牛干扰素-tau基因的原核表达及生物功能鉴定

高方方; 吴忠义; 曾申明; 《农业生物技术学报 》 2008 北大核心 CSCD

摘要：采用PCR方法直接从牛早期胚胎细胞中扩增牛干扰素-tau(bovine interferon-tau,bIFN-τ)基因,并克隆到pGEM-T载体中。然后将含信号肽和不含信号肽的bIFN-τ片段分别与原核表达载体pET-30a(+)连接,并用IPTG诱导表达。重组蛋白经Ni2+亲合层析纯化后,通过抗病毒检测和对靶细胞形态变化的影响检验其生物学功能。实验结果显示,以胚胎裂解液为模板、不提取胚胎基因组DNA,可以从少量(5枚)的牛囊胚中直接扩增出bIFN-!基因,与GenBank(XM-593584)序列相比,核苷酸和氨基酸的同源性分别为99%和97%;不含信号肽序列的重组质粒诱导表达后,经SDS-PAGE电泳检测发现约在20kD处出现特异性蛋白条带,与目标蛋白分子量一致;纯化后重组蛋白的抗病毒活性单位为1×104IU/mg;在牛子宫内膜上皮细胞培养液中添加2.9μg/mL纯化的rbIFN-!蛋白后24h,细胞体积明显增大,细胞内出现囊泡状结构。表明实验获得了具有一定生物活性的rbIFN-!蛋白。

关键词： 牛IFN-τ 克隆 原核表达 生物活性

 全文链接 请求原文

产芽孢细菌T99生防作用评价及其活性产物分析

赵爽; 刘伟成; 裘季燕; 刘霆; 周立刚; 《中国生物防治 》 2008 北大核心 CSCD

摘要：从京郊菜田土壤中分离获得一株具显著抗菌活性的产芽孢细菌T99。室内离体测定表明其对多种植物病原真菌及细菌均具很好的抑制作用,对峙培养法测定对苹果轮纹病菌的抑菌带宽达15mm;牛津杯法测定对蜡状芽孢杆菌抑菌圈直径达24mm。温室和田间小区防治试验其对甘蓝枯萎病的防治效果分别达89.9%和81.5%,优于对照药剂多菌灵。其发酵液中的抗菌物质耐酸碱、抗热性和抗紫外照射能力强,且可用硫酸铵沉淀法和正丁醇单一溶剂提取。粗提物对蜡状芽孢杆菌的最小抑制浓度为350μg/ml。

关键词： 产芽孢杆菌 活性产物 抑菌活性

 全文链接 请求原文

苹果主要害虫的演变及原因分析

崔洪莹; 虞国跃; 《北方园艺 》 2008 北大核心

摘要：苹果园内植食性昆虫种群数量的上升和主要种类的变替,原因是多方面的。其主要虫害会随着农药的施用、品种的替换、不同的农事而发生变化,因此不同年代主要的虫害并不恒定,随着时间而变化。对我国苹果主要产区过去50多年重要害虫的发生及种类演替进行综述,并分析其原因。导致演替的主要原因有以下几种:不合理使用农药;新的管理措施的应用,如套袋技术、生草果园及生态苹果园的推广等;新害虫的入侵等。

关键词： 苹果 害虫 演替 农药 生态果园

 全文链接 请求原文

借鉴国外经验发展中国蜜蜂授粉

王凤鹤; 杨甫; 《世界农业 》 2008 北大核心

摘要：中国现阶段在蜜蜂授粉研究应用上取得了一定的成果,但要在真正意义上实现蜜蜂授粉在农业生产中的规模授粉应用存在很大的难度。本文将世界一些进行蜜蜂授粉比较先进的国家进行了简单的介绍,综合分析了蜜蜂授粉现状及其在生产应用中存在的问题。

 全文链接 请求原文

中国化肥资源供需矛盾及调控策略

张卫峰; 季玥秀; 马文奇; 王利; 王雁峰; 《自然资源学报 》 2008 北大核心 CSCD

摘要：鉴于中国化肥供需形势不清给产业调控带来不确定性影响,论文分析了化肥资源供需矛盾,并提出了相关调控策略。结果表明,中国化肥供需总量已经接近平衡,氮磷钾化肥的自给率分别达到100%、95%和29%。少部分产品存在缺口,其中氯化钾的自给率为23%,是当前我国惟一紧缺的化肥产品。随着化肥生产向资源产地集中,中国化肥供需时空不平衡有扩大的趋势。部分时间段的供需不平衡异常尖锐,其中10月份至来年3月份全国化肥供应过剩超过900×104t,而部分月份却极端不足,例如7月份两广、东北等地的尿素缺口达200×104t左右,10月份华北地区的磷酸二铵缺口达到100×104t左右,而5、7、8三个月中两广地区的钾肥缺口也超过100×104t。建议国家加强储备工作,储备化肥消费量的15%,其中10%储备在淡季,以减少过剩的压力,而5%储备在旺季,以应对市场供不应求。

关键词： 化肥资源 供需矛盾 调控策略 中国

 全文链接 请求原文

澳大利亚一鸡场暴发禽霍乱的诊断

龚玉梅; 荣方; 佟瑞平; 孙惠玲; 王宏俊; 张培君; PAT Blackall; 《动物医学进展 》 2008 北大核心

摘要：用PCR、脂扩散试验和限制性酶分析(REA)三种方法,对澳大利亚一鸡场2002年6月暴发的禽霍乱进行了诊断,结果表明,这次暴发系由血清4型多杀性巴氏杆菌所致。与1994年在该鸡场分离到的11株多杀性巴氏杆菌进行了比较,结果表明导致这次暴发的病原菌与导致1994年暴发的病原菌在分子水平上不存在差异。

关键词： 禽霍乱 多杀性巴氏杆菌 限制性内切酶分析

 全文链接 请求原文

采用RNA干扰技术分析拟南芥Ca~(2+)泵基因ECAJ的功能

朱炜; 黄丛林; 张秀海; 王永勤; 魏建民; 于荣; 吴忠义; 《植物生理学通讯 》 2008 北大核心 CSCD

摘要：构建了含拟南芥Ca~(2+)泵基因ECA1特异片段反向重复结构的RNA干扰(RNAi)载体,以根癌农杆菌介导转化拟南芥,用卡那霉素筛选和PCR检测,获得了11个T_3代纯合体转基因株系;半定量RT-PCR方法检测ECA1在转基因株系中转录的结果表明,其转录产物比野生型(WT)明显低,且转基因株系之间差异明显,表达水平有一个梯度关系;在1/2MS培养基上转基因株系与野生型的差异不明显,相对于野生型而言,在相对低Ca~(2+)(0.2mmol·L~(-1))或相对高Mn~(2+)(0.5 mmol·L~(-1))的培养基上的转基因株系生长受到不同程度的抑制,ECA1转录量越低,生长受到的抑制越大。据此认为:ECA1对植物的生长发育和抵御逆境胁迫有作用。

关键词： Ca~(2+)泵 RNA干扰(RNAi) 转录后基因沉默

 全文链接 请求原文

利用RNAi技术提高玉米直链淀粉含量

郭新梅; 张晓东; 梁荣奇; 陈绪清; 杨凤萍; 柳青; 宋希云; 《农业生物技术学报 》 2008 北大核心 CSCD

摘要：为了提高玉米直链淀粉含量,用基因枪将前期工作中构建的sbeⅡb RNAi表达载体pBAC413导入玉米(Zea mays)自交系幼胚愈伤组织,经过筛选获得了12株转化再生植株,其中6株获得了结实种子。DNA点杂交、PCR扩增和PCR-Southern均证明目的基因已整合到T_0代再生植株玉米基因组中。对T_1代转基因玉米籽粒淀粉含量进行测定,结果表明总淀粉含量比对照没有显著变化,其中1个转基因玉米株系的直链淀粉含量比对照提高了15.6%。

关键词： 玉米 淀粉分支酶 RNAi 直链淀粉

 全文链接 请求原文

温湿度对紫叶黄栌光合特性变化的影响

陈磊; 潘青华; 金洪; 《中国农学通报 》 2008 北大核心

摘要：用CI-340便携式光合测定仪测定紫叶黄栌的光合速率、蒸腾速率、气孔导度和胞间CO2浓度的变化,研究温度和湿度对紫叶黄栌光合特性的影响。结果表明:在温度一定的情况下,光合速率、蒸腾速率、气孔导度、胞间CO2浓度随着湿度的增大而降低;相对湿度和温度与光合速率、蒸腾速率、气孔导度、胞间CO2浓度显著相关;光合速率、气孔导度和胞间CO2浓度受湿度和温度的影响较大,蒸腾速率受湿度和温度的影响较小。

关键词： 紫叶黄栌 光合特性 相关性 差异分析

 全文链接 请求原文

缺铁和过量重碳酸盐胁迫下丛枝菌根真菌对枳生长的影响

王明元; 夏仁学; 王幼珊; 周开兵; 王鹏; 倪海枝; 《园艺学报 》 2008 北大核心 CSCD

摘要：采用盆栽沙培试验,研究了缺铁及重碳酸盐胁迫下丛枝菌根(arbuscular mycorrhiza,AM)真菌地表球囊霉(Glomus versiforme)对枳[Poncirus trifoliata(L.)Raf.]实生苗生长及植株铁营养状况的影响。结果表明,在pH7.0和pH8.0的重碳酸盐胁迫下,与未接种处理相比,接种AM真菌显著增加了枳实生苗的株高、茎粗、地上部和地下部干样质量,并且明显促进了叶片叶绿素和活性铁的积累,显著提高了叶片Fe/P的比值,减轻了枳因缺铁引起的黄化现象。

关键词： 柑橘 枳 丛枝菌根真菌 实生苗 重碳酸盐 活性铁

 全文链接 请求原文