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无芒稗质体ACCase基因Real-time PCR定量方法的建立

热带作物学报 2013 CSCD

摘要:为研究一种抗精喹禾灵无芒稗的抗药性机理,建立了一种以β-actin为内参基因利用实时荧光定量PCR技术测定抗性无芒稗质体ACCase基因相对表达水平的方法。分析结果表明,设计的实时定量引物特异性非常好,内参基因、目的基因的扩增效率分别为103.2%、104.3%,线性相关系数分别为0.993 0、0.991 2,完全满足Real-time PCR定量方法的要求。所建立的无芒稗质体型ACCase基因Real-time PCR定量方法将为研究质体型ACCase基因的表达和杂草对ACCase抑制剂的抗药性机制研究提供方法学参考。

关键词: 无芒稗 质体ACCase 基因表达 Real-time PCR

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龙眼采后腐烂相关细菌与真菌的分离与鉴定

保鲜与加工 2013

摘要:采用稀释涂布平板法,从龙眼腐烂果实中分离细菌和真菌,并结合菌落形态观察以及16S rDNA和ITS序列分析对所分离的细菌和真菌进行鉴定。结果表明,采用稀释涂布平板法,从龙眼腐烂果实中分离得到11株细菌和7株真菌。菌落形态观察以及16S rDNA和ITS序列分析结果表明,所分离的细菌主要鉴定为奥斯陆莫拉菌、短小芽胞杆菌、柠檬明串珠菌、肠膜状明串珠菌和东方醋酸菌。所分离的真菌主要鉴定为淡色生赤壳菌、葡萄座腔菌科真菌、间座壳菌、疖葡萄座腔菌和木贼镰孢菌。从龙眼腐烂果实中分离到的细菌和真菌目前在龙眼采后病害中未见相关报道,对于其致病性检测还有待于进一步的回接验证,以明确导致采后龙眼果实腐烂的主导微生物。

关键词: 龙眼 采后 细菌 真菌 鉴定

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橡胶树热研7-20-59、PR107、RRIM600品种生理特性比较

安徽农业科学 2013 北大核心

摘要:[目的]研究橡胶树高产品种热研7-20-59的生理特性,为该品种生产应用时设计适宜的割胶制度提供理论依据,保证其高产稳产。[方法]以热研7-20-59、PR107、RRIM600等3个橡胶品种为试验材料,采用胶乳生理诊断方法,比较不同品种的干胶产量及各项生理指标。[结果]3个品种的年株干胶产量、胶乳干胶含量、总固形物含量、蔗糖含量、硫醇含量从大到小顺序均为PR107、热研7-20-59、RRIM600,无机磷含量、镁离子含量从大到小顺序为热研7-20-59、PR107、RRIM600。[结论]热研7-20-59胶乳再生能力强,蔗糖利用率高,乳管代谢活性强,是一个综合性状优良的高产品种,可适当采用乙烯利刺激。

关键词: 橡胶树 热研7-20-59 PR107 RRIM600 生理参数

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木薯遗传图谱16号连锁群与其细胞学图谱的整合

热带作物学报 2013 CSCD

摘要:利用荧光原位PCR技术体系整合木薯的分子遗传图谱,将16号连锁群上的NS376和SSRY86标记定位到华南6号木薯的染色体上,结果表明:这2个标记均能在华南6号不同时期的细胞上检测到1个信号。结合核型分析,将NS376标记定位在华南6号的第4号染色体的短臂上,扩增位点到着丝粒的百分距离是31.25,将SSRY86标记定位在第4号染色体的长臂上,扩增位点到着丝粒的百分距离是75.86。NS376和SSRY86 2个标记位于木薯的同一对染色体上,并且分别位于该染色体的两端,进一步揭示了16号连锁群对应的是木薯的4号染色体。

关键词: 木薯 分子细胞遗传图谱 荧光原位PCR 连锁群 物理定位

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甲基氨草磷对橡胶树悬浮细胞同步化及微核诱导的影响

热带农业科学 2013

摘要:植物微原生质体融合(microprotoplast fusion)是将部分基因组转移而又避免染色体损伤的不对称融合技术,微原生质体成功诱导是微原生质体融合的先决条件。本研究在摸索甲基氨草磷(amiprophos-methyl,APM)对橡胶树悬浮细胞有丝分裂中期指数和染色体形态影响基础上,研究了酶解时间及酶解过程中添加APM对微原生质体产量的影响。结果发现,悬浮细胞随APM处理浓度和时间的增加,有丝分裂中期指数先升高再下降,处理12 h时达到最大值;染色体聚集程度也先增加再降低,处理16 h时染色体开始解聚。在酶解过程中添加APM和延长酶解时间会大大降低微原生质体的产量。悬浮细胞经过1μmol/L APM处理10 h后,酶解10 h,中期细胞可达到79.4%,微核化细胞指数达到7.3%,从而建立了APM诱导橡胶树悬浮细胞同步化及高效获得橡胶树微化细胞的方法。

关键词: 橡胶树 APM 微原生质体

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3种椰子基因组DNA提取方法的比较

中国农学通报 2013 北大核心 CSCD

摘要:旨在得到一套快速提取椰子DNA的方法。采用CTAB小样法、SDS-CTAB法以及PVP法提取椰子组织的DNA,并通过后续的PCR扩增和酶切等实验比较了3种方法所提取的DNA质量的优劣。将CTAB小样法提取的DNA与SDS-CTAB法和PVP法提取的DNA进行了比较,CTAB小样法提取的DNA的OD260/OD280(1.839)较另外2种方法 SDS-CTAB法(1.709)和PVP法(1.613)的值更高,CTAB小样法提取的DNA适合于PCR扩增,扩增的条带清晰,且特异性好。此外,CTAB小样法提取的DNA,酶切也较为均匀。CTAB小样法能高效地提取椰子的DNA,并且能一次提取大量的高质量DNA样品,因而能满足高通量的实验要求,同提取DNA能较好地满足下游的分子生物学研究。

关键词: 椰子 DNA提取 CTAB法 SDS法 PVP法

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高效液相色谱法测定几种热带水果ATP、ADP和AMP含量

果树学报 2013 北大核心 CSCD

摘要:【目的】为了更好地了解热带水果能量组分含量和能量供应水平对果实采后保鲜的影响,【方法】以番石榴、番荔枝、荔枝、龙眼的果实为试材,通过优化色谱法流动相和检测波长的条件,使用高效液相色谱法测定新鲜和保鲜结束时这4种果实中ATP(三磷酸腺苷)、ADP(二磷酸腺苷)和AMP(一磷酸腺苷)的含量。【结果】当色谱条件为安捷伦C18色谱柱(250 mm×4.5 mm,5μm);柱温为30°C;进样体积10μL;紫外检测波长259 nm;流速为1.0 mL·min-1,流动相为35 mmol·L-1NaH2PO4缓冲液时,ATP、ADP和AMP在1~50 mg·L-1内与峰面积呈良好的线性关系,线性相关系数分别为0.999 1,0.998 8和0.999 2,加标回收率分别为97.49%~99.37%,96.59%~99.21%和97.87%~99.26%。日内精密度分别为1.14%、4.09%和3.32%,日间精密度分别为2.90%、2.31%和5.71%。【结论】该方法避免了有机流动相甲醇和乙腈的使用,具有灵敏性高、准确、重复性好等优点,可应用于热带水果能荷组分分析和能荷值的计算。

关键词: 热带水果 三磷酸腺苷 能荷 高效液相色谱

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热带农业废弃物的饲料化利用研究进展

热带农业科学 2013

摘要:在我国华南等热带地区,每年有大量的热带田间废弃物资源被浪费。综述甘蔗尾叶、香蕉茎叶、菠萝叶3种主要的热带农业废弃物的饲料利用现状,以及不同的加工处理方法对农业废弃物饲料营养价值的影响。

关键词: 甘蔗 菠萝 香蕉 饲料 农业废弃物

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八门湾红树林土壤可培养真菌的多样性分析

热带作物学报 2013 CSCD

摘要:以文昌市八门湾红树林海莲林区和海漆林区土壤样品作为研究对象,采用稀释平板分离法对土壤样品中的真菌进行了分离,通过形态学观察和ITS-rDNA序列分析对分离得到的真菌进行鉴定,通过生态学指数统计分析,研究了红树林土壤可培养真菌的优势类群及多样性,共分离到真菌206株,包括21个属和无孢类群。两种生境土壤中真菌的主要优势类群是青霉属(Penicillium)、曲霉属(Aspergillus)和木霉属(Trichoderma);Shannon-Wiener多样性指数(H′)为1.688~2.281、Pielou均匀度指数(JSW)为0.745~0.864、Margalef丰富度指数(DMA)为1.755~3.415;相似性系数分析结果显示不同土壤样品间真菌种属组成相似性系数(CS)在0.545~0.737,表明土壤可培养真菌种属组成存在空间上的差异;分离得到的菌株中DF12098和HF12701与Genbank中已经报道的基因序列相似性分别为93%和97%,具有进一步研究的价值,以确定是否是新的微生物菌种资源。

关键词: 真菌 分离鉴定 ITS-rDNA序列 多样性 红树林

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‘金煌’杧胚正常与胚败育果实内源多胺的变化

热带作物学报 2013 CSCD

摘要:通过对果实中自由态多胺(PAs)含量与胚胎败育关系研究发现:腐胺(Put)是杧果PAs的主要组成部分。败育胚胎的腐胺、亚精胺(Spd)、精胺(Spm)的含量以及(Spd+Spm)/Put、Spm/PAs的比值均小于胚胎发育正常果实,且差异显著。在胚胎败育的关键时期,胚胎正常果肉中Put、Spd的含量升高的幅度大于胚胎败育的,但是(Spd+Spm)/Put、Spm/PAs与胚胎败育果实果肉相比下降,这些因素与胚胎败育有关;果肉中Put含量维持在高水平的时间较长,Spm含量及其Spm/PAs比值在40 d后急剧升高为胚胎正常发育的果实在体积上超过败育的起到重要的作用。

关键词: 杧果 胚胎败育 多胺

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