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一种BL21(DE3)ΔaroA菌株的构建方法及其应用

专利类型: 中国发明申请

专利权人: 江苏省农业科学院

发明人: 巩元勇;倪万潮;郭书巧;束红梅;沙琴

专利号: CN201410346343.3

摘要: 本发明涉及生物载体领域,特别涉及一种BL21(DE3)ΔaroA菌株的构建方法及其应用。构建方法,包括以下步骤:构建aroA基因敲除打靶片段;将pKD46质粒转入BL21(DE3)菌株,获得BL21(DE3)/pKD46菌株;将aroA基因敲除打靶片段转化至该菌株,获得BL21(DE3)ΔaroA菌株。本发明提供的一种BL21(DE3)ΔaroA菌株的构建方法,采用大于500bp的同源侧翼序列,利用Red同源重组技术成功的敲除BL21(DE3)菌株的aroA基因;该菌株既可用于EPSPS功能互补验证,还实现了pET系统重组外源蛋白的大量表达,达到一举两得的效果。

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