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采用RNA干扰技术分析拟南芥Ca~(2+)泵基因ECAJ的功能

文献类型： 中文期刊

作者： 朱炜 1 ; 黄丛林 2 ; 张秀海 2 ; 王永勤 2 ; 魏建民 2 ; 于荣 2 ; 吴忠义 2 ;

作者机构： 1.北京市农林科学院北京农业生物技术研究中心

2.北京市农林科学院北京农业生物技术研究中心;内蒙古农业大学生物工程学院;首都师范大学生命科学学院

关键词： Ca~(2+)泵;RNA干扰(RNAi);转录后基因沉默

期刊名称： 植物生理学通讯

ISSN： 0412-0922

年卷期： 2008 年 44 卷 03 期

页码： 469-475

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 构建了含拟南芥Ca~(2+)泵基因ECA1特异片段反向重复结构的RNA干扰(RNAi)载体,以根癌农杆菌介导转化拟南芥,用卡那霉素筛选和PCR检测,获得了11个T_3代纯合体转基因株系;半定量RT-PCR方法检测ECA1在转基因株系中转录的结果表明,其转录产物比野生型(WT)明显低,且转基因株系之间差异明显,表达水平有一个梯度关系;在1/2MS培养基上转基因株系与野生型的差异不明显,相对于野生型而言,在相对低Ca~(2+)(0.2mmol·L~(-1))或相对高Mn~(2+)(0.5 mmol·L~(-1))的培养基上的转基因株系生长受到不同程度的抑制,ECA1转录量越低,生长受到的抑制越大。据此认为:ECA1对植物的生长发育和抵御逆境胁迫有作用。

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