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蛋白质组学关键技术的优化改进及其在热带作物研究中的应用

文献类型： 获奖成果

作者：

作者机构：

获奖名称： 科技进步奖

获奖等级： 二等奖

关键词： 蛋;蛋白质组;技术;关键技术;优化;热带;蛋白质组学;蛋白;热带作物;关键;作物;蛋白质;研究;改进

第一完成单位： 中国热带农业科学院热带生物技术研究所

获奖时间： 2012

摘要： 1、课题来源与背景 本课题来源于自选课题。 2、研究目的与意义 本项目旨在优化改进蛋白质组学研究的关键技术，建立一套稳定的蛋白质组学实验技术体系，并应用到主要热带作物蛋白质组学研究中。本项目优化建立的蛋白质组学技术体系，可为其他科研单位或研究人员提供技术支持和参考，为今后开展比较蛋白质组学研究提供了很好的基础条件。 3、主要论点与论据本成果主要包括以下几方面内容： （1）针对热带作物多糖、多酚的特点，改进我们已发明的BPP蛋白提取专利技术，优化了蛋白等电聚焦条件及蛋白胶内酶解和质谱等技术，并应用于热带作物蛋白质组学研究中。 （2）针对热带地区高温高湿度的环境条件，我们摸索改进了一系列双向电泳的等电聚焦条件，得出展开热带作物蛋白质组研究时，等电聚焦时一定要保持一定的低温条件。 （3）优化改进CBB染色方法，将蛋白凝胶的固定、敏化、染色步骤合并，发明了一项GAP染色新技术，该技术既方便快捷，灵敏度也较高。 （4）首次应用世界先进的DIGE技术研究热带作物蛋白质组，并获得了首张高质量的热带作物蛋白质DIGE图谱； （5）将建立的2-DE和DIGE技术体系在不同热带作物（如橡胶、木薯、香蕉）及不同植物组织和器官（如橡胶粒子、形成层细胞、植物叶绿体等）蛋白质组学的相关研究中得到成功应用。 4、成果的创新点、先进性 （1）首次建立了针对热带作物材料的DIGE技术体系。 （2）国内首次优化改进了一种高效的蛋白质CBB 染色方法。 （3）首次用实验证明，加热变性会影响蛋白样品的2-DE实验和质谱鉴定结果。 （4）建立了适合于热带作物材料的蛋白质组学2-DE和DIGE技术体系，并在几种主要热带作物（如橡胶、木薯、香蕉、甘蔗等）中得到很好的研究结果。 5、社会经济效益，存在的问题社会效益： 发表高水平的SCI论文4篇；申请3项国家发明专利， 授权1项；带动培养了4名科研骨干和4名硕士生。经济效益：本成果所优化建立的蛋白质组学技术体系，可为其他科研单位或研究人员提供技术支持和参考，也可为热带作物抗病制剂的研发、优质品种选育等提供服务。存在问题：由于本成果实验成本较高，技术难度偏大，需要在专业实验室、由专业技术人员进行操作，在一定程度上影响本成果的推广利用，建议可通过建立蛋白质组学公共实验技术平台对外提供专业技术服务。

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