专利类型: 中国发明申请
专利权人: 江苏省农业科学院
发明人: 张雪寒;何孔旺;卢维彩;赵攀登;温立斌;郭容利;李彬;王小敏;倪艳秀;吕立新;周俊明;俞正玉;茅爱华;周萍;沈江萍
专利号: CN201010118490.7
摘要: 本发明涉及肠出血性大肠杆菌O157:H7增强粘膜免疫多价融合型重组菌、重组蛋白制备方法及基因工程疫苗,属于生物制药领域。分别扩增出EHEC O157:H7的志贺毒素1和2的B亚基(Stx1B和Stx2B)、转位紧密素受体(Tir),依次串联,克隆入表达载体pGEX-4T-1中,而后将霍乱弧菌封闭小带毒素(zot)串联其后,即获得重组质粒pGEX-4T-1-2b-tir-1b-zot,在BL21(DE3)获得高效表达。经过高密度发酵和一系列的纯化程序获得高纯度的融合蛋白分子疫苗。该疫苗的制备工艺简捷、易于放大、重复性好,所获得目标蛋白纯度较高,动物试验证明可刺激机体在体液免疫、细胞免疫和粘膜免疫方面产生高效的免疫应答,免疫预防保护和治疗作用。
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