科研产出
利用电转的方法对T细胞TET2基因敲除并探讨TET2对T细胞增殖的影响
《生物技术通报 》 2020 北大核心 CSCD
摘要：近年来,利用重组病毒对T细胞进行基因编辑用于免疫治疗,受到了广泛重视。然而,重组病毒因存在随机整合,制备耗时长且昂贵的缺点制约了其应用。与此同时,电转染技术的应用能够快速将外源DNA带入细胞内,有助于提高T细胞基因编辑效率。TET(Ten-eleven translocation)家族蛋白可以催化5-甲基胞嘧啶(5mC)转化为5-羟甲基胞嘧啶(5hmC),5hmC作为细胞中的DNA去甲基化酶,在细胞基因组表观遗传学中起着重要调控作用。研究表明TET2基因的缺失能够促进CAR-T细胞的快速繁殖,产生强力的CAR-T细胞。该研究利用CRISPR/Cas9基因编辑技术对TET2基因进行敲除。首先对sgRNA进行体外转录,与大肠杆菌诱导表达的Cas9蛋白孵育形成Cas9:gRNA核糖核蛋白复合物(RNP),并在体外酶切验证sgRNA的活性。接着利用电转染技术将Cas9:gRNA核糖核蛋白复合物(RNP)带入细胞内,并检测T细胞基因编辑效率。最后利用流式细胞分析技术检测T细胞的增殖情况。基因测序与T7EⅠ酶切结果表明,T细胞中的TET2基因被成功敲除,T细胞活力和功能并未受到影响。流式细胞技术,CCK-8以及台盼蓝细胞活率检测结果显示缺失Tet2蛋白后,T细胞的增殖速率明显快于野生型T细胞。该研究为非病毒载体替代传统的慢病毒载体构建携带嵌合抗原T细胞奠定了基础,具有制备周期短,安全性高的特点。同时TET2缺失促进了CAR-T细胞的增殖,使其能够引发有效的抗肿瘤反应,为CAR-T细胞免疫治疗提供了新的思路。
关键词： Cas9核糖核蛋白(Cas9 RNP) TET2 电转染 基因敲除 T细胞增殖
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嘉宝果果皮提取物不同极性部位抗氧化活性研究
《江苏农业科学 》 2020
摘要：采用有机溶剂萃取法将嘉宝果果皮70%乙醇提取物分为乙酸乙酯部位、正丁醇部位和水部位等3个不同极性部位,以清除DPPH·、ABTS~+、·OH、 O~-_2·等4种自由基的能力为评价指标,研究各极性部位体外抗氧化活性,并以福林酚法测定各极性部位总多酚含量,分析总多酚含量与抗氧化活性间的相关性。结果表明,乙酸乙酯部位对DPPH·、ABTS~+、·OH及O~-_2·自由基的清除能力高于正丁醇部位,水部位清除能力最弱,乙酸乙酯部位(EC_(50)=0.944 mg/mL)和正丁醇部位(EC_(50)=1.121 mg/mL)对·OH的清除能力高于维生素C(EC_(50)=2.559 mg/mL)。乙酸乙酯部位的总多酚含量最高,为(41.287±0.421) mg/g,其次为正丁醇部位,为(36.211±0.240) mg/g,水部位最低,为(5.895±0.092) mg/g。总多酚含量与DPPH·、ABTS~+和·OH自由基的清除能力呈显著正相关(P<0.05),与O~-_2·的清除能力呈极显著正相关(P<0.01);4种抗氧化检测方法的试验结果呈极显著正相关(P<0.01)。说明嘉宝果果皮提取物乙酸乙酯部位与正丁醇部位总多酚含量较高,抗氧化活性较强,是抗氧化活性物质的主要极性部位;4种抗氧化检测方法均可用于嘉宝果果皮抗氧化活性评价。
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紫云英干粉与等量全价配合饲料喂猪效果比较
《中国饲料 》 2020 北大核心
摘要：为明确紫云英干粉喂猪效果,本试验用紫云英干粉替代1/3全价配合饲料喂猪.结果表明:与全价配合饲料组相比,紫云英干粉组猪毛重下降6.38%,消化道相对重量增加17.71%;胴体重降低10.34%,屠宰率下降6.61%;猪肉蛋白质含量提高2.99%,灰分含量提高11.11%,游离氨基酸总量下降3.60%;猪肉重金属(Pb、Cd、Cr、As等)含量均小于0.1 mg/kg,Cu含量降低33.33%,乐果等3种农药均未检出.综上,紫云英干粉替代1/3全价配合饲料喂猪,猪生产性能、胴体重、屠宰率下降,消化道发育增强,猪肉营养和卫生安全指标中的灰分、铜含量指标均有明显改善.
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高产抗瘟杂交晚稻新组合宜优2013
《杂交水稻 》 2020 北大核心 CSCD
摘要：宜优2013是福建省农业科学院水稻研究所利用四川省宜宾市农业科学院育成的宜香1A作母本,以自育的优质恢复系东南恢2013为父本,配组育成的三系杂交晚稻新组合。2016年通过福建省农作物品种审定委员会审定。
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半番鸭谷胱甘肽过氧化物酶的组织表达与酶活力研究
《江西农业学报 》 2020
摘要：采用实时荧光定量法和化学比色法分别测定了半番鸭不同组织谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px) mRNA的相对表达水平和酶活力。结果显示:半番鸭的GSH-Px mRNA表达水平表现为肾脏>胸肌>肺脏>脾脏>肝脏>心脏>肌胃;胸肌和肝脏的GSH-Px酶活力较高,肾脏次之,肌胃的最低;除胸肌的GSH-Px基因表达水平与酶活力间的相关性达到显著水平外,在其余组织中两者之间的相关性均不显著,但代谢较为活跃的胸肌、肝脏和肾脏的两个指标均较高,而肌胃均为最低。由此提示,半番鸭GSH-Px基因表达和酶活力存在物种和组织特异性,胸肌具有较高的抗氧化能力。
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草地贪夜蛾两种重要卵寄生蜂的鉴别及寄生行为
《植物保护 》 2020 北大核心 CSCD
摘要：草地贪夜蛾Spodoptera frugiperda(J.E.Smith)是世界重要农业害虫,具有很强的迁飞性,对玉米等禾本科植物造成危害。调查草地贪夜蛾卵寄生性天敌资源,明确其种类和鉴别特征,对筛选优势天敌种类和开展生物防治具有重要意义。对福建省寄生性天敌资源调查结果表明,福建省有两种草地贪夜蛾卵寄生蜂,分别为夜蛾黑卵蜂Telenomus remus Nixon和螟黄赤眼蜂Trichogramma chilonis Ishii,本文记述了这两种卵寄生蜂的主要形态特征,并观察了其寄生行为。
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福建姜黄挥发油化学成分的HS-SPME-GC-MS分析
《中国食品添加剂 》 2020
摘要：采用水蒸气蒸馏法提取福建姜黄挥发油,应用顶空固相微萃取进样结合气相色谱-串联质谱联用技术(HS-SPME-GC-MS)分析姜黄挥发油的化学成分。结果表明:姜黄挥发油含有量为7.2%(mL/g),从姜黄挥发油中共分出62个色谱峰,初步鉴定出了其中的51种化学成分,占总挥发油总量的98.41%。在鉴定的化合物中,主要为单萜类化合物和倍半萜类化合物,其中新发现一种主要成分为β-柏木烯,相对含量占比高达26.58%,这可作为福建姜黄挥发油的特征成分和主要品质指标。本研究结果将为福建姜黄植物药材的品质评价提供科学依据。
关键词： 姜黄挥发油 顶空固相微萃取技术(Head space solid phase micro-extraction, HS-SPME) 气相色谱-质谱联用技术(Gas chromatography-mass spectrometry, GC-MS) 化学成分
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不同免疫程序下鸽新城疫抗体水平测定与分析
《福建畜牧兽医 》 2020
摘要：为探索肉鸽场良好的新城疫免疫程序,对免疫二次新城疫活疫苗(试验Ⅰ组)和免疫一次新城疫活疫苗、一次新城疫灭活疫苗(试验Ⅱ组)的各10羽肉鸽进行新城疫抗体跟踪监测.结果试验Ⅰ组在二免后10 d、40 d、70 d、100 d和130 d的新城疫抗体HI滴度分别为4.8log2、5.1log2、4.2log2、3.5log2和2.7log2,相应的免疫合格率为60%、70%、30%、10%和0%;试验Ⅱ组在二免后相应时间点的新城疫抗体HI滴度分别为4.9log2、6.7log2、6.2log2、5.6log2和4.8log2,相应的免疫合格率为70%、100%、100%、100%和90%.结果表明,试验Ⅱ组的免疫效果要好于试验Ⅰ组,保护期可维持4个月.试验结果可为肉鸽场制定科学的免疫程序提供依据.
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花生种子萌发吸胀阶段冷害抗性的鉴定及耐冷种质的筛选
《植物遗传资源学报 》 2020 北大核心 CSCD
摘要：为更好地评价花生吸胀冷害抗性,本研究首先分析了常温条件下(25℃)和冷胁迫条件下(2℃)花生种子萌发过程中的吸水状况,结果表明不同基因型的花生吸胀阶段的持续时间基本一致,维持在浸种后0～12 h;冷胁迫能够使吸胀阶段初期的吸水速度显著下降,但对吸胀阶段的持续时间没有显著影响。对种子萌发3个生理阶段(吸胀、萌动、萌发阶段)分别进行冷害胁迫处理,结果表明吸胀阶段遭受的冷害胁迫对花生种子萌发影响较其他阶段严重。进一步的试验表明,吸胀阶段种子2℃冷胁迫12 h,能够更好地区分不同花生种质之间吸胀冷害抗性的差异,从而建立了花生种子吸胀冷害抗性的鉴定体系。利用该鉴定体系对64份花生种质的吸胀冷害抗性进行鉴定,以相对发芽率85%为阈值,筛选出了7份耐冷种质。本研究为花生耐冷育种及吸胀冷害抗性机制解析提供了技术鉴定体系和材料基础。
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