科研产出
朗德鹅3-羟基-3-甲基戊二酰辅酶A合酶基因(HMGCS1)cDNA克隆及其mRNA在填饲鹅肝组织中表达的研究
《农业生物技术学报 》 2014 北大核心 CSCD
摘要：本实验旨在获得鹅(Anser anser)3-羟基-3-甲基戊二酰辅酶A合酶基因(HMGCS1)的cDNA序列,观察该基因的表达与填饲鹅肝脏生成胆固醇的相关性。选用填饲28 d朗德鹅作为实验材料,运用RACE方法扩增目的基因的cDNA序列,利用荧光定量PCR技术检测并分析HMGCS1基因在各组织中mRNA的表达,比较填饲28 d后各组织HMGCS1基因表达的变化,同时选用胆固醇试剂盒测定鹅肝中胆固醇的含量。结果显示,HMGCS1基因的cDNA全长为2 947 bp,开放阅读框编码522个氨基酸(GenBank登录号:KF425515)。荧光定量PCR结果显示,该基因在肝脏中表达显著高于其他组织(P<0.05)。填饲28 d后,填饲组肝脏胆固醇含量低于对照组(P>0.05),该基因在肝脏中的表达显著降低(P<0.05)。氨基酸序列分析表明,HMGCS1基因高度保守,与鸭(Anas platyrhynchos)、鸡(Gallus gallus)、鸽子(Columba livia)等家禽同源性较高。该基因特异性地在肝组织中表达,且该基因的表达与肝脏中胆固醇合成呈正相关。本实验结果为进一步研究HMGCS1基因的功能提供了参考资料。
关键词： 朗德鹅 3-羟基-3-甲基戊二酰辅酶A合酶基因(HMGCS1) 胆固醇合成 填饲 基因表达
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我国冬瓜和节瓜种质资源的研究现状及建议
《植物遗传资源学报 》 2014 北大核心 CSCD
摘要：冬瓜及其变种节瓜原产我国南部地区,是我国传统的重要菜药兼用型蔬菜品种,现广泛分布于亚洲的热带、亚热带和温带地区。目前我国国家种质资源库中保存的冬瓜和节瓜种质资源分别只有299份和69份,且仅对几个种质特征进行了简单描述,许多重要的种质特征信息尚为空白,种质资源的遗传多样性也众说不一。建议今后我国冬瓜和节瓜种质资源研究应重点开展以下几个内容:(1)搜集与抢救散落在民间的大量冬瓜、节瓜种质资源,扩充国家种质资源库;(2)系统、完整地对冬瓜、节瓜种质资源的特征特性进行鉴定;(3)创建我国冬瓜、节瓜种质资源的分子身份证产权保护系统;(4)鉴别和区分冬瓜种质资源中的同名异物或同物异名资源,构建核心冬瓜、节瓜种质资源库。
关键词： 冬瓜 节瓜 种质资源 种质特征 分子身份证 遗传多样性
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大肠杆菌不耐热肠毒素B亚单位对鸭禽流感疫苗的免疫效果
《畜牧与兽医 》 2014 北大核心
摘要：从大肠杆菌不耐热肠毒素B亚单位(LTB)的生物安全性、对鸭的毒副作用以及对鸭禽流感疫苗免疫增强效果等方面进行研究,结果表明,LTB制品中未检测到自身编码基因和抗性标记基因残留;高剂量LTB能诱导产生抗LTB自身抗体,并与剂量呈正相关;当使用剂量增大至50 mg/kg时,试验鸭表现出一定的神经症状及组织学病变;肌肉注射1 mg/kg LTB可显著提高禽流感灭活疫苗免疫鸭的血凝抑制(HI)抗体滴度。研究表明LTB具有增强禽流感疫苗免疫效果的潜力,且对鸭的安全使用剂量不超过50 mg/kg。
关键词： 大肠杆菌不耐热肠毒素B亚单位 鸭 禽流感疫苗
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紫红线茄转基因体系优化及SmARF8基因RNA干涉表达载体的遗传转化
《园艺学报 》 2014 北大核心 CSCD
摘要：建立了以紫红线茄下胚轴为外植体的高效转基因体系。利用该方法,以获得茄子SmARF8基因RNA干涉转基因植株为目的,构建了以NPTⅡ基因为筛选标记的融合表达载体pCAMBIAI35S-2300-SmARF8-INT,并通过农杆菌介导,侵染茄子下胚轴外植体。含有2 mg·L-1吲哚乙酸,0.5 mg·L-1玉米素,25 mg·L-1卡那霉素和500 mg·L-1头孢氨苄的MS选择培养基可直接诱导外植体产生转基因分化苗,再生率达到80%。转基因苗继续生长并在不含激素的MS培养基上产生健壮根系,最终获得转基因株系。RT-PCR和qRT-PCR分析验证了T0代转基因株系中内源基因SmARF8被干涉后不表达或表达量降低,Southern blot分析显示选择的T0代转基因株系中存在1个T-DNA插入拷贝。以上研究结果表明利用建立的转基因体系SmARF8基因在茄子中被成功敲除。
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鸭源坦布苏病毒E蛋白的可溶性表达及免疫原性研究
《中国兽医杂志 》 2014 北大核心
摘要：用RT-PCR扩增鸭源坦布苏病毒YY5株的E蛋白基因片段,分别插入到表达载体pMBP-c、pET-GST、pET-His、pET-DsbA中,构建了一系列原核表达载体,转化人大肠杆菌E.coli Trans10或DE3(plysS)宿主菌。工程菌株经诱导后进行SDS-PAGE,结果显示MBP-E融合蛋白得到了有效表达并且以可溶性蛋白的形式存在,且能与自然感染康复的鸭源多抗和鼠源单抗反应。以MBP-E免疫小鼠制备的高免血清,在体外可以中和DDTMUV,中和抗体效价达到1:46。重组蛋白MBP-E具有良好的免疫反应原性、免疫原性和体外免疫保护特性,这为进一步研制DTMUV重组亚单位疫苗奠定基础。
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L-色氨酸的研究进展
《安徽农业科学 》 2014 北大核心
摘要：L-色氨酸在医药、食品、饲料添加剂以及环境监测等方面的应用越来越广泛,随着市场需求的增大,L-色氨酸的应用研究逐渐成为一项新的热点。综述了L-色氨酸在医药、食品等领域的应用现状,详细介绍了酶法、直接发酵法、微生物转化法等生产L-色氨酸的方法,构建了L-色氨酸高产色氨酸菌株的策略,并对L-色氨酸的研究前景进行了展望。
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桑叶1-脱氧野尻霉素生长分布规律研究
《浙江农业学报 》 2014 北大核心 CSCD
摘要：以浙江省主栽品种农桑14号、强桑1号、荷叶白为对象,研究了不同时间、不同叶片中1-脱氧野尻霉素(DNJ)含量差异以及光照对桑树DNJ含量的影响。结果发现:3个品种桑叶DNJ含量在不同时期差异显著,同一品种不同叶片间DNJ含量同样差异显著。在春季,3个品种嫩芽中DNJ含量分别高达0.432%,0.467%和0.649%;前10片成熟叶DNJ平均含量在5月1日左右最高,此后随着叶片的老化而逐渐降低至0.2%以下。夏伐后,3个品种成熟叶DNJ平均含量在7月1日左右最高,之后随叶片衰老,DNJ含量均逐渐降低,但随着气温升高、光照增强,DNJ含量再次升高,农桑14于9月1日、强桑1号于9月16日、荷叶白于8月16日再次达到峰值,后随叶片进一步衰老而逐渐降低至0.1%以下。农桑14组培苗中DNJ含量测定发现,光照不仅明显影响桑苗生长形态,日光照5 h和16 h桑苗叶片中DNJ含量分别由(0.389±0.029)%提高至(0.689±0.024)%,新梢中由(0.449±0.026)%提高至(0.859±0.037)%。试验结果表明,桑叶DNJ在嫩芽中含量最高,后随叶片老化而降低,但光照可显著提高桑树中DNJ含量,该结果为药用型桑树的栽培区域以及收获时期的选择提供参考。
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