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橡胶树HbMVD1基因启动子克隆及转录调控因子筛选

热带作物学报 2025 北大核心 CSCD

摘要:转录调控是生命活动的重要调控方式之一。天然橡胶是一种重要的工业原材料,主要来源于橡胶树。天然橡胶生物合成的转录调控是近年来橡胶树基础研究领域的热点之一。焦磷酸甲羟戊酸脱羧酶(MVD)是天然橡胶生物合成途径的关键酶,目前对其转录调控尚不清楚。本研究克隆了长度为1500 bp的橡胶树HbMVD1启动子,序列分析显示其含有茉莉酸响应、乙烯响应、机械伤害响应、光响应、MYC结合等顺式作用元件。自激活抑制梯度试验显示,AbA浓度为100 ng/mL时,pAbAi-pHbMVD1诱饵载体的转录自激活得到有效抑制。利用酵母单杂交技术从橡胶树胶乳酵母cDNA文库共筛选到13个与HbMVD1启动子结合的非冗余蛋白,包括1个WRKY转录因子(HbWRKY1)、1个热激转录因子、1个G-box结合因子。组织特异性分析显示这些蛋白的编码基因在不同组织间存在不同的表达模式。转录调控分析显示HbWRKY1在体内可以激活HbMVD1基因的表达。分子对接发现,HbWRKY1与HbMVD1启动子的机械伤害响应元件结合,并鉴定到11个潜在的氨基酸结合位点。本研究为进一步揭示橡胶树HbMVD1转录调控网络奠定基础。

关键词: 橡胶树 HbMVD1启动子 酵母单杂交 转录因子 转录调控

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我国胡椒病虫害发生与防治研究进展

植物保护 2025 北大核心 CSCD

摘要:胡椒被称为“世界香料之王”,主要分布于热带、亚热带地区,目前,我国是世界第六大胡椒生产国。近年来,随着海南胡椒交易中心的成立,我国胡椒的知名度和价格大幅提升,胡椒种植面积不断扩大,胡椒病虫害的种类和发生为害程度也在不断增加和变化。2013年前,我国胡椒病害有32种,害虫有30种,目前调查显示病害已增加至35种(新增3种病毒病),害虫增加至49种(其中明确了胡椒仓储害虫种类)。尽管主要发生的8种病害种类未发生明显变化,但受环境及种植结构改变的影响,其发生危害程度不断演替,主要害虫的种类和发生程度均出现显著变化,如曾经发生较重的南洋臀纹粉蚧Planococcus lilacinus和丽绿刺蛾Parasa lepida目前已被为害较重的棉蚜、粉蚧(双条拂粉蚧Ferrisia virgata、长尾粉蚧Pseudococcus longispinus、柑橘臀纹粉蚧Planococcus citri)、盾蚧(樟白轮盾蚧Aulacaspis yabunikkei和矢尖盾蚧Unaspis yanonensis)及茶角盲蝽Helopeltis theivora等代替,此外近年来仓储害虫烟草窃蠹对仓储胡椒为害加重。本文系统总结了我国自引种胡椒以来,研究者对胡椒病虫害种类、主要病虫害的发生为害特点、发生规律及防控技术等方面的研究成果,分析了当前胡椒病虫害监测与防控方面存在的主要问题并提出对策建议,以期为我国胡椒产业的绿色可持续发展提供参考和指导。

关键词: 胡椒 病虫害 发生规律 防治 研究进展 问题与建议

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咖啡叶枯病病原鉴定、生物学特性及化学药剂筛选研究

植物病理学报 2025 北大核心 CSCD

摘要:咖啡叶枯病成为制约咖啡产量的重要病害之一。通过采集咖啡叶枯病典型病叶,病原分离、科赫氏法则验证、形态学观察及ITS、EF1-α、β-tublin多基因序列分析明确其病原菌为塔利间座壳菌(Diaporthe tulliensis)。生物学特性表明菌株生长最适温度范围为25~30℃,致死温度为55℃,最适pH值为6,黑暗条件对菌丝生长更为有利,最佳碳源为麦芽糖,最佳氮源为硝酸钾。室内毒力测定结果表明97.2%咪鲜胺和50%咪鲜胺锰盐的抑菌作用最强,EC50值分别为0.068 0和0.069 6 mg·L-1;95%苯醚甲环唑、80%多菌灵、97.3%戊唑醇和50%嘧菌酯抑菌作用次之,EC50值分别为0.192 3、0.236 0、0.763 0和0.873 1 mg·L-1。后续田间防治试验可优先考虑咪鲜胺及咪鲜胺锰盐作为主要防治药剂。本试验结果可为咖啡叶枯病防治提供参考依据。

关键词: 咖啡叶枯病 塔利间座壳菌 多基因序列分析 生物学特性 室内毒力测定

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木薯碳酸酐酶CA基因的克隆和功能研究

热带作物学报 2025 北大核心 CSCD

摘要:碳酸酐酶(carbonic anhydrase,CA)在植物的光合作用和逆境应答中起着重要作用.本研究以木薯品种华南124的cDNA为模板,克隆到1个MeCA基因,其CDS全长为1008 nt,编码336个氨基酸,克隆序列与数据库中Manes.15G167500.1的同源性达到99.70%.系统发育进化树显示,MeCA与拟南芥的AtβCA亚家族属于同一个分支,与AtβCA 1蛋白的序列相似性达到73.13%,并含有完全相同的motif.MeCA基因的表达量在功能叶中最高,其次为幼嫩叶,均显著高于须根和茎,并在遮光胁迫的木薯叶片中显著下调表达.此外,木薯叶片经低温处理后,MeCA基因在初期表现出显著上调表达,而后下降到对照水平.本研究创制了过量表达MeCA基因的转基因木薯,并观察到MeCA蛋白定位于叶绿体,转基因株系叶片中的各种叶绿素含量显著高于对照.同时,酵母双杂交点对点试验结果显示MeCA与MeH1.2蛋白互作.本研究结果表明,MeCA基因可以响应光和低温胁迫,并可能通过影响植物生长或与MeH1.2蛋白互作,参与植物对胁迫的响应过程.此研究为木薯抗逆遗传改良提供新基因资源和材料.

关键词: CA基因 木薯 抗逆 叶绿素含量

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不同绿肥覆盖对幼龄橡胶园土壤团聚体及其有机碳分布的影响

环境科学 2025 EI 北大核心 CSCD

摘要:豆科绿肥覆盖是改善土壤质量、增加农业生态系统碳固存的关键管理措施.以海南幼龄橡胶园为研究对象,设置爪哇葛藤(GT)、山毛豆(SMD)、柱花草(ZHC)、猪屎豆(ZSD)覆盖及自然生草(CK)这5个处理.采用湿筛法和重铬酸钾外加热法分别测定0~20 cm和20~40 cm土层水稳性团聚体和土壤有机碳(SOC)含量,并分析了团聚体稳定性与SOC间的关系.结果表明,与CK处理相比,SMD处理0~20 cm和20~40 cm土层SOC分别显著增加19.8%和25.3%,GT处理20~40 cm土层SOC含量显著增加26.7%,ZHC和ZSD处理对各土层SOC含量无显著影响.与CK处理相比,GT和SMD处理显著增加团聚体稳定性[平均质量直径(MWD)和几何平均直径(GMD)]、>2 mm团聚体占比及其SOC含量,而ZHC和ZSD显著降低了20~40 cm土层MWD和GMD以及>2 mm团聚体占比;GT处理显著增加0~20 cm土层中0.25~2 mm各粒级以及20~40 cm土层中1~2 mm粒级SOC富集系数,SMD处理显著增加 20~40 cm土层 1~2 mm粒级SOC富集系数;GT和SMD处理显著增加>2 mm粒级SOC贡献率,0~20 cm增幅分别为 65.7%和105.5%,20~40 cm增幅分别为58.6%和79.1%,而显著降低<0.25 mm粒级SOC贡献率.Spearman相关性分析表明,土壤SOC含量与团聚体MWD及GMD均呈极显著正相关关系.综上所述,幼龄胶园间作爪哇葛藤和山毛豆多年生豆科绿肥可显著提高土壤SOC含量以及大团聚体的比例,改善土壤团聚体稳定性.研究结果为我国热带植胶区推行多年生绿肥覆盖模式、土壤肥力提升及抗侵蚀的防治提供理论依据.

关键词: 间作绿肥 灌木 藤本 团聚体分布 土壤有机碳(SOC)

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基于四极杆-飞行时间质谱法测定荔枝中9种杀菌剂残留量

中国农学通报 2025 CSCD

摘要:为科学评价9种杀菌剂在荔枝上应用的安全性,利用高效液相色谱-四极杆飞行时间质谱技术(HPLC-Q-TOF/MS),建立9种杀菌剂在荔枝全果的多残留分析方法,并采用所建立的分析方法对田间荔枝样品杀菌剂残留量进行分析。匀浆后的样品先加入Qu ECh ERS前处理盐包,再经乙腈提取后,将样品置于全自动Qu ECh ERS样品处理平台振荡10 min进行净化,采用HPLC-Q-TOF/MS对9种杀菌剂进行检测。结果表明,9种杀菌剂在质量浓度0.001~0.1 mg/L内具有较好线性相关性(相关系数R2均大于0.99),在3个添加水平下(0.005、0.05、0.1 mg/kg)的平均回收率为76.6%~114.8%,相对标准偏差为1.4%~16.4%,方法检出限为1μg/kg,定量限为3μg/kg。吡唑醚菌酯、嘧菌酯、苯醚甲环唑和甲霜灵在荔枝全果中的残留量均低于国家规定的最大残留限制值。研究建立的分析方法可靠简便快速,适于批量样品检测需求。

关键词: 荔枝 杀菌剂 高效液相色谱四极杆飞行时间质谱 农药残留 安全应用 检测分析

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壳聚糖接枝ε-聚赖氨酸涂膜对香蕉保鲜效果的影响

包装工程 2025 北大核心 CSCD

摘要:目的 通过对壳聚糖进行接枝改性,利用席夫碱反应制备壳聚糖接枝ε-聚赖氨酸(CSPL)共聚物,探究其在香蕉保鲜中的应用效果.方法 利用紫外可见光谱、傅里叶变换红外光谱、核磁氢谱和抗菌性分析等技术对CSPL的结构进行表征,并通过涂膜处理香蕉,分析其在贮藏期间的色度、硬度、腐烂率、质量损失率、可溶性固形物含量和维生素C含量等指标的变化,同时与去离子水(CK)、咪鲜胺和壳聚糖等组进行比较.结果 CSPL涂膜处理能有效延缓香蕉表皮颜色变暗,降低果肉硬度下降速度,减少腐烂率,减缓质量损失率上升,保持可溶性固形物维生素C含量.其中,质量分数为 0.25%的CSPL涂膜液处理效果显著优于其他组,在 22 d时腐烂率比CK组降低了16.67%,Vc保持在(33.88±0.44)mg/100 g,转黄后能将色度保持在 90°左右,外观品质更好.结论 壳聚糖接枝ε-聚赖氨酸涂膜能够有效提升香蕉的保鲜品质,延长其货架期,具有广阔的应用发展前景.

关键词: 香蕉 壳聚糖 ε-聚赖氨酸 涂膜 保鲜

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基于固相萃取–高效液相色谱串联质谱的土壤中多种抗生素残留检测方法研究

热带作物学报 2025 北大核心 CSCD

摘要:由于抗生素残留种类多、浓度低,需要建立一种灵敏度高、选择性强、高效准确的同时检测土壤中多种抗生素残留的方法。本研究拟通过优化提取条件(浸提剂类型、提取方式、避光、隔夜处理)及净化条件(固相萃取小柱类型)建立一种固相萃取-高效液相色谱-串联质谱法(LC-MS/MS),同时测定土壤中20种抗生素。在优化后的条件下,目标抗生素在线性范围0.10~100.00μg/kg内线性良好,R2在0.9951~0.9999之间;回收率范围在62%~116%之间,相对标准偏差为0.9%~16.8%;检出限范围为0.01~0.50μg/kg,定量限为0.04~2.00μg/kg。该方法已应用于天津市武清区设施菜地土壤中抗生素残留的检测,结果表明:4类抗生素在土壤中均有不同程度检出,最多可同时检出16种目标物,土壤中抗生素的总残留浓度为2.52~142.00μg/kg,最高浓度为105.00μg/kg(土霉素)。本研究建立的方法旨在为土壤中抗生素检测方法标准的制订提供参考,并为新污染物防控提供方法学基础。

关键词: 抗生素 固相萃取 土壤 液相色谱-串联质谱 回收率

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无柄紫灵芝的生物学特性及其驯化栽培

菌物学报 2025 北大核心 CSCD

摘要:灵芝的民间药用历史悠久,具有重要的药用价值和经济价值。为充分保护和开发海南热带雨林野生灵芝资源,对采自海南热带雨林国家公园五指山片区的1株野生灵芝菌株X2287进行分离鉴定。利用形态学和TEF1-α-RPB2序列相结合的方法鉴定该菌株为无柄紫灵芝Ganoderma orbiforme。本文对其菌丝的生物学特性及驯化栽培条件进行初步研究。结果表明,菌丝生长最适碳源为蔗糖、最适氮源为氯化铵、最适pH为5.0、最适温度为30℃。在驯化栽培过程中,发菌温度25℃、黑暗条件下菌丝约30 d满袋;原基形成约7–10 d,出原基后约25 d子实体成熟。研究结果可为海南热带雨林特色灵芝资源发掘、新品种选育提供基础数据参考。

关键词: 无柄紫灵芝 分离 鉴定 生物学特性 驯化与栽培

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西瓜成熟过程中果肉水渍化损伤生理响应机制研究

种子 2025 北大核心 CSCD

摘要:为探讨西瓜成熟过程中果肉水渍化损伤发生的生理响应机制,以果肉水渍化差异显著的西瓜种质07058(耐水渍化)和伊选(易水渍化)为材料,对西瓜成熟过程中5个时期的果肉进行果肉损伤比例、糖酸含量、丙酮酸(PA)、MDA含量、SOD、CAT、POD等抗氧化酶活性,果胶、纤维素等细胞壁结构物质含量及细胞壁降解酶活性的测定.结果表明,在授粉后20 d,果肉易水渍化材料伊选水渍化比例快速上升,授粉后35 d,损伤比例达45%左右,而耐水渍化材料07058无明显水渍化现象.与同时期耐水渍化材料07058相比,伊选在授粉后20 d,蔗糖、葡萄糖及果肉酸含量均高于07058,果糖含量先升高后下降,授粉后25 d含量低于07058;PA、MDA含量快速上升,且显著高于07058.在伊选发生水渍化初期(授粉后20 d),SOD、CAT活性快速升高,活性高于07058,随后又迅速下降,活性低于07058;POD活性先下降后回升,但各时期活性均低于07058.伊选的纤维素含量、总果胶含量整体低于07058,可溶性果胶含量高于07058.在果肉水渍化快速发生阶段(授粉后20~25 d),伊选的纤维素酶(CL)及果胶裂解酶(PL)活性快速上升,并高于07058;在授粉后25 d时,伊选PL活性是07058的1.9倍.相关性分析结果显示,西瓜水渍化损伤与蔗糖含量、MDA含量、CL活性等多个生理指标显著正相关;与果糖含量、SOD活性和纤维素含量等显著负相关.研究表明,西瓜果肉水渍化与糖代谢、膜损伤、氧化应激响应、细胞壁降解等多个生理活动密切相关,是多个生理过程发生变化协同作用的结果.

关键词: 西瓜 水渍化 抗氧化酶 细胞壁结构物质 相关性分析

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