专利类型： 中国发明申请
专利权人： 浙江省农业科学院
发明人： 潘建治;于福先;朱志伟;陈晓宇;黄菁
专利号： CN201110419778.2
摘要： 一种用于启动子分析的慢病毒T载体及其构建方法和应用，属于基因工程技术领域。该T载体基于慢病毒穿梭载体设计而成，将荧光素酶报告基因与绿色荧光蛋白报告基因通过内部核糖体进入位点相连接，可在同一顺反子中，表达两种不同的报告基因。该构建方法包括从慢病毒穿梭载体CSⅡ-EF-MCS-IRES2-Venus，使用AgeⅠ进行酶切，去除本身的EF启动子序列，加入荧光素酶报告基因及酶切位点NheⅠ、SwaⅠ和BamHⅠ，使用SwaⅠ酶切后，使用Taq酶和dTTP加T即为慢病毒T载体。该载体可直接通过TA克隆策略将基因5’调控区PCR扩增产物连接入载体中，进行启动子的活性分析，具有操作简单、制备成本低等特点。
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