科研产出
班氏跳小蜂对毒死蜱和吡虫啉的敏感性及解毒酶活性的变化
《浙江农业学报 》 2015 北大核心 CSCD
摘要：采用喷雾法和浸叶法测定毒死蜱、吡虫啉对班氏跳小蜂(Aenasius bambawalei Hayat)成蜂的毒力,并用喷雾法测定毒死蜱、吡虫啉对扶桑绵粉蚧体内班氏跳小蜂的发育、寄生率和相关解毒酶的活性。结果表明,毒死蜱喷药和浸叶处理的LC50分别为2.595和0.112μg·L-1,吡虫啉喷药和浸叶处理的LC50分别为0.115和0.234 mg·L-1,毒死蜱对班氏跳小蜂的杀伤力较吡虫啉强;2种药剂处理下,班氏跳小蜂的雄、雌蜂的后足胫节长度与对照组差异不显著,对扶桑绵粉蚧的寄生率与对照组差异显著;毒死蜱对班氏跳小蜂体内乙酰胆碱酯酶的抑制率为76.4%,吡虫啉对班氏跳小蜂体内羧酸酯酶、多功能氧化酶的抑制率分别为85.3%和32.2%。
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生物炭替代泥炭栽培基质对铁皮石斛生长的影响
《中国农学通报 》 2015 CSCD
摘要：为提高农林废弃物的再利用率,缓解泥炭资源消耗问题,以竹条炭化制备的生物炭部分替代泥炭为栽培基质,进行基质泥炭替代试验。采用完全随机区组设计,以松树皮+泥炭基质作为对照组,以分别添加3%、6%和10%的竹炭(即部分替代泥炭)作为试验组,研究不同栽培基质配比对铁皮石斛生长的影响。结果表明:3%与6%的生物炭替代量没有显著影响铁皮石斛产量、株高、茎粗、节间距、叶长、叶宽、根数和根长。然而,10%的生物炭替代量在铁皮石斛株高、节间距、节数、叶数方面显著降低。另外,6%的生物炭替代量在萌芽数较对照组提高24.13%,但其移栽成活率最低。从短期来看,3%的生物炭替代泥炭可作为铁皮石斛的新基质,可为生物炭在作物栽培方面的合理利用提供参考,而长期的效果需要进一步研究。
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利用HPLC法检测活性肽HMG-CoA还原酶抑制剂活性
《浙江农业学报 》 2015 北大核心 CSCD
摘要：通过检测反应体系中NADPH的浓度变化,建立了一套测定HMG-Co A还原酶抑制剂活性的HPLC法。以SymmetryC18色谱柱(5μm,4.6 mm×250 mm)进行分离,流动相为:V(K2HPO4-KH2PO4)∶V(甲醇)=85∶15,p H 7.2,流速1 m L·min-1;检测波长337 nm,进样量20μL,柱温25℃。在此条件下,NADPH的线性范围为0.6~600μmol·L-1,加标回收率为94.48%~101.81%,相对标准偏差(n=5)小于4.49%,最低检出限为0.01μmol·L-1。用此方法对蚕蛹蛋白肽的HMG-Co A还原酶抑制剂活性进行了测定,在酶解肽浓度为0.5mg·m L-1时,其抑制率为28.70%。
关键词： 降血脂肽 HMG-Co A还原酶 NADPH 液相色谱
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酪氨酸酶(TYR)、小眼畸形相关转录因子(MITF)和刺鼠信号蛋白(ASIP)基因对白绒乌骨鸡黑色素沉积的遗传效应
《农业生物技术学报 》 2015 北大核心 CSCD
摘要：为研究白绒乌骨鸡(Gallus gallus domesticus Brisson)黑色素沉积分子机制,本研究采用实时荧光定量PCR(quantitative Real-time PCR,q RT-PCR)的2-ΔΔCt检测酪氨酸酶(tyrosinase,TYR)、刺鼠信号蛋白(agouti signaling protein,ASIP)和小眼畸形相关转录因子(microphthalmia-associated transcription factor,MITF)基因在乌骨鸡皮肤、肌肉、肝脏、肾脏和肌胃的表达情况,采用紫外分光光度法测定不同组织黑色素含量,探索3个基因在不同组织中m RNA表达量与黑色素沉积之间的关系。结果表明,TYR、MITF和ASIP在所有组织中均有表达,且各基因m RNA相对表达量在各组织间差异极显著(P<0.01),其中MITF和TYR m RNA表达量依次为皮肤>肾脏>肌胃>肝脏>肌肉,与乌骨鸡各组织黑色素沉积规律基本一致;ASIP基因表达量则与其相反,表现为肌肉>肝脏>肌胃>肾脏>皮肤。相关性分析表明,TYR和MITF基因在各个组织中的表达量与其黑色素含量呈显著正相关(P<0.05),ASIP基因表达量与其呈显著负相关(P<0.05)。由此提示,TYR、MITF和ASIP与白绒乌骨鸡黑色素沉积均具有一定的相关性,其中TYR和MITF基因的高表达可能促进乌骨鸡黑色素沉积,ASIP则相反。本研究为进一步阐明黑色素沉积的遗传调控机制提供了理论基础。
关键词： 白绒乌骨鸡 黑色素沉积 实时荧光定量PCR(q RT-PCR) 酪氨酸酶(TYR) 刺鼠信号蛋白(ASIP) 小眼畸形相关转录因子(MITF)
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红掌两个bZIPs基因片段的克隆与低温响应特性分析
《分子植物育种 》 2015 北大核心 CSCD
摘要：本研究以红掌‘Alabama’幼苗为材料,克隆了2个b ZIP转录因子基因Aab ZIP1和Aab ZIP2。Aab ZIP1片段长度462 bp,Aab ZIP2片段长度为369 bp,两基因核苷酸序列的相似度为46.97%,推定的氨基酸序列相似性为31.17%。Blastx发现两个基因均具有亮氨酸拉链的保守结构域,具备b ZIP转录因子家族的基本特征。RT-PCR分析检测表明,低温处理后,Aab ZIP1基因为组成型表达,不响应低温胁迫;Aab ZIP2基因表达受低温诱导,其表达强度随着低温处理时间的延长而增强,Aab ZIP2可能在红掌的低温胁迫响应过程中起重要作用。
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基于α值法测算的旱作水稻灌溉管理与生长表现
《核农学报 》 2015 北大核心 CSCD
摘要：为了提高旱作水稻水分管理水平,本研究通过关键期补灌、水分胁迫、常规水作(对照)盆栽和田间试验,观察旱作水稻生长反应。结果表明:关键期补灌旱作水稻生长呈前弱后强、滞后生长、差异性大的特点。与对照相比,盆栽试验关键期补灌早作水稻幼苗成活率低6.1个百分点,苗高、苗重分别低17.1%和44.7%;株高整齐度变幅较大,不如对照平稳;分蘖特性与水分胁迫处理相近,分蘖数比对照少2.74个,分蘖结束时间推迟7d。生长中后期,关键期补灌表现出明显的强性,叶绿素值、光合速率分别提高30.6%和48.4%,根须数少48.3%,单条根须重量提高62.8%;水饱和后测定的伤流量是对照的3.3倍,蒸腾速率提高83.0%;关键期补灌籽粒产量分别是水分胁迫和对照的2.1倍和0.94倍。田间试验干旱年关键期补灌的常规粳稻旱作产量5 924.3 kg·hm-2,是对照的84.1%;平水年补灌产量6 511.8 kg·hm-2,是对照的91.2%,干旱年水分利用效率和灌溉增产效率分别比平水年高9.9%和165.0%。本研究证实"五日测算法"具有快速、误差积累小等优点,为旱作水稻水分的量化管理提供方法。
关键词： 旱作水稻 预测灌溉 α值法 湿润地区 关键期补灌 五日测算法
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褐飞虱类酵母共生菌菌体蛋白质提取方法的比较
《浙江农林大学学报 》 2015 北大核心 CSCD
摘要：为了筛选出适合褐飞虱Nilaparvata lugens类酵母共生菌蛋白质提取的细胞破碎方法,选择超声波破碎法、反复冻融法和液氮研磨法等3种细胞破碎方法提取共生菌吡虫啉敏感菌株和抗性菌株蛋白质。结果表明:菌体显微形态观察发现,使用超声波破碎法和液氮研磨法处理类酵母共生菌的细胞破碎效果均优于反复冻融法,处理后菌体分布均匀,破碎彻底;72 h是提取菌体蛋白质的最佳培养时间。定量分析表明:用超声波破碎法提取蛋白质质量浓度最高,液氮研磨法次之,反复冻融法提取蛋白质质量浓度的效果最差,各方法所提蛋白质质量浓度差异显著(P<0.05)。培养72 h后,超声波破碎法、液氮研磨法和反复冻融法提取的蛋白质质量浓度分别为2.82 g·L-1,2.62g·L-1和2.12 g·L-1(敏感菌株)及2.64 g·L-1,2.53 g·L-1和2.05 g·L-1(抗性菌株)。十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶(SDS-PAGE)电泳分析发现:超声波破碎法获得的蛋白质不仅得率高,且条带清晰,丰度好。液氮研磨法虽得率高,但蛋白质部分降解,条带不清晰;而反复冻融法获得的蛋白质得率最低。超声波破碎法更适合于褐飞虱类酵母共生菌的蛋白质提取,该研究为后续蛋白质的双向电泳实验和分离差异蛋白质提供技术支撑。
关键词： 植物保护学 褐飞虱 类酵母共生菌 菌体蛋白质 提取方法
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双抗体夹心ELISA法测定猪α-干扰素的浓度
《浙江农业学报 》 2015 北大核心 CSCD
摘要：为了能够准确测定猪血清中猪α-干扰素(Po IFN-α)含量及猪α-干扰素制品的浓度,本研究以制备并经过亲和层析提纯的兔抗猪α-干扰素Ig G多克隆抗体为包被抗体,以制备的鼠抗猪α-干扰素单克隆纯化抗体作为二抗,建立了测定猪α-干扰素浓度的双抗体夹心ELISA法(DAS-ELISA)。通过条件优化,最佳兔抗猪α-干扰素Ig G多克隆纯化抗体包被浓度为12.5μg·m L-1,最佳鼠抗猪α-干扰素单克隆纯化抗体作用浓度为6.25μg·m L-1,利用本实验室制备的已知浓度猪α-干扰素标准蛋白建立标准曲线,确定该方法检测猪α-干扰素浓度范围为0.0781~2.50μg·m L-1。与Lowry法、冻干称量法测定猪α-干扰素浓度相比较,3种方法检测结果无显著差异,但所建立的双抗体夹心ELISA法能够检测血清中猪α-干扰素浓度,且方法简便。
关键词： 猪α-干扰素 双抗体夹心ELISA 定量检测
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大麦耐迟播高分蘖资源的鉴定与筛选
《麦类作物学报 》 2015 北大核心 CSCD
摘要：为给耐迟播高产大麦育种提供基础材料,以505份大麦种质资源(农家品种131份,国内育成品种(系)271份,国外引进品种103份)为材料,通过对不同迟播日期下大麦资源分蘖特性的鉴定、迟播资源的亚群体划分及其入选的迟播高分蘖资源有效分蘖的鉴定等工作来筛选耐迟播大麦种质资源。结果表明,随着播期的推迟,大麦资源的分蘖数显著降低,但大麦资源分蘖的基因型差异很大。16个分子标记共检测到78个多态位点,根据分子标记检测结果,505份迟播资源被划分为8个亚群,各亚群中根据分蘖数选取耐迟播高分蘖资源,共选出55份资源,其中农家品种12份,育成品种(系)35份,国外品种8份。入选的55份高分蘖资源的有效分蘖数也有显著差异,有22份资源的有效分蘖数在两个播期下均显著高于对照,这些高分蘖资源的鉴定为改良大麦品种耐迟播特性提供了重要的基因资源。
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鸭坦布苏病毒基因组全长cDNA克隆构建与分析
《浙江农业学报 》 2015 北大核心 CSCD
摘要：根据鸭坦布苏病毒(Duck Tembusu virus,DTMUV)ZJ-407株全基因组序列设计并合成4对特异的Infusion引物,应用RT-PCR技术分4段扩增了DTMUV全基因组c DNA。通过In-fusion技术将扩增的c DNA重叠片段A,B,C和D片段分别克隆到载体p BluescriptⅡKS(+)中,获得了DTMUV全长基因组c DNA克隆p SK-T7-DTMUV。在扩增5'末端时,引入T7启动子序列;在基因组3'末段引入SmaⅠ酶切位点,以供c DNA模板的线性化之用。核酸序列分析表明,DTMUV毒株基因组全长为10 990个核苷酸,与DTMUV ZJ-407 DF-1细胞分离株的同源性为99.9%;全长基因组中有9个核苷酸发生突变,其中7处为沉默突变,2处导致相对应的氨基酸发生改变,且这两处均位于非结构蛋白NS5。结果表明,本研究成功构建了DTMUV ZJ-407株基因组全长c DNA,为其感染性c DNA的拯救奠定基础。
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