科研产出
转录因子CEBPB对猪δ冠状病毒体外复制的抑制作用
《畜牧兽医学报 》 2025 北大核心 CSCD
摘要:本研究旨在探索CCAAT增强子结合蛋白β(CEBPB)对猪δ冠状病毒(porcine deltacoronavirus,PDCoV)复制的影响.将PDCoV接种于LLC-PK1细胞,检测不同时间点CEBPB表达水平变化;过表达和敲低CEBPB,利用qPCR和Western blot评估其对PDCoV复制的影响;并进一步明确CEBPB在PDCoV复制周期中的作用;利用qPCR筛选出影响CEBPB上调的病毒蛋白,共聚焦显微镜观察PDCoV病毒蛋白与CEBPB的共定位现象.结果显示,随着病毒感染时间的延长,细胞中CEBPB的表达量呈上升趋势,过表达CEBPB显著抑制了 PDCoV的复制,而敲低CEBPB则促进病毒的复制,CEBPB主要作用于PDCoV的复制阶段,并且PDCoV Nsp4能促进CEBPB表达,共聚焦显微镜观察发现两者存在共定位.综上表明,CEBPB能显著抑制PDCoV复制,为基于CEBPB研制潜在的抗病毒药物提供了新的思路.
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不同有机物料施用对滨海盐渍土降盐培肥及大豆促生抗逆的影响
《土壤 》 2025 北大核心 CSCD
摘要:为探究不同有机物料施用对滨海盐渍土降盐培肥和作物促生抗逆的影响,以玉米秸秆、酒糟、金针菇菌渣、双孢菇菌渣、天然腐殖质(MT材料)5种有机物料为研究对象开展大豆盆栽试验,每种有机物料设置低、中、高3种施用量梯度,研究其对滨海盐渍土理化性质、生物活性及大豆生长指标的影响。结果表明,不同有机物料种类及施用量在滨海盐渍土降盐培肥中发挥的作用有所差异:高量施用MT材料的降盐效果最好,可使土壤含盐量显著降低1.5 g/kg;双孢菇菌渣对土壤肥力提升效果最显著,可使土壤有机质、可溶性有机碳和有效磷含量分别提升71.6%、278.7%和89.4%;而玉米秸秆和金针菇菌渣对微生物活性的提升效果最佳,其中高量玉米秸秆使微生物生物量碳含量显著提高1.5倍,高量金针菇菌渣处理使土壤β-葡萄糖苷酶和N-乙酰氨基葡萄糖苷酶活性分别显著提升3.3倍和2.6倍。在作物促生抗逆方面,低量的金针菇菌渣和双孢菇菌渣处理可使大豆干物质量分别增加20.9%和16.2%,Na+/K+的比值分别降低64.5%和59.3%,减轻盐胁迫对大豆生长的影响。另外值得注意的是,酒糟和双孢菇菌渣的高量施用会导致土壤含盐量增加,增强对作物的盐胁迫,提高植株叶片脯氨酸的含量,从而抑制作物生长,降低作物的生物量。因此,利用有机物料改良盐渍土时还需考虑有机物料本底含盐量,合理控制其施用量,以减少其对土壤盐分的积累。
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纳米载体在害虫RNA农药应用中的研究进展
《现代农药 》 2025
摘要:RNA干扰(RNA interference, RNAi)技术因其具有高效性和特异性等优势,已成为害虫绿色防控领域的一种新兴策略。然而,受双链RNA的易降解性及递送效率低下等关键因素限制,其在农业害虫防治中的实际应用受到极大的制约。近年来,纳米材料作为一种高效递送载体,在上述问题的解决上显示出巨大的应用潜力。本文就纳米载体在害虫RNA农药中的应用研究进展和纳米载体介导的核酸农药递送机制进行了综述,并对纳米载体在害虫RNA农药领域的应用前景及其面临的挑战进行了探讨。本文旨在为害虫RNA农药的研发与应用提供参考。
关键词: 纳米载体 害虫 RNA农药 双链RNA 小干扰RNA
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3种花粉处理在淮安红椒两地联合制种的应用
《浙江农业科学 》 2025
摘要:本文探究辣椒的常温新鲜花粉、常温干燥花粉及干燥冷藏花粉的活力变化,以及 3 种花粉处理对田间授粉的影响,并应用于淮安红椒两地联合制种,以探究出一个制种效率及制种纯度相对较高的花粉处理方案.结果表明:辣椒花粉活力随着处理时间的延长而降低,常温新鲜花粉活力最高,通过干燥、冷藏的方式,虽然可以有效延长贮藏时间,但花粉活力却受到破坏,不利于提高制种效率及制种纯度.实际生产中,3 种花粉相辅相成,共同支撑着制种进程,但应优先使用花粉活力高的常温新鲜花粉及常温干燥花粉,减少干燥冷藏花粉的使用.为保障前 2 种花粉产量,可将父本定植时间较母本提前 20 d,父母本定植比例提升至 1∶2.5.
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利用基因编辑技术提高不结球白菜抗坏血酸的含量
《园艺学报 》 2025 北大核心 CSCD
摘要:为提高不结球白菜抗坏血酸含量,以不结球白菜品种‘黄玫瑰’为材料,选择不结球白菜GGP基因的uORF序列为靶标,构建CRISPR/Cas9基因组编辑载体,通过发根农杆菌介导的遗传转化方法获得了4种不同基因编辑类型‘黄玫瑰’GGP基因uORF的编辑植株,检测再生植株的T1代纯合绿色植株的抗坏血酸含量,再与空载转基因再生植株相比,抗坏血酸含量提高了26.2%~67.1%。这为利用CRISPR/Cas9系统在不结球白菜中开展基因编辑和生物育种研究提供了依据。
关键词: 不结球白菜 上游开放阅读框 遗传转化 抗坏血酸 基因编辑
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基于CRISPR/Cas9技术的牛乳腺上皮细胞全基因组敲除文库的构建
《畜牧兽医学报 》 2025 北大核心 CSCD
摘要:旨在构建奶牛乳腺CRISPR/Cas9全基因组敲除细胞文库,用于筛选与奶牛泌乳、应激及疾病等相关的功能基因。本研究靶向牛全基因组蛋白编码基因,利用CRISPR/Cas9技术设计合成转录sgRNAs文库,克隆至慢病毒载体LentiCRISPR-V2,建立牛全基因组CRISPR/Cas9敲除质粒文库,并进行gEditing ScreeningTM文库测序验证;然后将敲除质粒文库进行慢病毒包装和滴度测定,感染牛乳腺上皮细胞(bovine mammary epithelial cells, bMECs)后经嘌呤霉素抗性筛选及RT-qPCR、Western blot技术确定最佳感染效果,最终通过高通量测序验证敲除细胞库中sgRNA覆盖率确定细胞文库质量。本研究构建的全基因组敲除质粒文库共靶向20 545个蛋白编码基因,包含61 237条sgRNA和3 062条牛基因组上无靶点的sgRNA;gEditing ScreeningTM质粒文库测序结果显示,全基因组质粒文库覆盖率为100%,均一性为2.35,测序深度为577×;进一步对质粒文库进行慢病毒包装,获得滴度为7.01×10~8 TU·mL-1的病毒液并感染bMECs,嘌呤霉素筛选14 d得到MOI=0.2、0.3、0.4、0.5的稳转细胞株,RT-qPCR、Western blot结果表明,MOI=0.2时感染效果最佳;高通量测序结果显示,细胞文库覆盖率为78.74%,碱基稳定、序列质量较高。综上所述,牛全基因组质粒文库、全基因组敲除细胞文库符合质量标准和试验需求,能为挖掘调控牛泌乳性状及乳腺健康的关键基因研究提供重要的细胞筛选平台。
关键词: 牛 CRISPR/Cas9 全基因组 敲除质粒文库 牛乳腺上皮细胞 敲除细胞文库
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城市森林公园自然声音对人体生理及心理的影响
《江苏农业科学 》 2025 北大核心
摘要:自然声音对人体健康具有不同影响,探究来自城市森林公园中自然声音对人体生理及心理的作用,有望为营造园林恢复性环境提供理论基础和科学依据.以血压、心率、脉搏、血氧饱和度、脑电波(α波和β波)和呼吸频率作为生理指标,以及心境状态量表作为心理指标,选取江苏省南京市紫金山国家森林公园和老山国家森林公园中自然声音作为声音素材,招募40名志愿者作为试验对象,比较分析受试者在聆听自然声音前后的生理指标和心理指标的数据变化,分析聆听自然声音对人体身心健康的作用.结果表明,聆听自然声音后,受试者的血压、心率、呼吸频率和脑电β波显著下降,脑电α波显著上升,负面情绪(如紧张、抑郁、疲劳)显著减少,精力情绪显著提升.说明自然声音可以降低血压、平缓心率,促进情绪恢复,使人体身心得到放松.进一步分析发现,男性和中年受试者的改善效果更显著,初始状态较差的受试个体改善幅度更大.该结论可为城市园林绿地声景观设计提供科学指导,并揭示自然声音对高压和亚健康群体的潜在疗愈价值.
关键词: 城市森林公园 自然声音 身心健康 脑电波 心境状态量表
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蛹虫草菌糠对山羊羔羊生长性能和血清生化指标的影响
《畜牧与兽医 》 2025 北大核心
摘要:旨在研究开口料中添加蛹虫草菌糠对山羊羔羊生长性能和血清生化指标的影响。测定蛹虫草菌糠活性物质、霉菌毒素含量和抑菌特性,选取23日龄、体重(6.78±1.68)kg的徐淮白山羊羔羊21只,随机分为对照组(基础开口料)、0.5%菌糠组(添加0.5%蛹虫草菌糠的开口料)、1.0%菌糠组(添加1.0%蛹虫草菌糠的开口料),每组7只,预试期7 d,正试期60 d,试验期第31天断奶。结果:试验所用蛹虫草菌糠中虫草素含量为1 127.07 mg/kg,腺苷含量为389.40 mg/kg,对霉菌毒素检测结果表明,伏马毒素含量为0.21 mg/kg,黄曲霉素B1含量为0.01μg/kg,玉米赤霉烯酮含量为0.02 mg/kg,呕吐毒素为0.68 mg/kg,远低于《饲料卫生标准》中羔羊精料补充料的最高限量;添加0.5%菌糠组31~60 d平均日增重显著高于对照组(P<0.05);添加0.5%和1%菌糠组31~60 d料重比均极显著低于对照组(P<0.01);饲喂添加0.5%蛹虫草菌糠的开口料未影响羔羊血清生化指标。综上,蛹虫草菌糠中生物活性物质含量较高,添加0.5%蛹虫草菌糠到开口料中可以提高断奶后羔羊平均日增重,降低料重比。
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基于胶体金免疫层析技术的"瘦肉精"三联检测卡研制
《畜牧与兽医 》 2025 北大核心
摘要:旨在建立一种现场快速同时检测猪尿液中沙丁胺醇、盐酸克仑特罗和莱克多巴胺残留的瘦肉精三联侧流免疫层析方法.采用柠檬酸三钠还原法制备胶体金溶液,并优化免疫探针制备过程中偶联溶液的pH值和检测抗体添加量,以制备瘦肉精胶体金免疫层析三联检测卡,并对三联检测卡的检测限、特异性、加速稳定性、重复性及检测临床样本的准确性进行评价.结果:成功制备了3种胶体金免疫探针,所建立的方法对沙丁胺醇、盐酸克仑特罗和莱克多巴胺的检测限分别为3、3和1ng/mL;测试西马特罗、硫酸特布他林和苯乙醇胺A等常见瘦肉精加标样本时均未发生交叉反应.此外,三联检测卡在37℃加速老化4周后稳定性优良,且批内重复性和批间重复性均良好,未出现假阳性和假阴性反应.临床样本检测结果表明,该方法与液相色谱-质谱联用方法的检测结果一致.综上,本研究建立的瘦肉精胶体金免疫层析三联检测卡灵敏度和特异性高,操作简便,检测时间短且稳定性良好,适用于猪尿液中沙丁胺醇、盐酸克仑特罗和莱克多巴胺的现场快速检测.
关键词: 沙丁胺醇 盐酸克仑特罗 莱克多巴胺 猪尿液 免疫层析 现场检测
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