棉花学会2015年年会

主办单位： 中国棉花学会

页码： 76-76

摘要： 利用农杆菌介导法转化玉米phyA基因,在basta除草剂筛选条件下,通过组织培养获得了棉花再生植株.对T0代再生植株进行除草剂喷施后观测,部分再生植株对除草剂basta均有明显抗性,并保留抗性植株进行南繁繁育,后续利用Bar抗性基因和PhyA特异引物,利用PCR对抗性转基因植株的T0、T2代分别进行检测,电泳结果显示分别扩增得到约500bp和200bp的预期大小目标条带,表明外源基因在不同世代中均能够检测到.然后对T2代转基因植株的外源蛋白表达进行分析，提取蛋白后利用Myc标签特异抗体进行检测，结果表明外源基因能够在转基因株系的植株中正常表达为预期大小约165kD的蛋白。进一步选择其中2个株系进行蛋白表达分析，杂交结果表明，在转基因棉花植株的叶、茎、苞叶不同组织中外源蛋白均能正常表达。该检测结果表明该外源基因已经稳定整合到棉花基因组中，且外源基因能够正确表达成预期大小的蛋白目的条带。

分类号： S562.01

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