科研产出
结核分枝杆菌wbbL蛋白质可溶性表达及鉴定
《中国公共卫生 》 2009 北大核心 CSCD
摘要：目的优化结核分枝杆菌wbbL基因在大肠埃希菌中的表达,获得大量可溶性产物并加以鉴定。方法不同条件下诱导pET16b-wbbL质粒在大肠埃希菌BL21(DE3)中的表达;建立外源重组蛋白质与分子伴侣在大肠埃希菌中的共表达体系,优化其表达条件;超声破碎诱导表达的大肠埃希菌,十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分析表达产物;免疫蛋白印迹(Western blotting)法对重组蛋白质进行鉴定。结果共表达体系优化表达的蛋白质主要以可溶性形式存在,经0.5 g/L L-阿拉伯糖30℃诱导5 h、0.5 mmol/L异丙酸-D-硫代半乳糖苷30℃诱导2 h时,可溶性目的蛋白的产量最多,占细胞蛋白总量的55.6%,且所表达的蛋白质为wbbL基因产物。结论在大肠埃希菌中成功表达出大量可溶性结核分枝杆菌wbbL蛋白质,为研究其酶促反应动力学特征以及建立完善的筛选抗结核药物的酶反应体系提供了基础。
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不同树龄橡胶树林地土壤有机碳含量与储量特征
《热带作物学报 》 2009 CSCD
摘要：研究幼林早期(2龄)、幼林晚期(7龄)、开割树(16龄)和老龄即将更新树(30龄)4种不同树龄橡胶树林地的土壤有机碳含量与储量特征。结果表明:(1)不同树龄橡胶树林地各土壤层次土壤有机碳含量变化不大,但普遍表现为表层土壤(0～15cm土层)有机碳含量高于平均值,下层土壤(45～60cm土层)有机碳含量低于平均值,中间两层的(15～30cm土层、30～45cm土层)变化不大,在平均值的上下浮动;(2)不同树龄橡胶树林地土壤有机碳含量介于6.03～7.78g/kg之间,相互间存在显著差异,高低排序为幼林晚期(7龄)>老龄即将更新树(30龄)>幼林早期(2龄)>开割树(16龄);(3)胶林有机碳储量主要决定于其土壤有机碳含量和土壤容重,不同树龄橡胶树林地土壤有机碳储量介于61.33～74.29t/hm2之间,相互间存在差异,高低排序为老龄即将更新树(30龄)>幼林晚期(7龄)>幼林早期(2龄)>开割树(16龄)。
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不同光照率对飞机草生长的影响
《安徽农业科学 》 2009 北大核心
摘要：[目的]研究不同光照率对飞机草生长的影响。[方法]以飞机草为研究对象,在田间测定了不同光照率对其主茎生长高度、主茎叶片数和鲜干重的影响。[结果]适宜的遮阴处理在一定的时间内有助于飞机草株高的增长,但不利于其生物量的积累。光照率越高越有利于飞机草茎叶和根干重的增加。不同光照率处理飞机草的最终高度、叶片数和干重的大小顺序依次是:光照率100%>光照率38%>光照率16%>光照率3%。飞机草在光照率38%以下不能正常开花结果。[结论]对飞机草的防治与利用有重要的意义。
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果树花发育调控基因的研究进展
《热带农业科学 》 2009
摘要：花发育过程是果树生长发育过程中的重要转折时期,受众多基因的调控。控制果树花发育过程的基因有花序分生组织特异基因、花分生组织特异基因、调控花器官形态特征基因等。本文综述这些基因在果树中的作用、表达部位和相互联系。
关键词： 果树 花发育调控基因 花序分生组织特异基因 花分生组织特异基因 调控花器官形态特征基因
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TiO_2/天然橡胶复合材料的制备及热效应动力学研究
《安徽农业科学 》 2009 北大核心
摘要：采用胶乳共混法制备了TiO2/天然橡胶纳米复合材料。DMA分析结果表明,TiO2/天然橡胶复合材料的玻璃化转变温度和活化能高于纯天然橡胶。根据热分解动力学模型,求得硫化橡胶空白样,掺入TiO20.1%、0.5%、1.0%、2.0%的样品的分解活化能分别为229.699、231.085、201.727、219.107、208.249kJ/mol,动力学模型指前因子分别为5.07×1017、8.46×1017、2.94×1015、8.03×1016、1.04×1016/s。
关键词： 天然橡胶 纳米TiO2/复合材料 玻璃化转变 热分解
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根结线虫拮抗放线菌菌株DA07118的筛选与鉴定及其发酵条件的优化
《中国生物防治 》 2009 北大核心 CSCD
摘要：从海南东寨港红树林、尖峰岭等原始森林及黄流地区发病蕉园采集土壤样品,分离得到215株放线菌菌株。以根结线虫为靶标线虫对215株放线菌进行筛选,获得18株对根结线虫校正死亡率在80%以上的菌株。菌株DA07118抗线虫活性最强,校正死亡率达100%;经5次继代培养,仍具有稳定产生杀线虫活性物质的能力。通过形态学、生理生化反应和16S rDAN分类鉴定,将该菌株归类为链霉菌属Streptomyces。进一步的发酵条件优化试验,确定该菌株产活性物质的最佳培养基配方为(g/L):麦芽糖10g、蔗糖25g、酵母膏20g、蛋白胨20g、K_2HPO_4 0.5g,初始pH7.0。发酵优化后,菌株发酵液的10倍稀释液处理后24h对根结线虫的校正击倒率从优化前的75.0%提高到93.7%。
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对制定科研事业单位财务内控管理制度的思考
《中国集体经济 》 2009
摘要：内控管理制度是单位管理工作的重要基础,是预防问题出现的重要环节。文章针对一些科研事业单位财务管理工作中存在的主要问题,分析制定财务内控管理制度的重要意义,提出制定财务内控管理制度的若干原则,旨在通过制定符合国家财经制度和单位实际情况的财务内控管理制度并加以严格实施,以提高科研事业单位财务管理水平,使财务管理工作更加规范化、制度化和科学化。
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hGH-双精氨酸C肽人胰岛素原基因的克隆表达及纯化研究
《生物技术通报 》 2009 北大核心 CSCD
摘要：旨在提高基因重组人胰岛素在大肠杆菌中表达的稳定性及表达包涵体蛋白的复性水平。在人胰岛素原N端前融合人生长素N端的一段序列来充当前导肽,同时将C肽设计为两个精氨酸,分10段合成长链寡核苷酸链,利用重叠延伸PCR技术(SOE PCR)扩增得到该基因片段。与表达载体PET-30a连接,转化E.coliBL21(DE3),IPTG诱导表达。表达的融合蛋白采用Ni-NTA亲和层析纯化,纯化后的蛋白经复性、冻干等步骤后用胰蛋白酶,羧肽酶B双酶切再过DEAE Sepharose FastFlow阴离子交换柱,收集洗脱峰。对制备所得的胰岛素用SDS-PAGE,Western blot进行性质鉴定,及皮下注射小鼠测定生物活性。结果显示,目的蛋白在大肠杆菌BL21(DE3)中得到了表达,表达产物以不溶性包涵体形式纯在,约占大肠杆菌总蛋白的30%。经Ni-NTA亲和层析得到的重组蛋白纯度为85%,DEAE Sepharose Fast Flow阴离子交换纯化得到单组分胰岛素。Western Blot显示制备所得的胰岛素具有胰岛素免疫原性,皮下给药注射小鼠活性测定表明具有明显的降血糖活性。获得了一种高效生产基因重组人胰岛素的方法,为研究胰岛素类似物奠定了前期基础同时也为今后探索胰岛素的非注射给药途径提供了原料。
关键词： hGH-双精氨酸C肽人胰岛素原 重叠延伸PCR 融合蛋白表达 纯化 活性测定
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