科研产出
施氏假单胞菌固氮调控蛋白NifA调节电子传递体rnf1基因簇的表达
《中国农业科技导报 》 2018 北大核心 CSCD
摘要：施氏假单胞菌A1501中电子传递体基因簇rnf1位于固氮基因岛上,该基因簇的突变造成固氮酶活显著下降。在rnf1基因簇的启动子区含有固氮调控蛋白Nif A的保守结合序列,实时定量qRT-PCR分析证实了nif A突变株中rnf1基因簇的表达量与野生型相比急剧下调,暗示着Nif A直接参与rnf1基因簇的表达调控。细菌单杂交系统的体内互作实验表明,在大肠杆菌体内Nif A与rnf1基因簇启动子存在直接相互作用;进一步的凝胶阻滞试验证明原核表达纯化的Nif A蛋白与rnf1基因簇启动子序列存在体外直接结合。上述结果从分子水平上给出了两者间相互作用的直接证据,为深入研究联合固氮基因的表达调控网络奠定了基础。
关键词： 生物固氮 电子传递体基因簇 NifA蛋白 凝胶阻滞试验
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五倍子提取液对蓝莓采后病害和品质的影响
《林业科学 》 2018 EI 北大核心 CSCD
摘要：【目的】灰霉病是蓝莓采后最严重的病害之一,影响蓝莓采后贮藏品质及其体内抗氧化防御系统,研究五倍子提取液对灰葡萄孢霉侵染后蓝莓品质及其抗氧化系统的影响,探究五倍子提取液的抑菌机制,为蓝莓采后贮藏和品质提升提供参考。【方法】以‘莱格西’蓝莓为原材料,将75%(V/V)乙醇提取的五倍子醇提物和无菌水按照实验操作分组要求分别均匀地喷洒于蓝莓果实表面(4 m L·g-1),然后将处理后的试验组蓝莓置于25℃的恒温箱中,连续取样7天(每次间隔1天)。以蓝莓的品质指标:腐烂率、失重率、可滴定酸含量(TA)和可溶性固形物(TSS)、电导率、维生素C等以及丙二醛(MDA)、过氧化氢酶(CAT)、多酚氧化酶(PPO)、过氧化物酶(POD)等抗病性酶活指标的变化来反映五倍子提取液对蓝莓灰葡萄孢霉的抑菌效果强弱。【结果】蓝莓果实的营养指标腐烂率、失重率随着贮藏时间上升;TA和TSS都随着贮藏时间的延长明显下降,接菌组蓝莓的营养指标的衰变情况均要比五倍子处理组的要快,但由于灰霉菌的侵染,激活了蓝莓体内的防御系统,致使PPO、POD、CAT等抗性相关酶活性升高,形成消除自由基和病害的防御系统,但是后期由于病害严重,导致机体防御系统紊乱,而出现酶活下降;而经五倍子处理后的蓝莓果实品质要明显优于相应对照组,其酶活始终处于一个动态平衡的关系,后期由于衰老会出现轻微下降。【结论】五倍子提取物能效抑制灰葡萄孢霉对蓝莓的侵染,可作为一种有效控制蓝莓采后病害并保持蓝莓品质的手段。
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农杆菌介导的外源基因在本氏烟中瞬时表达体系优化研究
《西南林业大学学报(自然科学) 》 2018 北大核心
摘要：为提高外源蛋白的表达量及稳定性,期望通过RNA、蛋白水平的研究,制定一套高效的外源蛋白表达体系。通过共表达沉默抑制子、添加定位信号、沉默自噬关键基因atg5,分析各处理对植物外源蛋白表达的影响。结果表明:共表达植物病毒沉默抑制子p25或HC-Pro抑制mRNA降解速率,提高外源蛋白表达水平;外源蛋白增加内质网定位信号,可提高蛋白的持续表达能力;瞬时沉默自噬途径关键基因atg5,有利于外源蛋白的积累。外源蛋白表达过程中对易降解的外源蛋白,通过添加定位信号并结合使用沉默抑制子、自噬途径缺陷植株,可作为提高外源蛋白表达量及稳定性的新策略。
关键词： 外源基因 沉默抑制子 定位信号 自噬途径 Atg5
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不同贮藏条件下大黄鱼生物胺变化
《浙江农业学报 》 2018 北大核心 CSCD
摘要：为研究大黄鱼在不同温度(0、4、25℃)和不同盐分(0、0.5%、2.0%、5.0%Na Cl)贮藏条件下生物胺(BAs)的变化情况,采用离子色谱-抑制电导及紫外串联检测分析了大黄鱼中腐胺(Put)、尸胺(Cad)、组胺(His)、酪胺(Tyr)、苯乙胺(Phe)、亚精胺(Spd)、精胺(Spe)7种生物胺含量和挥发性盐基氮(TVB-N)值的变化。结果显示:在整个贮藏过程中大黄鱼肌肉均未检出组胺和精胺;0、4℃贮藏16 d,大黄鱼中生物胺随贮藏时间的延长缓慢增加,生物胺总量变化范围分别为1.41~17.53、1.53~187.63 mg·kg-1。25℃贮藏6 d,生物胺随着贮藏时间的延长急剧增加,尤其是Cad、Put和Tyr 3种特征生物胺,生物胺总量变化范围为9.44~2 539.22 mg·kg-1。采用不同含量盐分处理,25℃贮藏6 d,大黄鱼中生物胺含量随盐分含量升高明显降低,当Na Cl含量达5%时,生物胺总量变化范围仅为1.32~120.93 mg·kg-1,生物胺生成得到有效抑制。另外,不同贮藏条件下,大黄鱼中TVB-N值变化趋势与生物胺变化趋势相同。实验结果表明,低温及适当添加盐分贮藏是控制大黄鱼产生生物胺的有效措施。
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精胺和亚精胺引发对超甜玉米不同成熟度种子萌发质量的影响
《植物生理学报 》 2018 北大核心 CSCD
摘要：种子质量低下严重影响了甜玉米种子的发芽率和成苗,甚至降低产量。本研究选用0.1 mmol·L~(-1)和0.5mmol·L~(-1)亚精胺(Spd)和精胺(Spm)作为引发剂,研究了其对不同成熟度超甜玉米种子萌发质量和萌发后幼苗质量的影响。结果表明,与2个对照相比, 0.1 mmol·L~(-1)和0.5 mmol·L~(-1) Spm处理显著提高了授粉后18、22、26和30 d种子的发芽率和发芽势,与未引发种子(CK_1)比, 0.5 mmol·L~(-1) Spd处理显著提高了授粉后18、22、26和30 d种子的发芽率。两种浓度的Spd和Spm及清水引发(CK_2)与CK_1比,均显著提高了授粉后18～30 d种子的发芽指数。Spd和Spm引发提高了幼苗质量和幼苗叶片叶绿素a和叶绿素b的含量。Spd和Spm处理提高了种子过氧化氢酶(CAT)、超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)的活性。Spd处理显著降低了不同成熟度甜玉米种子的浸出液核酸含量。Spm处理显著提高4C型与2C型细胞数比率,提高了胚根尖细胞内DNA复制水平,而Spd处理效果不明显。可见, Spd和Spm引发处理能促进不同成熟时期收获的超甜玉米种子的萌发,提高种子抗氧化酶活性和幼苗各项生理指标,但两者对各质量指标的作用效果不同。从对发芽效果看, Spm的效果优于Spd,且以0.5 mmol·L~(-1)浓度较佳。
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基于Illumina高通量测序技术分析草莓表面微生物结构
《江苏农业科学 》 2018 北大核心
摘要：为了解不同基地草莓表面微生物的结构特点,在浙江省8个草莓生产基地采集草莓样本,并提取表面微生物DNA样本,利用特异性的引物分别对细菌16S rRNA基因的V3~V4区进行PCR扩增,然后基于Illumina高通量测序技术分析不同基地草莓微生物的菌群结构。结果表明,不同基地草莓表面微生物在门的水平上主要包括变形菌门、厚壁菌门、蓝藻细菌门、放线菌门、拟杆菌门;在属的水平上,优势菌属主要为布赫纳氏菌属、甲基杆菌属和葡糖杆菌属,其中所检出的寡养单胞菌属、苯基杆菌属、埃希杆菌属和葡萄球菌属均具有一定的致病性。由此说明高通量测序技术应用于草莓表面微生物的分析,可在一定程度上提供草莓污染的病原菌信息。
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景观意象下的诗化符号——基于符号学背景下的地域文化特色探究
《中国园林 》 2018 北大核心
摘要："从观物取象"到"境生于象外"正是景观符号的创造演变过程。一元素,一符号,一场革命,景观有了符号的叠加仿佛有了意境的环绕,就像清代叶燮说的"妙在含蓄无垠,思致微渺,其寄托在可言不可言之间"。通过景观意象下对符号进行诗化的解读,运用"错词造句""倒装造句""复合从句"这3种符号语言模式对景观符号的创作模式进行解读并整理出其表征模式,继而探讨诗化的符号在景观意象的创作中与传统文脉记忆的关系,以及如何用景观符号去传承地域性文化。
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猪传染性胃肠炎病毒N蛋白单克隆抗体的制备及鉴定
《中国兽医科学 》 2018 北大核心 CSCD
摘要：以纯化的猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)重组N蛋白免疫BALB/c小鼠,按照常规方法融合、筛选,最终获得2株抗TGEV N蛋白的杂交瘤细胞系,分别命名为2G7和2C2。2株单抗亚类均为Ig G1,腹水的间接ELISA效价均为1∶108。2株杂交瘤细胞连续培养20代,各代次的上清效价保持不变,均为1∶12 800,说明2株细胞分泌抗体的能力稳定。通过间接免疫荧光发现,制备的2株单克隆抗体能与感染TGEV的细胞发生特异性反应,在胞浆和细胞膜上有亮绿色荧光。结果表明,所制备的2株TGEV N蛋白的特异性单克隆抗体细胞株遗传稳定,分泌的抗体敏感性高,为TGEV病原检测奠定了基础。
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浙江省马铃薯地方品种的鉴定评价与育种利用
《分子植物育种 》 2018 北大核心 CSCD
摘要：本研究对马铃薯小薯型地方品种‘小黄皮’和‘东仓种’进行全面鉴定评价与育种利用。结果表明:从生育期、开花习性、地上部植株和块茎特征特性、田间抗病性、品质性状等农艺性状来看,它们与‘米拉’表型基本一致;并对以它们为母本获得的杂交子代通过实生苗世代筛选评价,选留的229份杂交F1品系较好地遗传了母本薯形椭圆形、单株结薯数多及肉色黄的块茎特性,同时干物质含量≥20%的品系占比平均约为34%,蒸煮食味优的占40%以上。选留品系的蒸煮食味与干物质含量呈极显著正相关、与肉色关系呈微弱的正相关,干物质含量与肉色呈微弱的负相关。筛选出的优异品系‘SM6114’和‘SM6-15’将以鲜食与全粉加工兼用为选育目标进行鉴定。‘SM6100’和‘M6135’等6个小薯型品系将以精品鲜食为选育目标进行鉴定。本研究结果将为地方品种真实性鉴定提供支持,为高效筛选利用现有种质资源提供优异育种材料。
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