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斑点叉尾鮰肾脏细胞系建立及其呼肠孤病毒分离鉴定

文献类型： 获奖成果

作者：

获奖名称： 科技进步奖

获奖等级： 三等奖

关键词： 尾;斑点叉尾鮰;鉴定;肠;建立;斑点叉尾;分离鉴定;病毒分离;呼肠孤病毒;分离;肾脏;细胞;病毒分离鉴定;肾;细胞系;病毒

第一完成单位： 中国水产科学研究院长江水产研究所

获奖时间： 2012

摘要： 任务来源为基本科研业务费专项资金项目《斑点叉尾鮰出血病的病毒分离与鉴定》，编号2008JBFC04。 采用细胞培养法从患典型病症的病鱼体内分离培养病毒病原，并对病毒进行纯化，采用分子生物学技术与电镜超微显示技术对病毒进行鉴定。在细胞上大规模培养病毒，回收与纯化后采用病毒灭活剂对病毒灭活，优化最佳灭活条件，检测灭活效果，制备灭活疫苗，测定疫苗保护力，确定最佳免疫剂量与疫苗效应时间，以指导生产上的免疫防控工作。 建立1株斑点叉尾鮰肾脏组织细胞系，收集并保存3株斑点叉尾鮰细胞系；分离和鉴定1种斑点叉尾鮰出血病病毒病原，查明病毒的生物学特性；研究斑点叉尾鮰出血病病毒的基因组特征，分离、克隆、测序分析病毒5个主要结构基因；完成论文与报告10篇，发表4篇，投稿SCI论文2篇，申请专利1项（已受理）。在国内外首次建立的可连续传代的斑点叉尾鮰肾脏组织细胞系(CCK)，首次分离、鉴定了斑点叉尾鮰出血病的病原，并对病毒的部分基因组节段进行了克隆测序分析，对病毒引起的细胞凋亡效应进行了检测。此外，首次采用β丙内酯作为灭活剂，建立了斑点叉尾鮰出血病细胞培养灭活疫苗的制备方法，并对疫苗的安全性与免疫效果进行了评估。这些成果达到国内外同类研究先进水平。 本成果中的相关技术比较成熟，疫苗免疫技术可应用于斑点叉尾鮰病毒性出血病的免疫预防中。本疫苗使用安全。本成果在湖北宜昌枝江市、洪湖市、荆州市江陵县、荆州市林风农业发展有限公司、长江所窑湾实验场等斑点叉尾鮰养殖场应用，疫苗免疫保护率平均达70%以上，效果显著。目前存在的主要问题是，需要推动疫苗产业化进程，加强宣传推广力度，开展较大范围的示范应用试验。

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[1]斑点叉尾鮰出血病病原呼肠孤病毒的分离与鉴定. 曾令兵,徐进,李艳秋,王瑶,肖艺,范玉顶,周勇. 2009

[2]草鱼呼肠孤病毒JX-0902株的分离和鉴定. 刘永奎,王庆,曾伟伟,石存斌,张超,陈道印,吴淑勤. 2011

[3]黄颡鱼胰岛素样生长因子结合蛋白1基因的克隆及表达分析. 梁宏伟,李忠,罗相忠,邹桂伟. 2017

[4]草鱼呼肠孤病毒Ⅱ型在不同鱼类细胞中的增殖情况. 李贤,曾伟伟,王庆,王英英,李莹莹,宋新建,黄琦雯,石存斌,吴淑勤. 2016

[5]罗非鱼肾脏细胞系的建立及其生物学特性. 赵建青,贾鹏,刘文枝,周勇,江南,范玉顶,易梅生,曾令兵. 2019

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[9]黄霉素对建鲤和斑点叉尾抗缺氧能力的影响. 齐富刚,艾晓辉,袁科平,刘永涛. 2010

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[18]草鱼肠道纤维素酶产生菌主要种类的分离与鉴定. 何力,郝勃,谢从新,罗晓松,张征,朱祥云. 2009

[19]一株草鱼呼肠孤病毒弱毒株的分离、鉴定及免疫原性初步分析. 曾伟伟,王庆,刘永奎,张乐生,刘宝芹,石存斌,吴淑勤. 2011

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