科研产出
香蕉束顶病毒海南分离物DNA2编码区的克隆及抗血清的制备
《热带作物学报 》 2008 CSCD
摘要:利用PCR方法克隆香蕉束顶病毒海南分离物(Banana bunchy top virus,BBTV-HN)DNA2编码区,将其插入到原核表达载体pGEX-6p-1谷胱苷肽-S-转移酶(GST)基因下游。所得克隆pGEX-HN-B2测序结果表明,插入的DNA2片段为267bp,且表达相位和理论上设计的完全一致。把此重组质粒转化到E.coli Rosetta(DE3)中,经过异丙硫代半乳糖苷(IPTG)诱导后出现约33Ku融合蛋白质表达条带。为获得特异的血清,切下目的表达条带并免疫兔子。经Western-blotting检测,获取的血清可以和表达的33Ku融合蛋白特异结合,表明已成功获得DNA2编码蛋白的血清。
关键词: 香蕉束顶病毒 BBTV DNA2 编码区 融合表达
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巴西橡胶树胶乳黄色体蛋白提取及双向电泳方法初探
《现代生物医学进展 》 2008
摘要:巴西橡胶树(Hevea brasiliensis)的黄色体在胶乳凝固和保护植株过程中有重要作用。本文比较使用三氯醋酸/丙酮(TCA/ ACE)、Tris缓冲液、磷酸缓冲液提取橡胶树胶乳黄色体总蛋白的双向电泳效果。确定一种适合双向电泳的蛋白提取方法。结果表明Tris缓冲液提取法得到的双向电泳图谱可以达到300个,尤其是低丰度蛋白呈现性较好,适合提取黄色体蛋白以进行双向电泳。
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巴西橡胶树遗传转化技术研究进展
《热带作物学报 》 2008 CSCD
摘要:巴西橡胶树早在20世纪70年代就已实现通过体细胞胚状体发生途径再生植株,但到目前为止,植株再生频率仍然较低,且只有少数无性系能够实现体外形态发生。橡胶树的离体培养难度大,是进行基因工程育种的主要障碍,本文对巴西橡胶树遗传转化技术研究进展进行综述,并讨论影响转化成败的关键因素与技术改进方向。
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椰扁甲啮小蜂寄生对椰心叶甲蛹免疫反应的影响
《昆虫学报 》 2008 北大核心 CSCD
摘要:为了测明椰扁甲啮小蜂Tetrastichus brontispae寄生对寄主椰心叶甲Brontispa longissima蛹的血细胞和体液免疫反应的影响,开展了椰扁甲啮小蜂寄生对椰心叶甲蛹血细胞数量和延展性、血淋巴酚氧化酶活性、血淋巴黑化百分率和血细胞凝集素活性等影响的研究。结果表明:与同期未被寄生蛹相比,寄生蛹血细胞总量在寄生后2d显著降低,但寄生后4d显著升高;寄生蛹的浆血细胞延展率在寄生后2d显著降低,寄生后4d显著升高;寄生蛹的血淋巴黑化百分率在寄生后0.5~2d较高,寄生后3~4d降低直至为0;寄生蛹的血淋巴酚氧化酶活性在寄生后0.5d,1d和4d时显著升高;寄生蛹的血凝素活性在寄生后2d较高,寄生后1d和4d较低。结果说明椰扁甲啮小蜂寄生使寄主椰心叶甲蛹血细胞和体液免疫反应呈现不规律的变化。
关键词: 椰扁甲啮小蜂 椰心叶甲 寄生 免疫反应 血细胞 酚氧化酶活性
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罗望子黄酮类化合物提取工艺研究
《广西热带农业 》 2008
摘要:通过单因素及正交实验研究了罗望子果实内黄酮类化合物的最佳提取工艺。结果表明:在乙醇浓度为60%、料液比为1∶3(W/V)、提取时间为4 h、提取温度为70℃的条件下,黄酮类化合物的得率为5.674%。
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剑麻核酸的高效提取及应用(英文)
《热带作物学报 》 2008 CSCD
摘要:针对剑麻组织中多糖、多酚和次生物质含量高的特点,对其总RNA和基因组DNA提取进行研究。比较了改良SDS法、改良CTAB法提取总RNA和SDS法、CTAB法提取基因组DNA的效果,结果表明:改良CTAB法提取总RNA效果较佳,所得RNA OD_(260)/OD_(280)高于1.8,OD_(260)/OD_(23)O大于2.0,而CTAB法提取基因组DNA纯度和完整性较好。基于RNA和DNA水平,分别对剑麻的苯丙氨酸解氨酶基因(PAL)RT-PCR和RAPD反应体系进行优化,均得到理想条带。此方法提取剑麻的核酸可运用于后续分子生物学研究,为其它材料核酸的分离提供参考依据。
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