科研产出
穿孔艾美耳球虫浙江分离株的致病性和免疫原性
《中国兽医学报 》 2019 北大核心 CSCD
摘要：兔球虫病是一种严重威胁我国家兔养殖业的重要传染性寄生虫病,目前,世界公认的兔球虫种类有11种,其中,穿孔艾美耳球虫(Eimeria perforans)在我国兔群的感染率最高,为35.2%;然而,国内尚未有关于其分离株致病性和免疫性的报道.本研究通过单卵囊显微挑选和无球虫兔体内传代技术,从浙江地区分离获得了1株穿孔艾美耳球虫,在此基础上,通过分子生物学技术对其进行了分子鉴定,结果显示,浙江分离株与欧洲分离株在18S rRNA基因序列的同源性在99.2%以上,且在进化树上自成一小亚枝.最后,通过动物试验对其致病性和免疫原性进行了鉴定,致病性试验结果如下:以5*10~2(Ⅰ组),5*10~3(Ⅱ组),5*10~4(Ⅲ组)和5*10~5(Ⅳ组)个孢子化卵囊感染无球虫兔,在感染后4~6 d,各感染组均出现饮水、食料和排粪量明显减少,以及粪便形态干小的临床症状,其中,第Ⅲ组中的2只兔在接种后12 d出现腹泻,并在之后第13天死亡1只,死亡兔剖检十二指肠和空肠有弥散性出血点;在感染后6~12 d,各感染组兔平均体质量数值上略小于不感染对照组,但无显著性差异(P≥0.05);在感染后5~13 d,第Ⅰ~Ⅳ组兔的平均排卵囊总量分别为(3.65*10~7±1.86*10~6)/只、(9.92*10~7±3.60*10~6)/只、(4.89*10~7±4.49*10~6)/只和(3.93*10~7±1.56*10~6)/只,以第Ⅱ组兔的平均排卵囊量最大,排卵囊期持续2周以上,有2个排卵囊高峰,高峰值分别出现在感染后第7和10~11天;免疫原性试验结果如下:第Ⅰ~Ⅴ组兔在感染接种后第14天攻毒,攻毒剂量为1*10~6个孢子化卵囊/只,攻毒后第4~6天,第Ⅲ、Ⅳ组和攻毒对照组(Ⅴ组)出现拉稀症状,其中,第Ⅲ组兔分别在攻毒后第6和7天死亡1只,攻毒后死亡率为50%;攻毒后,除第Ⅲ组外,各组兔平均体质量无显著性差异(P≤0.05);攻毒后第5~10天,第Ⅰ~Ⅴ组兔的平均排卵囊总量分别为(3.88*10~5±2.10*10~5)/只、(8.00*10~5±2.83*10~5)/只、(1.89*10~5±2.25*10~4)/只、(3.36*10~5±7.46*10~4)/只和(1.77*10~6±6.34*10~5)/只,相对于攻毒对照组,第Ⅰ~Ⅳ组兔的卵囊减少排出比率分别为78.0%,54.7%,89.3%和81.0%.以上试验结果表明,穿孔艾美耳球虫浙江分离株为致病性毒株,可导致试验兔拉稀和死亡,但免疫原性不强.
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蝉拟青霉类枯草杆菌蛋白酶基因的克隆及其序列和蛋白质分析
《浙江农业学报 》 2019 北大核心 CSCD
摘要：蝉拟青霉是一种常见的昆虫病原真菌,被广泛应用于生物防治.本研究根据GenBank中已登录的淡紫拟青霉、粉拟青霉、球孢白僵菌和金龟子绿僵菌的类枯草杆菌蛋白酶基因序列的同源性比较,以它们高度保守的核苷酸序列设计一对引物,采用RT-PCR和3′/5′-RACE相结合的方法,从蝉拟青霉中克隆出完整的类枯草杆菌蛋白酶(subtilisin-like protease)cDNA基因序列.cDNA全序列为2 031 bp,该序列5′-端和3′-端的非编码序列长度分别为170 bp和262 bp,开放阅读框为1 599 bp,编码532个氨基酸,信号肽长度为18个氨基酸,前肽长度为133个氨基酸.该基因编码的蛋白序列与虫草棒束孢(Isaria farinosa)、球孢白僵菌(Beauveria bassiana)、蛹虫草(Cordyceps militaris)和哈茨木霉(Trichoderma harzianum)类枯草杆菌蛋白酶有较高的同源性,同源性分别为88%、88%、89%和71%.成熟蛋白具有典型的丝氨酸蛋白酶活性位点,同时有5个半胱氨酸,4个潜在的N-糖基化位点,位于细胞的液泡中与分泌途径相关,二级结构中以α-螺旋和无规则卷曲为主.
关键词： 虫生真菌 蝉拟青霉 类枯草杆菌蛋白酶基因 克隆
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浙北芦笋园滋生甜菜夜蛾杂草种类调查
《浙江农业科学 》 2019
摘要：系统调查浙北芦笋种植区的主要杂草种类,明确芦笋园的杂草优势种群,并以此为基础,进行可作为重发害虫甜菜夜蛾寄主的杂草种类调查.结果表明,浙北芦笋园夏季常见杂草有12科21种,具体种类有牛筋草、千金子、稗草、马唐、狗尾草、早熟禾、醴肠、小飞蓬、泥胡菜、凹头苋、反枝苋、碎米荠、蔊菜、碎米莎草、马齿苋、藜、铁苋菜、酢浆草、苘麻、田菁、通泉草.甜菜夜蛾可取食为害的杂草按照田间有虫株比例从高到低依次是铁苋菜、凹头苋、马齿苋、马唐、酢浆草.醴肠和小飞蓬上可见甜菜夜蛾幼虫,但未见为害状.甜菜夜蛾作为一种杂食性害虫可取食杂草种类是比较广泛的,芦笋园内杂草是甜菜夜蛾重要的滋生场所和重要宿主.
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益生菌免疫研究热点分析——基于中国知网(CNKI)期刊论文的共词分析
《中国家禽 》 2019 北大核心
摘要：将大数据分析与动物营养与饲料科学相结合,以"益生菌"并包含"免疫"为检索对象,在中国知网(CNKI)进行高级检索,CNKI包含相关文献总共1 804篇。以共词分析的研究为总体思路,并运用社会网络分析、关键词聚类分析等方法,全方位多层次分析了益生菌并包含免疫近几年的研究热点及方向。结果表现在两个方面:益生菌对畜禽肠道内营养以及体内免疫功能方面的影响,益生菌对畜禽生长性能和血液生理生化指标的影响。由此推测益生菌未来研究方向:益生菌对畜禽生长、免疫相关基因的表达调控,益生菌对畜禽体内酶活性、mRNA和蛋白表达的影响,益生菌对畜禽肠黏膜屏障功能的影响。
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“鹊山鸡”体尺、屠宰性能、肉品质测定及相关分析
《中国家禽 》 2019 北大核心
摘要：为揭示"鹊山鸡"体尺和屠宰性状的性别差异情况及体尺与屠宰指标间的相关性,试验对30只300日龄公母"鹊山鸡"的体尺和屠宰性状进行测定和分析。结果:平均活重(0.96±0.2)kg、屠体重(0.86±0.18)kg、半净膛重(0.75±0.18)kg、全净膛重(0.75±0.18)kg、胸肌重(0.11±0.03)kg、腿肌重(0.13±0.04)kg,屠宰率(89.34±2.81)%、半净膛率(76.94±3.66)%,"鹊山鸡"体尺和屠宰性状均呈性别显著、极显著差异(P<0.05;P<0.01),"鹊山鸡"各体尺性状、多数屠宰性状及多数体尺与屠宰性状间均呈正相关关系,肉质指标系水力与肉色部分指标间达到了显著或极显著水平(P<0.05;P<0.01)。
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