科研产出
高产紫杉醇菌株的诱变选育及其差异表达基因消减cDNA文库的构建
《微生物学报 》 2011 北大核心 CSCD
摘要：【目的】选育高产紫杉醇菌株,并构建选育到的高产紫杉醇菌株与出发菌株HD1-3差异表达的cDNA消减文库。【方法】分别采用硫酸二乙酯和紫外线与硫酸二乙酯复合诱变处理菌株HD1-3孢子;以选育到的高产紫杉醇菌株为tester,菌株HD1-3为driver,应用抑制性消减杂交技术构建选育到的高产紫杉醇菌株与菌株HD1-3差异表达的cDNA消减文库。【结果】试验确定的Nodulisporium sylviforme紫杉醇产生菌HD1-3孢子复合诱变的适宜条件为:将106 cfu/mL孢子悬液经过8%硫酸二乙酯处理15 min后,在电磁搅拌下,用紫外灯(30 w,距离30 cm)照射处理45 s,获得了1株遗传性状稳定、高产紫杉醇的突变株——UD14-11,其紫杉醇产量从出发菌株HD1-3的232.73±4.61μg/L提高至312.81±7.51μg/L;构建的文库滴度为1.2×107 cfu/mL,阳性克隆率75.3%,片段大小主要集中在300 bp-1.0 kb。【结论】选育到了1株遗传性状稳定、高产紫杉醇突变株;成功地构建了高产紫杉醇菌株UD14-11与菌株HD1-3差异表达的cDNA消减文库,为寻找、分离微生物生物合成紫杉醇相关基因和利用基因工程或代谢工程手段定向设计改造菌株奠定基础。
关键词： 紫杉醇 内生真菌 诱变育种 抑制性消减杂交 cDNA文库
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肝片吸虫GST真核表达载体构建及重组蛋白活性分析
《中国人兽共患病学报 》 2011 北大核心 CSCD
摘要：目的构建肝片吸虫谷胱甘肽S-转移酶(GST)的真核表达载体,研究重组蛋白的免疫原性。方法以构建好的重组质粒pET30a-FhGST为模板,利用PCR技术扩增肝片吸虫谷胱甘肽S-转移酶基因(GST),连接真核表达载体pEGFP-N1,构建重组质粒pEGFP-GST,转染Hela细胞,荧光显微镜下观察绿色荧光,Western blotting检测重组蛋白表达情况。结果重组质粒pEGFP-GST在Hela细胞中获得了表达,Western blotting结果表明真核表达质粒表达的重组蛋白能与自然感染肝片吸虫的山羊阳性血清发生特异性反应。结论肝片吸虫GST真核表达载体构建成功,真核表达产物可与自然感染的山羊阳性血清发生特异性反应,具有生物学活性,可做为分子疫苗的候选进行进一步的研究。
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黑土长期定位施肥土壤富里酸的荧光特性研究
《光谱学与光谱分析 》 2011 EI SCI 北大核心 CSCD
摘要：选取哈尔滨长期定位施肥对照处理(CK)、施用氮磷钾化肥(NPK)、有机肥马粪(OM)及有机肥与无机肥混施(MNPK)四个不同处理的土壤样品,利用荧光检测技术对土壤富里酸(Fulvic acid,FA)组分进行分析。荧光发射、激发与同步扫描主要特征峰及三维荧光图谱Peak a,b,c均显示:与CK比较,NPK处理均出现明显蓝移,而OM与MNPK出现不同程度红移,表明NPK可使土壤FA结构趋于简单化,OM与MNPK处理则使FA结构趋于复杂。通过对不同处理土壤FA荧光指数f450/500与A1 370~412 nm/A370~600 nm,A4 538~600 nm/A370~600 nm,A4/A1荧光面积积分比值等参数比较分析,进一步说明NPK处理土壤FA芳构化程度较低,而OM与MNPK长期施肥均使FA缩合度与芳构化程度升高。
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东北地区大豆品种脂肪酸组成与含量分析
《大豆科学 》 2011 北大核心 CSCD
摘要：采用气相色谱法,对东北三省选育的172个大豆品种的脂肪酸组分进行了测定,并进行了组分间的相关性分析。结果表明:其中软脂酸和油酸分布趋势是黑龙江>吉林>辽宁。硬脂酸和亚油酸表现为辽宁>吉林>黑龙江,而亚麻酸的趋势为吉林>辽宁>黑龙江。共筛选出亚油酸含量高于57.62%的大豆品种10个,亚麻酸含量低于6.62%的品种10个,油酸含量高于29.43%的品种20个。
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野猪YFM复方麻醉剂麻醉效果的研究
《中国农学通报 》 2011 北大核心 CSCD
摘要：为了评价YFM复方麻醉剂对野猪的麻醉效果及生理功能的影响,试验将YFM合剂以0.1mL/kg体重对野猪进行颈部肌肉注射实施全身麻醉,通过临床观察和麻醉监护仪监测野猪的麻醉效果和生理功能的变化。结果显示,YFM合剂麻醉野猪的诱导期为3.05±0.22min,麻醉期为60.20±1.72min,苏醒期为30.79±1.53min,并且其对野猪的镇静、镇痛和肌松效果良好;对呼吸和循环系统影响轻微,脉搏血氧饱和度维持在(91.30±0.40)%以上。试验证明,YFM合剂对野猪麻醉效果确实,对机体主要生理功能影响轻微。
关键词： 复方麻醉制剂(YFM合剂) 野猪 麻醉
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猪ATIC基因SNPs位点分析和表达规律的研究
《东北农业大学学报 》 2011 北大核心 CSCD
摘要：为了进一步探索氨基咪唑氨甲酰核苷酸转甲酰基酶/次黄嘌呤核苷酸环水解酶ATIC基因与肉质风味性状的关系,寻找猪肉质风味性状相关分子标记,研究采用PCR-SSCP的方法对ATIC基因进行序列扫描,寻找SNP位点并分析不同等位基因在不同品种猪间的分布规律,同时采用荧光定量PCR的方法对ATIC基因在猪子宫、背肌、肠、肺、脾脏、肝脏、心脏、脂肪、腿肌等共9种组织器官中的表达情况进行研究。结果表明,各等位基因在民猪、北京黑猪、长白猪、大白猪等猪种间的分布存在着极显著差异(P<0.01)。ATIC基因在肝脏、腿肌、肺中高表达,其中在肝脏中的表达量最高。
关键词： 猪 ATIC PCR-SSCP Real-time PCR
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低温贮藏下五种油豆角的生理变化
《作物杂志 》 2011 北大核心 CSCD
摘要：以龙三油豆、龙四油豆、榆树油豆、紫花油豆和将军油豆为材料,分析了在低温条件下贮藏0~15d,不同油豆角品种的纤维素、维生素C、叶绿素、丙二醛(MDA)、蛋白质以及还原糖的变化情况。结果表明,不同品种的油豆角耐贮性和品质变化存在较大差异。紫花油豆和将军油豆的贮藏时间为10d,超过10d以后,纤维素和MDA含量迅速上升;龙三油豆和榆树油豆的贮藏时间为5d,超过5d后,纤维素和MDA含量上升幅度比较大;龙四油豆为不耐贮藏品种,贮藏0~5d其MDA含量迅速上升。
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黑龙江省不同类型土壤养分差异及对水稻养分吸收与分配的影响
《作物杂志 》 2011 北大核心 CSCD
摘要：采用单因素方法研究黑龙江省不同类型土壤在水稻生长发育期间土壤氮、磷、钾养分变化特征及对水稻氮、磷、钾养分吸收与分配的影响。结果表明:不同类型土壤全氮、全磷、全钾、速效钾、碱解氮、速效磷在水稻各生长发育期差异极显著;不同类型土壤全氮、碱解氮含量排序为白浆土>草甸黑土>草甸土>黑土>盐碱土,土壤全磷、速效磷含量排序为黑土>白浆土>草甸土>草甸黑土>盐碱土,土壤全钾、速效钾含量排序为盐碱土>白浆土>黑土>草甸黑土>草甸土;水稻对不同类型土壤氮、磷养分吸收量与土壤中氮、磷养分含量呈正相关,对钾的吸收无规律性变化,水稻植株中氮、磷、钾养分的累积量主要受水稻生物产量和植株中养分含量的影响;成熟期水稻穗部氮、磷含量高于茎部和叶部,茎部钾含量高于穗部和叶部。
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大豆耐旱选择群体QTL定位
《作物学报 》 2011 北大核心 CSCD
摘要：以红丰11为轮回亲本、Clark为供体亲本构建回交群体进行耐旱性鉴定,对获得选择群体进行全基因组SSR标记扫描,计算供体基因型导入频率,利用卡方测验检测偏分离SSR位点,并结合GGT软件对各连锁群分析,对5个耐旱相关性状进行QTL定位。以卡方测验检测到23个SSR偏分离位点(超导入),分布于10条连锁群。方差分析表明,8个叶片持水能力QTL分布于A1、B1、C2、E、L和N连锁群;9个根长QTL分布于C2、F、G和I连锁群;11个根干重QTL分布于A2、B1、B2、E、F、K、L、M和O连锁群;12个产量QTL分布于B1、D1a、E、F、G、I、L、M和O连锁群;7个生物量QTL分布于E、F、G、K、L和N连锁群。在E连锁群的Sat_136位点,对于叶片持水能力、根干重、产量和生物量具有一致性;在F连锁群的GMRUBP位点,对于根干重和生物量具有一致性,Satt586位点,对于根长、根干重和产量具有一致性;在K连锁群的Satt167位点,对于根干重和生物量具有一致性,SOYPRP1位点,对于根长和生物量具有一致性;在L连锁群的Satt398位点,对于根长和产量具有一致性,Satt694位点对于叶片持水能力和生物量具有一致性;在M连锁群的GMSL514位点,对于根干重和产量具有一致性;以上位点均与卡方测验检测到的"超导入"位点具有一致性。经过供体等位基因卡方测验和耐旱QTL定位,共检测到33个QTL,其中有17个同时被检测到。这些位点可能是控制大豆耐旱性的重要位点。
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