科研产出
猪流行性腹泻病毒3C样蛋白酶(3CLpro)的真核表达及生物信息学分析
《畜牧与兽医 》 2020 北大核心
摘要：3C样蛋白酶(3CLpro)是冠状病毒的主蛋白酶,在病毒复制及致病过程中发挥重要作用.本研究旨在对猪流行性腹泻病毒3C样蛋白酶(PEDV 3CLpro)进行真核表达,并对其结构和功能进行生物信息学分析.根据GenBank上PEDV 3CLpro基因的序列设计并合成特异性引物,通过RT-PCR方法进行3CLpro基因的扩增,亚克隆至pEGFP-N1真核表达载体中,并转染至HEK 293T细胞,通过荧光观察和Western blot鉴定该蛋白的表达.并利用生物信息学软件对3CLpro进行序列分析、结构和功能预测.结果显示:PEDV 3CLpro能够在真核细胞中稳定高效表达,大小约为43 kDa,共编码302个氨基酸,分子式为C1446H2250N400O437S15,亲水性平均系数为0.058,不稳定指数为33.19,含有丰富的糖基化位点及磷酸化位点.其二级结构包含20.53%的α螺旋、38.41%的β折叠以及41.06%的无规则卷曲,对应的2个催化位点分别为41位的组氨酸(His)和144位的半胱氨酸(Cys).上述结果为进一步研究PEDV 3CLpro在病毒与宿主互作中的生物学功能提供数据支撑.
关键词： 猪流行性腹泻病毒(PEDV) pro)','','NsIyoWyAoZYts39c mmd2B5eYZ mmd2BpJ13fCzfTgYDIxVTfuvEIL8lqUmtTTPAAoITOYXwLRIbc4qYmWZk58pYMOUOA1MQ==') >3C样蛋白酶(3CLpro) 真核表达 生物信息学
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土壤不同形态碳氮含量和酶活性对培养时间及外源碳投入的响应
《水土保持学报 》 2020 北大核心 CSCD
摘要：在绿色农业科技的推动下,有机物料资源化利用备受青睐,但有机物料种类不同对土壤肥力的提升效果不同,为探究有机物料施用对潮土不同形态碳氮含量及酶活性的动态影响,通过为期1年的培养试验,设置添加10 g/kg的秸秆菌渣(S)、树枝菌渣(B)、小麦秸秆(W)、黑麦草秸秆(R)和蚕豆秸秆(BB),并以空白处理作为对照(CK).结果表明:与CK相比,有机物料施用显著增加土壤不同形态碳氮含量及酶活性,随培养时间的延长,有机碳及全氮含量呈增加的趋势,增幅分别为25.4%~42.9%和35%~60%,易氧化有机碳和碱解氮含量呈先上升后下降的趋势,最大值分别为2.80,43.26 mg/kg,水溶性有机碳、微生物量碳氮和酶活性则呈下降的趋势,最大值分别为346 mg/kg,293μg/g和23.08μg/g.有机物料施用会增加土壤酶活性提高土壤呼吸速率,通过对3个取样期7种水解酶的分析发现,酶活性表现为:LAP>PHOS>NAG>BG>CB>AG>XYL,即参与氮循环酶活性>参与磷循环酶活性>参与碳循环酶活性,绿肥秸秆主要增加氮循环酶活性,且以BB处理酶活性最高,菌菇渣主要增加碳循环酶活性,B处理酶活性高于S处理.有机物料施用会影响土壤酶活性,增加不同形态碳氮含量,但增幅因有机物料种类不同而有所差异,且碳氮组分对培养时间的响应不一.总体而言,小麦秸秆和蚕豆秸秆腐殖化系数最高,对不同组分碳氮含量增加效果最优.
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高温季节蟹塘不同水生植物对水质净化和温室气体排放的影响
《生态与农村环境学报 》 2020 北大核心 CSCD
摘要：蟹塘水生植物不仅是河蟹(Eriocheir sinensis)的天然饵料和栖息蜕壳场所,还可净化蟹塘水体.蟹塘原有植物伊乐藻(Elodea nuttdlii)在炎热的夏季会生长不良甚至死亡,致使河蟹生境恶化.因此,筛选具有耐高温特性的水生植物对生态养蟹有重要意义.分别以蕹菜(Ipomoea aquatica)、水稻(Oryza sativa)和伊乐藻作为蟹塘水生植物,通过比较其对河蟹产量、养殖尾水水质和温室气体排放的影响,筛选出更为适宜蟹塘的水生植物,以期达到河蟹稳产和环境友好的目标.结果表明,3个处理间河蟹产量均无显著差异,3种水生植物的氮磷同化量从大到小依次为蕹菜、伊乐藻和水稻.与伊乐藻相比,7-9月蕹菜和水稻对蟹塘水体总氮有明显的削减作用,且多数时间点差异显著,对总磷的削减作用则无显著差异.同时,不同处理蟹塘均表现为CH4和N2O排放源.蕹菜和水稻处理CH4累积排放量均显著高于伊乐藻处理,而3个处理N2O累积排放量无显著差异.与蕹菜和水稻处理相比,伊乐藻处理全球增温潜能(GWP)增加.考虑到8月中下旬水稻结实死亡,因此在炎热的夏季,蕹菜可以作为伊乐藻和水稻的替代品,以改善河蟹养殖尾水水质.
关键词： 河蟹 高温季节 水质净化 温室气体排放 综合温室效应
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犬细小病毒CPV-SD03/19株的分离鉴定及遗传演化分析
《畜牧与兽医 》 2020 北大核心
摘要：为了解山东地区犬细小病毒(canine parvovirus,CPV)的生物学特性,阐明其基因组与遗传演化等特征,采集疑似感染CPV死亡犬的小肠,经PCR鉴定为CPV阳性,无菌处理病料后接种F81细胞进行病毒分离鉴定,通过电镜形态学观察及理化特性、血清学、分子生物学等试验进行验证.结果:成功鉴定、分离出1株CPV,命名为CPV-SD03/19株;电镜观察病毒粒子形态符合细小病毒形态特征;血凝试验效价为2;对NS基因和VP2基因进行序列比对与遗传进化树分析,结果显示CPV-SD03/19株抗原型为CPV-2a型,与CPV-LZ1株对比,在VP2基因上共有3处氨基酸发生非同义替换,分别为aa267(苯丙氨酸→酪氨酸)、aa426(天冬酰胺→赖氨酸)、aa440(苏氨酸→丙氨酸).本研究对分析山东地区犬细小病毒的进化特征具有一定的参考价值.
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长江流域中稻产量和品质性状差异与其生育期气象因子的相关性
《江苏农业学报 》 2020 北大核心 CSCD
摘要：为了探讨在不同光温条件下水稻品种产量和品质的响应特点,利用长江流域中稻区多样的气候条件,2017年和2018年分别在长江流域中稻区9个省(市)设立10个和11个试验点,选择各地区代表性品种8~9个,共18个品种,进行大田分期播种试验,以当地最适播种期为基准,前后共分3期播种,分析供试水稻产量和品质的变化,并记录同期的气象特征.结果表明:所有试验点2年3期分期播种水稻品种的光温特征可以分为3个区域,即高温高光照区(长江流域中部)、低温低光照区(长江流域西部)以及中温中光照区(长江流域东部);产量高低顺序为低温低光照区(长江流域西部)>中温中光照区(长江流域东部)>高温高光照区(长江流域中部),精米率为中温中光照区(长江流域东部)>低温低光照区(长江流域西部)>高温高光照区(长江流域中部),垩白粒率和蛋白质含量均为高温高光照区(长江流域中部)>中温中光照区(长江流域东部)>低温低光照区(长江流域西部),直链淀粉含量为低温低光照区(长江流域西部)>高温高光照区(长江流域中部)>中温中光照区(长江流域东部),胶稠度为中温中光照区(长江流域东部)>高温高光照区(长江流域中部)>低温低光照区(长江流域西部),糊化温度区域间差别不大.相关分析结果显示,齐穗后光、温分别与产量和品质均显著相关(P<0.05),在长江流域中稻区,选择适宜的品种,参照长江流域中部"双减"(齐穗后20 d内的平均温度不超过31℃,日照时数不超过160 h)、长江流域东部"一减(温)一增(光)"(齐穗后平均温度不超过29℃,日照时数不少于90 h)以及长江流域西部"双增"(平均温度不低于20℃,日照时数不少于110 h)等温光原则,均可以种植出高产与优质协调的稻米.
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炭基辅料对羊粪好氧堆肥中氮素损失的影响
《农业环境科学学报 》 2019 北大核心 CSCD
摘要：养殖废弃物(羊粪)的堆肥化处置是现代"草-羊-田"农牧循环生产的重要环节,为探讨羊粪高温好氧堆肥中氮素损失的有效控制技术,研制了一种炭基辅料,与羊粪和稻草混合后进行了34 d的堆肥试验。试验设置2个处理:羊粪与稻草高温好氧堆肥(CK)、CK基础上添加质量比15%的炭基辅料(CA)。监测了堆肥体的温度、NH_3挥发速率、N_2O排放通量、各形态氮素含量等参数变化情况,分析了炭基辅料对羊粪堆肥过程中氮素转化及损失的影响。结果表明,与CK处理相比,添加炭基辅料促进了堆肥后第1～7 d堆肥温度快速上升,对堆肥后第8～34 d的堆温影响较小;堆肥34 d后,CK、CA处理的NH_3挥发累积量分别为368.38、175.63 mg·kg-1,N_2O排放累积量分别为50.38、88.94 mg·kg-1,CA处理的NH_3挥发累积量显著小于CK处理(P<0.05),而2个处理之间的N_2O排放累积量差异性不显著(P>0.05),羊粪堆肥过程中NH_3挥发是氮素损失的主要途径;CK、CA处理的氮素损失率分别为50.49%、32.63%,添加炭基辅料显著降低了羊粪堆肥体的氮素损失率(P<0.05),炭基辅料应用于羊粪有机肥生产,氮素损失率可减少35.37%。
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洋葱黄色条纹突变体的特征特性
《江苏农业学报 》 2019 北大核心 CSCD
摘要：对母系遗传洋葱叶片黄色条纹突变体材料进行田间表型特征观察,叶绿素含量测定和显微结构观察,并利用jnurf13分子标记鉴定保持株。结果表明,洋葱突变体为亮绿黄色条纹。黄皮、白皮和紫皮洋葱中均发现黄色条纹突变株,黄化程度越高植株长势越弱;整个生育期黄色条纹一直存在于管状叶、花薹、花苞、伞状花序中花梗、花瓣、雌蕊、雄蕊等部位,直至植株枯萎也不返绿。单株自交或开放式自然授粉F1中出现全黄株、黄绿条纹株和绿株3种类型,无固定分离比,全黄株苗期死亡。洋葱黄色条纹突变体黄色组织的总叶绿素、叶绿素a和叶绿素b含量显著低于绿色组织;石蜡切片观察结果显示黄色和绿色组织的形态结构无差异,但绿色组织的叶绿体总数高于黄色组织;通过超显微结构观察发现,黄色条纹突变体绿色组织中叶绿体结构与正常株无差异,而黄色组织中类囊体、基粒等结构降解,嗜饿颗粒数量多且集中,影响光合作用。另外,利用jnurf13分子标记从12株可育突变体中筛选出5株保持株,可作为形态学标记用于洋葱细胞质雄性杂交制种。
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盆栽风信子年宵花花期调控影响因素
《北方园艺 》 2019 北大核心
摘要：以风信子为试材,采用盆栽方法,研究了种球冷藏时间、品种对盆栽风信子年宵花花期调控的影响,以期为风信子年宵花生产提供参考。结果表明:冷处理对5个风信子品种的开花有促成作用,冷藏时间越长,开花时间越早。种球冷藏8～10周风信子能达到目标花期,对开花质量有促进作用,但冷藏11～12周开花质量反而下降。从品种来看,品种影响风信子盆栽年宵花上市时间。可以根据自然花期来调节风信子上市时间,从开花质量考虑,早花的品种适宜选"芬达",中花选"西贡小姐",晚花选"蓝色代夫特"比较适合做盆栽风信子年宵花生产。
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