科研产出
杭州余杭区农田耕层土壤有机碳空间分布特征及其影响因素
《浙江农业学报 》 2015 北大核心 CSCD
摘要：利用杭州市余杭区耕地地力调查采集的2 814份土壤样品,基于GIS技术研究了余杭区耕层土壤有机碳(topsoil organic carbon,TOC)的空间分布状况,并探讨了影响该地区TOC的因素。结果显示,余杭区TOC密度大致以崇贤镇为中心、以仓前镇为副中心呈辐射状向周围递减,全区TOC密度达46.3 t·hm-2,高于全国平均水平。从立地条件看,TOC密度表现为水网平原>河谷平原>低山丘陵>滨海平原。从耕层理化性状来看,随着耕层黏粒量的增加,TOC密度逐渐增大,表现为砂土<壤土<黏壤土<黏土;近中性和中性的TOC密度较高,酸性和碱性的土壤都不利于土壤固碳;阳离子交换量(cation exchange capacity,CEC)较大的土壤固碳能力较强;在一定范围内TOC随着容重的增加而减少,但过高的容重也会增加TOC密度。从耕层养分看,全氮、速效钾均与TOC密度成正相关。在土地利用方面,耕地的TOC密度略高于园地。从土壤类型看,各类土壤的TOC密度存在差异,表现为水稻土>潮土>粗骨土>石灰(岩)土>红壤>紫色土>黄壤,水稻土TOC密度和有机碳库储量均最大,黄壤最小。
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骏枣多糖提取工艺优化及其抗氧化活性
《食品科学 》 2015 北大核心 CSCD
摘要：研究新疆阿克苏骏枣多糖的提取工艺条件及其抗氧化活性,采用超声波预处理(功率120 W、时间30 min、温度60℃)辅助热水提取法提取骏枣多糖,以Box-Behnken试验设计结合响应面分析法优化了提取工艺条件,确定最佳工艺参数为热水提取温度83℃、液固比17∶1(m L/g)、提取时间4 h。此优化条件下,骏枣粗多糖得率为9.51%。骏枣粗多糖具有清除自由基的作用,当质量浓度为5.0 mg/m L时,对2,2-联氮-二(3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸)二铵盐自由基和1,1-二苯基-2-苦基肼基自由基的清除率分别达到54.29%和51.43%。
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基于mCherry荧光蛋白的植物基因过表达遗传转化系统的初步研究
《浙江农业学报 》 2015 北大核心 CSCD
摘要：过量表达是植物基因功能鉴定和农作物遗传改良的重要途径。为了提高转基因植株的研究效率,以m Cherry红色荧光蛋白为报告基因,构建了由玉米泛素启动子(P-Ubi)和豌豆T3A-poly A序列组成过量表达框的转基因载体。分别将4个水稻类受体激酶的编码序列插入表达框,通过农杆菌介导转化水稻品种泰粳394。转基因植株T1种子的m Cherry荧光检测结果表明,平均62.5%的T1株系呈3∶1分离。根据实时定量RT-PCR分析结果,过表达阳性植株的目的基因相对表达量显著高于阴性植株和未转化的泰粳394。运用该载体系统,能够进行转基因后代大规模筛选,获得目的基因过量表达的转基因株系,从而促进植物基因功能研究和转基因应用研究。
关键词： mCherry红色荧光蛋白 转基因 过量表达 水稻
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椪柑果醋液态发酵工艺及香气成分的GC-MS分析
《中国食品学报 》 2015 北大核心 CSCD
摘要：以椪柑为原料,通过正交试验设计研究酒精发酵和醋酸发酵的最优工艺。采用固相微萃取-气相色谱-质谱联用技术鉴定椪柑果醋中的挥发性风味物质,结果表明:椪柑果醋液态发酵最佳条件是:酿酒酵母添加量0.10%,发酵温度28℃,表观糖度18°Brix,醋酸接种量8%,发酵温度30℃,通气程度1/5。经GC-MS分析鉴定,液态发酵的椪柑果醋共含66种挥发性物质,其中乙酸是椪柑果醋中含量最高的挥发性成分,占风味总量的40.80%;酯类化合物是最主要的风味物质,占25.92%;柠烯是重要的特征香味组分,占2.74%。
关键词： 椪柑果醋 液态发酵 香气成分 固相微萃取 GC-MS
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磁性多壁碳纳米管净化技术快速测定甘蓝中10种农药残留
《分析试验室 》 2015 北大核心 CSCD
摘要：采用磁性多壁碳纳米管-超高效液相色谱-串联质谱技术快速测定甘蓝中的10种农药残留。样品用乙腈提取,稀释后经磁性多壁碳纳米管净化,通过Waters CORTECS C_(18)+色谱柱分离,以甲醇和0.1%的甲酸水溶液为流动相进行梯度洗脱,采用电喷雾-正离子多反应监测模式,基质外标法定量。对磁性多壁碳纳米管的吸附时间和脱附溶剂进行考察。10种农药在相应的浓度范围内线性相关系数均大于0.99,该方法的定量限在0.3~3.0μg/kg之间。在5.0,25.0和50.0μg/kg 3个浓度添加水平下,农药的回收率为80.1%~102.3%,相对标准偏差在1.9%~9.4%之间。磁性多壁碳纳米管具有较好的净化效果,适用于蔬菜中农药多残留的快速检测。
关键词： 磁性多壁碳纳米管 超高效液相色谱-串联质谱 农药 残留
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水稻糖质胚乳突变体Sug-11籽粒灌浆过程的淀粉合成关键酶活性及其与淀粉理化特性关系
《中国水稻科学 》 2015 北大核心 CSCD
摘要：以水稻糖质胚乳突变体Sug-11与其野生型对照中花11为材料,通过对两者籽粒中可溶性总糖、蔗糖含量和淀粉含量以及有关淀粉品质理化指标的比较,结合籽粒灌浆过程中糖类物质含量、淀粉合成代谢关键酶活性和相关同工型基因转录表达水平的动态测定,从籽粒淀粉合成代谢角度,对水稻糖质突变体Sug-11的籽粒糖类含量变化和千粒重下降的生理原因进行了分析。结果表明,Sug-11糖质突变体与其野生型在灌浆初期的可溶性糖和蔗糖含量差异并不明显,随着籽粒灌浆进程,两者间的籽粒糖分含量差异在灌浆中后期逐步趋于明显;与野生型相比,Sug-11糖质胚乳突变体的稻米直链淀粉含量和直链淀粉碘蓝值显著下降,而淀粉溶解度和支链淀粉碘蓝值则显著升高,糖质胚乳突变对稻米淀粉的理化特性也产生了明显的影响;在籽粒淀粉合成代谢的几个关键酶中,Sug-11糖质突变体籽粒中的DBE活性及其在灌浆过程中的动态变化与其野生型存在明显差异,揭示了胚乳糖质突变体Sug-11籽粒中淀粉积累减少、糖分含量增加主要是由籽粒灌浆中后期的PUL转录表达水平和DBE活性的大幅下降所引起的,而Sug-11的籽粒灌浆不良和千粒重下降等现象,则与其ADPGase活性在籽粒灌浆前期的显著下降存在一定的联系。
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牻牛儿基牻牛儿基焦磷酸合酶和紫杉二烯合酶基因在灰盖鬼伞中的组合表达
《生物工程学报 》 2015 北大核心 CSCD
摘要：紫杉二烯是紫杉醇合成途径中的前体物质。紫杉醇是红豆杉的一种重要的次级代谢产物,是一种重要的新型抗癌药物。然而,紫杉醇在植物中含量低且难提取,限制了高效应用。利用基因工程手段,借助担子菌类真菌灰盖鬼伞具有的内源类异戊二烯合成途径,构建含有牻牛儿基牻牛儿基焦磷酸(Geranylgeranyl diphosphate,GGPP)合酶和紫杉二烯合酶的融合基因表达载体p Bg GGTS和独立表达盒表达载体p Bg GGg TS,并分别转入灰盖鬼伞LT2菌株中,经过选择性筛选、PCR鉴定、Southern blotting杂交验证,分别获得了5株融合表达的灰盖鬼伞工程菌和5株独立表达盒的灰盖鬼伞工程菌株。各随机挑选了1株工程菌株,分别提取菌丝体和发酵液分析。GC-MS分析表明,两种工程菌株与原出发菌株的菌丝提取物无明显差异峰,而与出发菌株的发酵液提取物相比,两种转基因灰盖鬼伞的发酵液中均出现了明显的差异峰,采用GC-MS特征质量离子分析方法判定为紫杉二烯,分别为44 ng/L(转化p Bg GGg TS)和30 ng/L(转化p Bg GGTS)。结果表明,通过在灰盖鬼伞融合基因或各自独立表达的形式共表达ggpps和ts基因,可以生物合成紫杉二烯。
关键词： 灰盖鬼伞 牻牛儿基牻牛儿基焦磷酸合酶 紫杉二烯合酶 紫杉二烯 组合生物合成
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转基因植物中CaMV35S和tNOS元件的4种定性PCR检测方法的比较
《农业生物技术学报 》 2015 北大核心 CSCD
摘要：花椰菜花叶病毒35S启动子(promoter of Cauliflower mosaicvirus 35S,CaMV35S)和胭脂碱合成酶基因终止子(terminator of nopaline synthase gene,tNOS)是转基因产品筛选检测中的首选参数,日常检测中发现,个别标准中用于筛选检测这两种元件的引物存在非特异性扩增和灵敏度差的问题。本研究收集了国内外标准中常用的扩增片段分别为195、165、147和123 bp的CaMV35S和扩增片段分别为180、172、165和118 bp的tNOS各4对引物,应用普通PCR和实时荧光(Real-time)PCR方法,对8对引物的特异性、灵敏度及在加工品中的扩增性进行了测试和适用性评价。结果表明,CaMV35S 165和147 bp引物具有很好的特异性,灵敏度高,在不同的加工品中也表现出强的检测能力,筛选检测效果最佳;195bp引物扩增性稍差,且经常出现非特异性扩增;123bp引物较其他引物扩增弱且扩增不稳定。tNOS 172和165bp引物具有很好的特异性,灵敏度高,在不同的加工品中也表现出强的检测能力,筛选检测效果最佳;180bp引物扩增性较差,且易出现非特异扩增;118bp引物较其他引物扩增弱且扩增不稳定。本研究通过普通PCR和实时荧光(Real-time)PCR对不同国标中出现的引物进行适用性评价,为转基因产品的检测监管提供可靠技术依据。
关键词： 转基因 筛选检测 CaMV35S tNOS 灵敏度
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西瓜花叶病毒和小西葫芦黄花叶病毒复合侵染南瓜的透射电镜诊断
《电子显微学报 》 2015 CSCD
摘要：应用透射电镜和RT-PCR技术对浙江龙游的南瓜黄化花叶病株进行病原诊断,电镜负染色观察到病株汁液中存在大量线状病毒粒子,超薄切片观察到病叶细胞质中存在III型、Ⅳ型两种类型的风轮状内含体,细胞质中膜结构增生形成许多小泡结构,叶绿体产生周边空泡。用西瓜花叶病毒(WMV)和小西葫芦黄花叶病毒(ZYMV)特异性引物扩增到622 bp和696 bp目的片段,序列测定发现与WMV和ZYMV同源性分别为88%~95%、93%~99%。根据以上结果诊断南瓜病株为WMV和ZYMV复合侵染。
关键词： 南瓜 西瓜花叶病毒 小西葫芦黄花叶病毒 透射电镜 RT-PCR检测
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