科研产出
猪肺炎支原体主要抗原蛋白的研究进展
《中国农学通报 》 2013 北大核心 CSCD
摘要:猪肺炎支原体(Mycoplasma hyopneumoniae,Mhp)是引起猪支原体肺炎(Mycoplasma pneumoniae of Swine,MPS)的病原,给养猪业造成巨大的经济损失。由于对具有良好免疫原性的Mhp特异性蛋白缺少深入研究,使得Mhp在致病机制、血清学检测方法和新型疫苗的研究发展上受到一定限制,从而影响了对MPS的控制。本研究综合Mhp主要粘附因子、膜蛋白及细胞质蛋白等主要抗原蛋白的研究进展,为该病原致病机理研究、建立特异性诊断方法和推动基因工程疫苗发展提供一定的理论基础,对MPS的正确诊断、检测、免疫预防和控制也有重要意义。
关键词: 猪肺炎支原体 特异性抗原蛋白 特异性诊断方法 疫苗
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菜用型甘薯多酚含量的测定及其基因型差异
《江西农业学报 》 2013
摘要:筛选了7个菜用型甘薯品种(系),采用L9(34)正交试验,研究了Na2CO3量、反应温度、FC添加量与反应时间对多酚反应效率的影响,进而选出最适反应条件,并分析多酚含量的不同基因型差异。结果显示,多酚反应体系最佳组合:6 mL 10%Na2CO3、2 mL Folin-Ciocalten、反应温度35℃、反应时间30 min;确定这4个因素的影响主次顺序为:Na2CO3>FC添加量>反应温度>反应时间。统计分析结果表明,菜用型甘薯叶的多酚含量在基因型间存在一定差异,其中含量较高的福薯7-6与福薯10,分别达4.47和3.96 mg/g FW,与其它品种(系)差异极显著,而与福薯10遗传背景相似的福薯11,多酚含量最低,为1.67 mg/g FW。
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大豆花叶病毒诱导的应用于膜蛋白酵母双杂交的大豆cDNA文库构建
《植物病理学报 》 2013 北大核心 CSCD
摘要:前言大豆花叶病毒(Soybean mosaic virus,SMV)是大豆上最普遍的病害之一,严重影响大豆的产量和品质,通过筛选与病毒互作的寄主蛋白,根据互作蛋白的功能和两者的作用机制可揭示病毒侵染的分子机制。对于病毒编码的膜蛋白或者膜相关特性的蛋白,由于具有膜结合特性,在生物体内的互作多发生在膜上。传统的酵母双杂交系统发生在核内,试剂盒的载体上加了核定位信号
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玉米芯诱导米根霉生成葡萄糖淀粉酶的研究
《现代食品科技 》 2013
摘要:本研究发现,玉米芯能够使菌株CL-6生成葡萄糖淀粉酶的时间缩短为原来的1/3。于是,对菌株CL-6进行鉴定,并分析了玉米芯中的糖类成分以探究其中诱导因子的化学成分。菌株的鉴定采用形态学和ITS序列分子鉴定方法,葡萄糖淀粉酶酶活测定方法采用葡萄糖氧化酶法,发酵体系采用液体摇瓶发酵法,玉米芯中糖类成分的测定采用薄层层析和高效液相示差折光检测法。结果表明,菌株CL-6为米根霉属。玉米芯中水溶性成分中的糖类成分为蔗糖、葡萄糖、果糖和麦芽糖,其含量为520.33、242.67、228.67、30.33 mg/2.5 g湿基。通过分析在米根霉CL-6液体发酵体系中加入玉米芯、玉米芯水溶性成分、玉米芯水溶性成分中的糖类成分以及玉米芯水溶性成分中分子量高于8~14.4 kDa成分对其葡萄糖淀粉酶酶活的影响,本研究推测,玉米芯中的诱导因子为分子量高于8~14.4 kDa的水溶性物质而非糖类成分。
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堆肥预处理温度控制促进麦秸厌氧发酵产沼气
《农业工程学报 》 2013 EI 北大核心 CSCD
摘要:为阐释温度在堆肥预处理影响秸秆厌氧发酵产沼气中的作用,以麦秸为原料,研究堆肥不同升温阶段麦秸的厌氧发酵产气特性,并以麦秸堆肥的温度数据为基础,以灭菌后的麦秸为原料进行模拟堆肥(不同温度处理),模拟堆肥后的麦秸进行厌氧发酵产沼气。结果表明,在堆温升至55℃前,麦秸干物质(TS)损失率为4.06%,当堆温升至55℃后麦秸TS损失率迅速增加,堆肥10 d后麦秸TS损失率达22.45%;堆肥后麦秸厌氧发酵产气速率并无明显提高,TS产气量随堆肥时间先增加后降低,以堆温升至55℃时麦秸TS产气量最大,为349.92 mL/g,较开始堆肥增加了7.56%,扣除堆肥造成麦秸有机物损失,堆肥预处理对麦秸产气量并无明显促进;当堆温超过55℃以上9 d的麦秸产气量仅为开始堆肥的66.58%。模拟堆肥的结果表明,不同温度处理对麦秸有机物损失、物质组成均有较大影响,模拟堆肥后麦秸半纤维素大幅降低了28.10%,TS产气量随处理温度、处理时间的增加先增加后降低,当处理温度为55℃时获得最大TS产气量,为342.36 mL/g,较未处理提高了8.35%;随着处理温度的提高和处理时间的延长,麦秸TS产气量逐渐降低。以上结果表明,堆肥预处理产生的高温对破坏秸秆物质结构、提高其厌氧生物转化性能有较大影响,当秸秆堆体温度升至55℃时应停止堆肥,进行厌氧发酵产沼气。该文可为堆肥预处理在秸秆沼气工程中应用提供参考。
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弓形虫重组MIC3蛋白间接ELISA检测方法的建立
《中国兽医科学 》 2013 北大核心 CSCD
摘要:为检测弓形虫特异性抗体,以纯化的重组MIC3蛋白作为包被抗原,用羊抗猪IgG-HRP作为酶标二抗,分别对抗原浓度、血清稀释度、酶标二抗稀释度以及作用时间等进行了优化,初步建立了检测弓形虫特异性抗体的间接ELISA方法。结果显示,该方法检测猪球虫、猪肺炎支原体、猪圆环病毒2型、副猪嗜血杆菌等阳性血清均为阴性,表明该方法具有良好的特异性。组内和组间重复性试验的变异系数均小于8%,表明该方法具有较好的重复性。应用所建立的ELISA方法和商品化试剂盒A(IHA)、B(ELISA)同时检测从南京某猪场采集的猪血清样品166份,符合率分别可达94.58%和95.78%。该方法为我国进行弓形虫病的诊断与流行病学调查提供了一种技术手段,并为试剂盒的研制与开发奠定了前期工作基础。
关键词: 刚地弓形虫 MIC3蛋白 酶联免疫吸附试验 抗体检测
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猪圆环病毒2型Rep蛋白基因的原核表达及间接ELISA抗体检测方法的建立
《中国兽医学报 》 2013 北大核心 CSCD
摘要:采用PCR方法扩增猪圆环病毒2型(PCV-2)Rep蛋白基因,克隆入原核表达载体pET-32a(+),转化大肠杆菌BL21构建重组表达菌,经SDS-PAGE检测目的蛋白得到成功表达,采用His标签单抗和PCV-2阳性猪血清进行Western blot鉴定表明重组蛋白具有良好的抗原性。利用纯化的重组蛋白rRep作为包被抗原,通过反应条件优化,建立了间接ELISA抗体检测方法。抗原最适包被质量浓度为1mg/L(0.1μg/孔),待检血清最适稀释度为1∶100,作用时间为1h,酶标抗体最适稀释度为1∶3 000。用该方法检测猪瘟病毒(CSFV)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、伪狂犬病病毒(PRV)阳性血清,结果均为阴性;批内和批间重复试验变异系数分别为<5%和<10%,表明本方法具有较好的特异性和重复性。应用rRep-ELISA对113份血清样品进行检测,与rCap-ELISA结果比较,rRep-ELISA检测阳性率为50.44%(57/113),略低于后者的54.87%(62/113),2种方法检测符合率为88.5%(100/113),具有较好的一致性。这为PCV-2感染的流行病学调查和新型ELISA诊断试剂盒的研制奠定基础。
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PCR技术检测猪肺炎支原体的研究进展(英文)
《Agricultural Science & Technology 》 2013
摘要:猪肺炎支原体(Mycoplasma hyopneu-moniae)是引起猪支原体肺炎的重要病原,该病常引起继发感染和混合感染,严重威胁养猪业发展,引起巨大的经济损失。利用PCR技术对猪支原体肺炎早期正确诊断具有非常重要的意义。本文从猪肺炎支原体的特异性靶基因、临床样品采集方法及样品DNA处理方法关键技术因素及普通PCR技术、多重PCR技术、套式PCR技术、荧光定量PCR技术、芯片检测、环介导等温扩增技术等在猪肺炎支原体检测中的研究进展、主要优缺点及应用进行综述,为有效地诊断和防治气喘病提供便利。
关键词: 猪支原体肺炎 猪肺炎支原体 PCR检测 临床样品采集
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江苏省财政农业投入的资源配置与机制设计
《江苏农业科学 》 2013 北大核心
摘要:分析了江苏省财政农业投入的状况、目标和效率,提出了江苏在率先基本实现农业现代化情况下,应加大对农业科研、农业社会化服务体系、新型农民培育、农业基础设施和农业生态建设的财政投入力度。在此基础上,构建了江苏财政农业投入的长效性、市场衔接、激励引导、绩效管理和监督调控的机制设计。
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