专利类型： 中国发明申请
专利权人： 河南省农业科学院
发明人： 张振臣;张盼;乔奇;秦艳红;张德胜;田雨婷;王爽;王永江
专利号： CN201210061149.1
摘要： 本发明涉及一种烟粉虱中甘薯褪绿矮化病毒的半巢式RT-PCR检测方法，包括设计合成SPCSV病毒的3条引物CSV70P1、CSV70P2、CSV70P3；用解剖针挑取烟粉虱，放入加有预冷RNA提取液的离心管中，提取烟粉虱的总RNA作为PCR模板，进行反转录；以反转录产物作为模板，利用引物CSV70P1和CSV70P2进行半巢式RT-PCR的第一轮扩增，预期扩增片段大小为431bp；利用引物CSV70P1和CSV70P3进行半巢式RT-PCR的第二轮扩增，预期扩增片段大小为170bp；用琼脂糖凝胶电泳检测扩增产物。本发明方法能对单头或多头带毒的烟粉虱进行检测，阳性率为100%，能稳定地检测出单头或多头烟粉虱中的SPCSV，检测效率较高；检测出SPCSV时的cRNA最低浓度为5.69×101拷贝/µL，灵敏性较高。该方法能实现对烟粉虱带毒情况的有效监测，对加强烟粉虱的防治和病毒的蔓延扩散具有重要意义。
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