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甘薯病毒病害SPVD的多重RT-PCR检测方法

专利类型: 中国发明申请

专利权人: 河南省农业科学院植物保护研究所

发明人: 张振臣;张盼;张德胜;乔奇;秦艳红;田雨婷;郑文明;王永江

专利号: CN201010565665.9

摘要: 本发明涉及一种危险性甘薯病毒病害SPVD的多重RT-PCR检测方法,先分别合成甘薯褪绿矮化病毒的引物、甘薯羽状斑驳病毒的引物、甘薯羽状斑驳病毒CH株系的上游引物,然后提取感染SPVD的甘薯叶片的总RNA作为PCR模板,进行反转录;将上述引物置于PCR反应体系中,以反转录产物作为模板,进行PCR扩增;PCR反应程序为:94℃预变性3min,94℃变性30s,54℃退火30s,72℃延伸40s,30个循环,最后72℃延伸10min;最后用琼脂糖凝胶电泳检测扩增产物。本发明建立了在一次PCR反应中即可检测出甘薯病毒病害SPVD是否存在的方法,并且可有效区分SPFMV的株系类型,检测效率提高,并能对SPVD的危险程度及时预警,为该病防控提供可靠依据。

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