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一种荧光定量PCR检测微小原甲藻的方法

专利类型: 中国发明申请

专利权人: 中国水产科学研究院东海水产研究所

发明人: 张凤英;马凌波;石彦红;蒋科技;马春艳;马洪雨

专利号: CN200910198258.6

摘要: 本发明涉及一种荧光定量PCR检测微小原甲藻的方法,包括:(1)藻液的预处理:抽取样品藻液,离心收集细胞,然后用缓冲液洗涤后重悬,得待处理藻液;(2)荧光定量PCR引物及浓度优化:引物序列PM-1iF:CCCCCATGCAGAGACTCAA,PM-1iR:CAGCAAGGACAGGCACAGAA;引物终浓度为:200nmol/L;(3)微小原甲藻的细胞检测:将待处理藻液经处理后进行荧光定量PCR扩增,根据回归方程计算得到微小原甲藻的细胞个数及DNA含量。该方法具有操作简单,对环境友好,检测结果准确等优点,建立的标准曲线灵敏度高重复性好,标准曲线各点之间成高度线性,在藻类鉴定领域具有良好的应用前景。

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