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克隆甘薯羽状斑驳病毒O株系和甘薯病毒C全长基因组序列的引物及克隆方法

专利类型: 中国发明申请

专利权人: 河南省农业科学院植物保护研究所

发明人: 秦艳红;张振臣;乔奇;张德胜;王永江;田雨婷;王爽;渠瑞娜

专利号: CN201610160979.8

摘要: 本发明公开了提供克隆甘薯羽状斑驳病毒O株系和甘薯病毒C全长基因组序列的引物,分别为克隆甘薯羽状斑驳病毒O株系引物、克隆甘薯病毒C全长基因组序列的引物和同时克隆甘薯羽状斑驳病毒O株系和甘薯病毒C全长基因组序列的引物。由于SPFMV和SPVC常常混合侵染甘薯,分离纯化极为困难,而且病毒在甘薯体内含量较低,利用纯化病毒的常规克隆方法很难获得其基因组全长序列。本发明利用SPCSV能促进SPFMV和SPVC在甘薯植株内含量升高的原理,以同时感染SPCSV、SPFMV‑O和SPVC病毒的甘薯植株为材料,提取感染病毒的甘薯植株叶片的总RNA,进行病毒全长基因组序列克隆,通过大量PCR扩增和测序,经比对、拼接后获得SPVC和SPFMV的基因组全长序列。

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