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香蕉MaPRMT1基因的分离及表达分析

安徽农业科学 2008 北大核心 CSCD

摘要:[目的]为研究香蕉果实采后成熟机理奠定分子基础。[方法]通过抑制差减杂交和cDNA微阵列相结合的方法分离获得1个香蕉PRMT基因的cDNA片断,并克隆了该基因全长cDNA序列,对其进行生物信息学分析和在香蕉不同器官与果实不同成熟时期的表达模式分析。[结果]MaPRMT1基因cDNA全长1158 bp,具有完整的开放阅读框,编码385个氨基酸,与植物中的PRMT的同源性较高,含有1个Methyltransf-11结构域。在香蕉根、茎、叶和果实中均有表达,且在茎和叶中的表达量较高。随采后天数的增加,表达量逐渐下降,但至香蕉乙烯释放高峰时最大,后又开始下降。[结论]MaPRMT1属于第1类精氨酸甲基转移酶,在香蕉不同器官和果实不同成熟期呈差异表达。

关键词: 香蕉 蛋白质精氨酸甲基转移酶(PRMT) 香蕉蛋白质精氨酸甲基转移酶1(MaPRMT1) 基因差异表达 RT-PCR

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昆虫杆状病毒杀虫剂研究与应用综述

现代农业科技 2008

摘要:综述了对野生型昆虫杆状病毒和重组昆虫杆状病毒杀虫剂的研究进展,以及我国昆虫杆状病毒杀虫剂的应用研究现状。

关键词: 昆虫杆状病毒 重组昆虫杆状病毒 昆虫杆状病毒杀虫剂

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接种PRSV番木瓜种苗胞质酵母双杂交cDNA文库的构建与分析

热带作物学报 2008 CSCD

摘要:利用Trizol法提取接种PRSV 4 d的番木瓜种苗总RNA,分离纯化mRNA,反转录合成双链cDNA,双链cDNA末端经Pfu-DNA聚合酶补平,与EcoR I接头连接,XhoI酶切消化产生粘端。用Sepharose CL-2B柱分离纯化去除小分子cDNA片段,再与pMyr酵母表达载体连接,转化受体菌XL10-Gold,构建了接种PRSV番木瓜种苗胞质酵母双杂交cDNA文库。所获得的原始文库的克隆总数为1.8×106cfu,重组率为100%,文库滴度为2.6×109cfu/mL。对随机选取的34个克隆进行PCR鉴定,结果表明插入片段长度均大于0.5 kb且集中在1 kb左右。文库质量鉴定结果表明,该文库具有较好的库容量、较高的重组率以及较大的插入片段。

关键词: 番木瓜 PRSV cDNA文库 酵母双杂交系统

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橡胶树HbCBF1蛋白的原核表达及其CRT结合活性分析(简报)

分子细胞生物学报 2008 北大核心 CSCD

摘要:巴西橡胶树 (Hevea brasiliensis), 是大戟科橡胶树属植物, 原产于巴西亚马逊河流域, 是典型的热带高大乔木, 所生产的橡胶是天然橡胶的重要来源。在我国, 橡胶树栽培区主要分布在北纬 18°到24°, 冬季常常遭到寒潮和冷空气的侵袭。 30 多年来的植胶历史证明, 寒害是我国植胶区较为严重的自然灾害, 是影响我国橡胶栽培的主要自然灾害之

关键词: HbCBF1 C-repeat 凝胶迁移率变动分析 原核表达

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海南青胡椒果精油气相色谱-质谱分析

中国食品工业 2008

摘要:采用七、八成熟胡椒鲜果为原料,经过杀青预处理后干燥制成青胡椒,然后按照 GB/T 17527-1998方法提取胡椒精油,测得胡椒精油含量为3.18ml/100g。用气相色谱-质谱法(GC-MS)从青胡椒精油中分离并确定出31种化学成分,占总检出量的99.99%。其中烯类化合物22种,占总检出量的97.95%,含量较多的是3-蒈烯(27.02%)、柠檬烯(19.34%)、反式-石竹烯(22.08%)以及β-蒎烯(9.16%)。

关键词: 精油 青胡椒 气相色谱-质谱

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海南钻喙兰原球茎的形态建成和快速繁殖

安徽农业科学 2008 北大核心 CSCD

摘要:[目的]为海南钻喙兰的组培快繁提供依据。[方法]以钻喙兰种子作外植体,研究了不同诱导培养基、增殖培养基、生根培养基在钻喙兰组培快繁中的效果。[结果]诱导类原球茎体以MS附加6-BA1.0 mg/L+NAA0.1 mg/L的激素配比较好,分化时间短。增殖培养基为MS+6-BA0~3.0 mg/L+NAA0~0.2 mg/L,以MS+6-BA3.0 mg/L+NAA0.1 mg/L效果最好,平均增殖系数为3~8,把生长健壮并具有2~3片真叶的单个小芽,转接到生根培养基1/2 MS+NAA1.0 mg/L上,经60 d培养,即可获得生长健壮的完整植株。钻喙兰试管苗的移栽基质以粗椰糠∶河沙=1∶1的比例混合较好,湿度80%~90%,移栽成活率达90%以上。[结论]海南钻喙兰种子在温度(25±2)℃,光照强度1 500~2 000lx,光照时间12 h/d的条件下,最适诱导培养基为MS+6-BA1.0 mg/L+NAA0.1 mg/L;最适增殖培养基为MS+6-BA3.0 mg/L+NAA0.1 mg/L,生根培养基为1/2 MS+NAA1.0 mg/L。

关键词: 钻喙兰 原球茎 快速繁殖

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甘蔗花叶病和宿根矮化病多重PCR检测方法的建立

中国农业科学 2008 北大核心 CSCD

摘要:【目的】建立能同时检测甘蔗花叶病(sugarcane mosaic virus,SCMV)和宿根矮化病(ratoon stunting disease,RSD)的多重PCR检测方法。【方法】以病株带鞘叶组织总核酸反转录物为模板,根据中国甘蔗花叶病的主要致病病原高梁花叶病毒SrMV和甘蔗花叶病毒中国大陆优势株系SCMV-A,结合B、D、E和SC株系的外壳蛋白核苷酸序列的保守区设计PCR引物对和已有的检测甘蔗宿根矮化病病原木质部赖氏杆菌木质部亚种(Leifsonia xyli subsp.Xyli,Lxx)的PCR引物对,在SCMV RT-PCR和RSD单一PCR体系的基础上,建立并优化可同时检测SCMV和RSD的多重PCR检测方法。【结果】此检测方法可特异地从感染SCMV和RSD的样品中扩增出SCMV(400 bp)和RSD(265 bp)2个条带,扩增产物测序结果表明,SCMV扩增产物与GenBank中其它株系或分离物的核苷酸序列同源性为81%~99%,RSD扩增产物与GenBank中其它株系或分离物的核苷酸序列同源性为91%~99%。【结论】应用此检测方法可稳定、特异地检测出蔗株中是否有导致甘蔗花叶病和宿根矮化病的单一或混合的病原。

关键词: 甘蔗花叶病毒 甘蔗宿根矮化病 RT-PCR 病原检测 多重PCR

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植物14-3-3蛋白的功能及在作物遗传育种中的应用展望

广西农业科学 2008

摘要:植物14-3-3蛋白是具有组织特异性的多基因家族蛋白,几乎存在于所有的真核细胞生物中,不同的生物中则存在不同的异型体。14-3-3蛋白作为一种重要的信号转导调节分子,通过与磷酸化的目标靶蛋白相结合,调节着植物的一系列生命活动过程,包括生长发育、碳水化合物代谢、氮素的吸收和利用等。此外,14-3-3蛋白通过对H+-ATP酶、离子通道蛋白的作用,调控着植物细胞内外的跨膜物质运输,通过信号转导参与植物体对病原菌的防卫反应。因此,14-3-3蛋白作为植物的一种重要的调节分子,今后在农作物的品质改良和抗性育种方面将具有良好的应用前景。

关键词: 植物 14-3-3蛋白 组织特异性 功能 代谢 调控

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黄秋葵基因组DNA提取及鉴定

中国农学通报 2008 北大核心

摘要:黄秋葵细胞内含有丰富的果胶类多糖等次生物质,降低了从中提取总DNA的产量和质量。为了获得高质量的基因组DNA,采用改进的十六烷基三甲基溴化铵(CTAB)法进行提取,并对总DNA进行了纯度和浓度的鉴定。结果表明,改良的CTAB法可有效去除次生物质对DNA的干扰,降低DNA的粘稠度,样品DNA的质量和纯度较高,可用于随机扩增多态性DNA(RAPD)扩增等分子标记分析。

关键词: 黄秋葵 基因组DNA提取 RAPD

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Pichia pastoris表达系统提高表达量的几个关键点

海南大学学报(自然科学版) 2008

摘要:Pichia pastoris是近年来迅速发展的一种真核生物表达宿主,有着广阔的应用前景.本文从提高P.pastoris表达重组蛋白产量的角度,就启动子、高拷贝重组子、密码子偏爱、宿主菌和高密度发酵等方面的优化进行了综述.

关键词: Pichia pastoris 表达系统 产量

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