科研产出
花生ω-3△~(15)-脂肪酸脱氧酶基因AhFAD3A的克隆及其表达
《中国油料作物学报 》 2015 北大核心 CSCD
摘要：花生油中的α-亚麻酸含量在不同种质资源中存在着差异,与籽仁的不同发育时期也密切相关。本研究通过生物信息学分析并利用RACE的方法,从萌发的花生子叶中克隆了一个参与花生α-亚麻酸合成的ω-3△15-脂肪酸脱氢酶基因,命名为AhFAD3A。利用荧光定量PCR分别比较分析了AhFAD3A和Ah FAD8基因在花生不同组织、籽仁发育不同阶段、萌发过程中的表达特征,结果表明:AhFAD3A基因主要在花期的叶片组织和根部、籽仁形成期表达,在其它发育阶段该基因的表达量比较低,证实该基因的表达与花生籽仁中α-亚麻酸的形成呈正相关;AhFAD8基因在花生的整个生育阶段的绿色组织中表达、非光合组织中几乎不表达。以上研究结果为进一步确定AhFAD3A基因的功能、表达调控及其与花生籽仁中α-亚麻酸形成的关系提供了研究基础。
关键词： 花生 Omega-3 脂肪酸脱氢酶 AhFAD3A 表达特征
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基于质构量化分析的净水菌胶囊制备及其性能研究
《浙江大学学报(农业与生命科学版) 》 2015 北大核心 CSCD
摘要：为提高净水菌剂的应用性能,通过固定化包埋处理,以实心载菌胶囊为研究模型,以质构量化分析数据为主要筛选依据,通过不同辅料配方和制作工艺对胶囊的硬度、黏聚性和弹性恢复进行比较研究,以筛选出较佳的辅料配方和加工工艺,并对较佳配方的载菌胶囊进行断面形貌观察、孔隙率测定、菌剂释放率测定和氨氮模拟污水净化实验。结果表明:较佳成囊壁材配方为V(4%海藻酸钠)∶V(10%聚乙烯醇)=1∶9,固化液配方为4%H3BO4和4%CaCl2混合溶液,辅料硅藻土、沸石粉和竹炭的适宜添加量分别为20%~30%、20%~80%和20%~60%;胶囊为多孔结构,单独添加硅藻土、沸石粉、竹炭或三者混合添加下,胶囊微观结构存在差异,其中硅藻土、沸石粉和竹炭经包埋后比表面积和孔容均减小,孔径变化不大;24h内胶囊中菌剂的水体释放率较低,为1%~14%;载菌胶囊在模拟污水净化实验中,20h后各实验组氨氮质量浓度从1h时的39.3~44.7mg/L降低到0.1 mg/L以下,其中未经包埋的菌株直接投放组降低最快,其次为混合1组[V(4%海藻酸钠)∶V(10%聚乙烯醇)=1∶9,海藻酸钠和聚乙烯醇总体积10mL+硅藻土1.5g+沸石粉0.5g+竹炭0.5g+菌悬液2mL]和竹炭组,同时,总氮也出现不同程度的降低。总之,该研究采用的质构量化分析方法为净水菌固定化载体研究提供了可靠的数据支撑,研究获得的优化胶囊体系在质构和净水能力方面均表现出良好的性能,在环境污染水体微生物净化治理方面具有较大的应用潜力。
关键词： 载菌胶囊 质构量化分析 内部结构 混合比例 氨氮降解
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内参基因对TYR、MITF和ASIP基因在白绒乌骨鸡各组织表达水平的影响
《浙江大学学报(农业与生命科学版) 》 2015 北大核心 CSCD
摘要：以健康白绒乌骨鸡肌肉、肾、肝、肌胃和皮肤为试验素材,应用实时荧光定量聚合酶链反应技术探讨β-肌动蛋白(beta-actin,ACTB)、3-磷酸甘油醛脱氢酶(glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase,GAPDH)和18S核糖体RNA(18Sribosomal RNA,18SrRNA)3个内参基因的组织表达稳定性及其对酪氨酸酶(tyrosinase,TYR)、小眼畸形相关转录因子(microphthalmia-associated transcription factor,MITF)和刺鼠信号蛋白(agouti signaling protein,ASIP)等目的基因在白绒乌骨鸡各组织表达水平的影响,并采用紫外分光光度法分析各组织黑色素沉积规律,从中筛选出理想的内参基因。geNorm和NormFinder软件分析结果显示,内参基因GAPDH在白绒乌骨鸡各组织表达稳定性最高,ACTB表达稳定性最低。相对定量和黑色素沉积结果表明,GAPDH作为内参基因时,各组织MITF、TYR基因的相对表达量与黑色素沉积规律基本一致,表现为皮肤>肾>肌胃>肝>肌肉;ASIP基因的相对表达量与黑色素沉积规律正好相反,表现为肌肉>肝>肌胃>肾>皮肤,这与各目的基因对黑色素沉积的调控功能相符,即MITF和TYR基因高表达有利于黑色素沉积,ASIP基因高表达则抑制黑色素沉积。而18SrRNA和ACTB作为内参基因时,各目的基因表达量未表现出上述规律,与其各自对黑色素沉积的调控功能不相吻合,没有达到理想的校正效果。表明GAPDH基因稳定性最好,且能真正体现目的基因对黑色素沉积的表达调控,是校正目的基因在白绒乌骨鸡不同组织中mRNA表达量的最优内参基因。
关键词： 白绒乌骨鸡 内参基因 基因表达 实时荧光定量聚合酶链反应 黑色素沉积
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高产高油优质油菜浙油50的选育及特征特性
《浙江农业学报 》 2015 北大核心 CSCD
摘要：为培育稳产、高产、高含油量、低芥酸和低硫甙含量的油菜新品种,缓解人类食品和动物饲料中优质油菜产品供不应求的状况。文章详细阐述了高产、高油、双低油菜品种浙油50的选育过程,并就其产量、品质、抗性等性状表现进行综合分析,还探讨了浙油50的育种策略。以9715为母本,鉴6为父本配制杂交组合,历经8代农艺性状、品质性状和产量的选择,育成了高产、高油的优质油菜新品种浙油50。区试和生产试验结果表明,浙油50最高含油量达50.78%,产量达303.8 kg·667 m-2。该品种现已在长江中下游地区有较大面积的推广应用。
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短日照期间的夜温对一品红开花和相关生理指标的影响
《核农学报 》 2015 北大核心 CSCD
摘要：为明确一品红国庆促成栽培短日照期间的适宜夜温,本试验以一品红中国红为试材,研究短日照期间不同的夜温处理(18、21、24、27℃)对一品红开花和花色素苷、叶绿素、可溶性糖含量及苯丙氨酸解氨酶(PAL)活性的影响。结果表明:短日照期间的夜温对一品红的开花进程、观赏品质以及苞片的花色素苷等生理指标有显著影响;21℃夜温处理转色时间最早,转色最快,成花率高,观赏品质最好,而且苞片花色素苷、可溶性糖含量以及PAL活性明显高于其余夜温处理,其次是18℃与24℃,而27℃夜温处理苞片基本不转色。因此,短日照期间的夜温以21℃左右为宜,这一研究结果对一品红国庆促成栽培生产具有重要的指导意义。
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不同羽色斑嘴野鸭毛囊中Tyr,Tyrp1及C-kit基因的表达及调控分析
《浙江农业学报 》 2015 北大核心 CSCD
摘要：斑嘴野鸭羽毛呈褐色,少数个体会呈现出黄白羽及白羽表型。Tyrosinase(Tyr)、Tyrosinase-related protein-1(Tyrp1)以及C-kit(The tyrosine kinase receptor)基因与黑色素合成密切相关,研究利用Real-time PCR对这3个基因在褐羽、黄白羽以及白羽3种表型斑嘴野鸭毛囊组织中进行表达分析;同时利用在线软件分别预测调控这3个基因的microRNA。结果发现,Tyr,Tyrp1在褐羽斑嘴野鸭中表达量最高,黄白羽中表达量显著下降(P<0.01),而在白羽中则完全不表达。C-kit在褐羽及黄白羽中表达量类似,而在白羽中表达则显著下降(P<0.01)。同时,预测到调控Tyr,Tyrp1和C-kit基因的microRNA数分别为9,25和18个。结果表明,毛囊组织中Tyr,Tyrp1以及C-kit基因的表达下调可能导致了斑嘴野鸭出现了黄白羽及白羽两种表型,这些候选microRNA可能参与了这3个基因的表达调控。
关键词： 斑嘴野鸭 毛囊 Tyr Tyrp1 C-kit microRNA
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气相色谱-串联质谱法测定鱼肉中毒死蜱及其代谢产物3,5,6,-三氯-2-羟基吡啶的残留量
《理化检验(化学分册) 》 2015 北大核心 CSCD
摘要：采用气相色谱-串联质谱法(GC-MS/MS)测定鱼肉中毒死蜱及其代谢产物3,5,6,-三氯-2-羟基吡啶(TCP)残留量。样品经1mol·L-1盐酸-乙腈(1+99)混合液提取,提取液于-20℃冷冻去除脂肪,浓缩近干,残渣用乙酸乙酯溶解后与N-甲基-N-叔丁基二甲基硅基三氟乙酰胺进行衍生反应,产物经净化后采用GC-MS/MS测定。毒死蜱和TCP的线性范围分别为2.0~2 000,1.0~1 000μg·L。鱼肉中毒死蜱和TCP的检出限(3S/N)分别为0.5,0.3μg·kg-1,测定下限(10S/N)分别为1.7,1.0μg·kg-1。加标回收率分别为84.6%~95.6%,73.8%~82.7%,测定值的相对标准偏差(n=6)分别小于10%,13%。
关键词： 气相色谱-串联质谱法 毒死蜱 3,5,6,-三氯-2-羟基吡啶 鱼肉
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LC-MS快速分析紫苏水煎液中的主要化学成分
《药物分析杂志 》 2015 北大核心 CSCD
摘要：目的:采用液相色谱,结合四极杆飞行时间串联质谱(QTOF/MS)和离子阱质谱(IT/MS)2种质谱检测器,分析鉴定中药紫苏水煎液中的主要化学成分。方法:色谱柱为Zorbax SB-C18RRHD柱(4.6 mm×50 mm,1.8μm),以0.05%甲酸水溶液-乙腈为流动相,梯度洗脱,流速为0.5 m L·min-1,柱温30℃,进样体积10μL;采用QTOF获取化合物的分子式,并用数据依赖扫描辨别质核比接近的离子碎片;结合IT/MS的多级质谱分析推断可能的结构并验证鉴定结果。结果:通过联合使用2种不同原理的质谱仪并参照数据库和文献资料从紫苏水煎液中鉴定了27个化合物,包括9个黄酮及其苷类成分,10个有机酸类成分,5个氨基酸、2个缩氨酸和1个核苷,其中4个成分经由对照品比对确证。结论:该方法通过联合使用QTOF/MS和IT/MS,为化合物的快速解析提供了更多数据,提高了分析的速度和准确性,为中药复杂组分的分析提供了一种可行的方法。
关键词： 紫苏 液相色谱 四极杆飞行时间串联质谱 离子阱质谱 中药成分分析 黄酮苷类 有机酸类 芹菜素-二葡萄糖醛酸苷 刺槐黄素-芸香苷 木犀草素-二葡萄糖醛酸苷 野黄芩素-二葡萄糖醛酸苷 迷迭香酸
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猪血小板源生长因子受体α基因(PDGFRα)cDNA克隆与表达分析
《农业生物技术学报 》 2015 北大核心 CSCD
摘要：血小板源生长因子受体α(platelet-derived growth factor receptor,PDGFRα)是酪氨酸蛋白激酶受体家族成员之一,在脂代谢中具有潜在的调控作用。本实验旨在克隆猪(Sus scrofa)PDGFRα基因的c DNA全长并分析其组织表达谱。根据Gen Bank上已登录的人(Homo sapiens)、牛(Bos taurus)和小鼠(Mus musculus)等物种的PDGFRα基因保守序列设计引物,利用反转录PCR和RACE技术,克隆得到猪PDGFRα基因的c DNA序列(Gen Bank登录号:KP329568)。测序结果分析表明,猪PDGFRα基因c DNA长度为6 360 bp,其中开放阅读框(open reading frame,ORF)为3 270 bp,3'非翻译区(untranslated regions,UTR)为2 964 bp,5'UTR为126 bp,共编码1 089个氨基酸。该基因在基因组中大约横跨148 Mb,包含23个外显子和22个内含子。序列同源性分析表明,猪PDGFRα基因的核苷酸和氨基酸序列与人、牛、绵羊(Ovis aries)、小鼠的相似性较高。蛋白质结构预测发现,PDGFRα蛋白具有2个跨膜螺旋,10个N-连接糖基化修饰位点,75个磷酸化修饰位点以及1个信号肽结构,且N端存在较强的疏水区域,C端则表现出较强的亲水性。实时荧光定量PCR(quantitative Real-time,q RT-PCR)分析表明,该基因在杜洛克猪的心、肝、脾、肺、肾、小肠和骨骼肌等脏器均有表达,其中在脾脏中表达量最高,肾脏、肺脏次之。该基因在不同部位骨骼肌(比目鱼肌、冈上肌、股二头肌、腰小肌、腓肠肌和眼肌)中表达分析显示,在以比目鱼肌为代表的慢肌中表达量要极显著高于在以眼肌为代表的快肌中的表达量(P<0.01)。比较不同生长阶段PDGFRα基因的表达发现,初生阶段表达量极显著高于断奶和成年阶段(P<0.01)。本研究获得猪PDGFRα基因c DNA全长、组织表达规律以及在不同肌肉组织中的相对表达量,为进一步研究猪PDGFRα基因的功能提供了基础资料。
关键词： 猪 血小板源生长因子受体α基因(PDGFRα) 基因克隆 组织表达
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