文献类型： 会议论文
第一作者： Weiwei ZENG
作者： Weiwei ZENG 1 ; 曾伟伟 1 ; Yingying WANG 1 ; 王英英 1 ; Jiyuan YIN 2 ;
作者机构： 1.中国水产科学研究院珠江水产研究所,农业部渔药创制重点实验室,广东省水生动物免疫重点实验室,广东广州 510380
2.中国水产科学研究院珠江水产研究所,农业部渔药
关键词： 草鱼出血病;呼肠孤病毒;核酸依赖性扩增检测技术;酶联免疫吸附法
会议名称： 第十四届中国实验动物科学年会
主办单位： 中国实验动物学会
页码： 00000432-00000441
摘要： 由草鱼呼肠孤病毒(,GCRV)引起的草鱼出血病给我国的草鱼养殖业造成了巨大的经济损失,早期诊断是防控草鱼出血病的关键.本研究基于NASBA及ELISA试验建立了一种分子水平上快速检测GCRV的方法.根据Ⅱ型GCRV的S6节段基因保守区域设计一对扩增引物及相应的捕获探针和检测探针,对NASBA反应体系中的K+离子浓度、引物浓度、RnaseH和T7RNA polymerase酶用量进行优化,然后采用ELISA方法检测NASBA扩增产物,建立了NASBA-ELISA方法,最后评价NASBA-ELISA方法的特异性、敏感性、重复性及对临床样品检测的可靠性.结果表明,本研究建立的NASBA-ELISA方法,可以在5个小时内检测出只有14拷贝/μL病毒含量的样本,对临床样品的诊断灵敏度和诊断特异性均为100％,具有很好的特异性,对其它非特异性核酸模板没有交叉反应.因此,本研究建立的NASBA-ELISA是一种快速、高效和敏感的病原检测方法,可用于草鱼养殖生产中GCRV病毒的快速检测.
分类号： S943.112:S941.411
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