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猪肺炎支原体P36基因重组毕赤酵母及表达蛋白

专利类型: 中国发明申请

专利权人: 江苏省农业科学院

发明人: 邵国青;祝永琴;冯志新;刘茂军;王海燕;吴叙苏;甘源

专利号: CN200910027160.4

摘要: 本发明公开了一种猪肺炎支原体P36基因重组毕赤酵母及表达蛋白,涉及生物蛋白制备领域。设计引物PCR获得P36目的基因后克隆入pPICZα-A表达载体,重组表达质粒pPICZα-A/P36转化感受态毕赤酵母(Pichia pastoris)X-33,筛选到重组毕赤酵母X-33/pPICZα-A/P36。表达蛋白制备方法为,将阳性酵母菌接种到BMGY中,经甲醇诱导表达,表达蛋白以可溶形式存在上清液中。该方法制备的猪肺炎支原体P36蛋白较纯,且具有良好的免疫反应性,表达蛋白可用于P36蛋白的研究、猪肺炎支原体免疫检测试剂盒和基因工程疫苗的研制。

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