科研产出
转基因耐除草剂大豆ZH10-6多重PCR检测方法的建立
《农业生物技术学报 》 2021 北大核心 CSCD
摘要：转基因耐除草剂大豆(Glycine max)ZH10-6是由中国农业科学院作物科学研究所研究的转草甘膦降解基因(glyphosate acetyltransferase,GAT)和草甘膦抗性基因(pseudomonas fluorescens G2 strain 5-enolpyruvyl shikimate-3-phosphate synthase,G2-EPSPS)的耐除草剂转基因大豆新品系.为建立其分子特征转化体特异性的检测方法,本研究以插入基因GAT、G2-EPSPS和大豆基因组的边界位点为靶标,设计4组插入序列边界位点特异性引物,结合大豆内标准基因Lectin进行多重PCR(multiplex PCR,MPCR)研究.通过引物特异性测试、体系和反应程序优化、灵敏度分析、以及世代遗传稳定性应用,建立了转基因大豆ZH10-6分子特征转化体特异性多重PCR检测方法.结果表明,该方法具有良好的特异性,MPCR检测体系中5种靶标(边界A,边界B,边界C,边界D,内源基因Lectin)的最适引物终浓度(μmol/L)配比为:0.8:0.3:0.1:0.2:0.05.每种靶标的检测灵敏度可达到1%,可在3个世代间稳定遗传,适用于ZH10-6插入位点快速高效检测.本研究建立的检测方法可有效提高检测效率,降低检测成本,为转基因耐除草剂大豆ZH10-6新品种的分子特征转化体特异性鉴定提供新的检测技术,为该品种分子特征转化体的生物安全评价及知识产权保护和市场行政监管提供技术支撑.
关键词： 转基因耐除草剂大豆ZH10-6;多重PCR;分子特征;转化体特异性;检测方法
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干扰ELOVL6基因对奶牛乳腺上皮细胞脂代谢相关基因的表达及甘油三酯合成的影响
《中国饲料 》 2021 北大核心
摘要：为揭示超长链脂肪酸延伸酶6(ELOVL6)对奶牛乳腺上皮细胞脂代谢及甘油三酯含量的影响,试验采用PCR技术扩增得到ELOVL6基因CDS区,利用在线软件对蛋白的疏水性和跨膜区进行预测,合成并筛选靶向ELOVL6基因的有效siRNA,将有效siRNA转染乳腺上皮细胞,qRT-PCR检测干扰ELOVL6基因对奶牛乳腺上皮细胞乳脂代谢相关基因表达的影响,利用试剂盒检测细胞内甘油三酯含量.结果表明:(1)克隆得到全长为795 bp的奶牛ELOVL6基因(GenBank登录号:MW960011)的CDS区;经序列比对发现,奶牛的ELOVL6基因序列与牛(NM 001102155.1)、山羊(NM 001314257.1)、大羚羊(XM 040237469.1)的同源性分别为100%、96.73%、96.35%;ELOVL6蛋白的理论等电点为5.94,疏水最大值为2.467,最小值为-2.411,具有6个跨膜区域.(2)成功筛选到靶向ELOVL6基因的siRNA,干扰效率达到90%以上(P<0.05).(3)将筛选出的siRNA转染至奶牛乳腺上皮细胞,通过qRT-PCR技术检测乳脂合成相关基因的表达,与对照组相比,干扰ELOVL6基因显著抑制了脂肪酸从头合成及去饱和相关基因乙酰辅酶A羧化酶A(ACACA)、固醇调节元件结合蛋白1(SREBF1)、过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARG)、硬脂酰辅酶A去饱和酶1(SCD1)、脂肪酸转运相关基因脂肪酸结合蛋白(FABP3)、甘油三酯合成相关基因二酰甘油酰基转移酶(DGAT1)、磷酸甘油酰基转移酶6(AGPAT6)和甘油三酯水解相关基因激素敏感性脂肪酶(HSL)的表达量(P<0.05).(4)干扰ELOVL6基因后,乳腺细胞内的甘油三酯含量显著降低(P<0.05).上述表明,ELOVL6基因在奶牛乳腺上皮细胞中通过影响脂质代谢相关基因的表达及甘油三酯含量,进而对奶牛乳腺的脂代谢产生调控作用.
关键词： 超长链脂肪酸延伸酶6;小干扰RNA;乳腺上皮细胞;脂代谢
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天津市生猪产业技术体系创新团队运行状况的调查与思考
《黑龙江畜牧兽医 》 2020 北大核心
摘要：生猪产业技术体系创新团队是天津市现代农业产业技术体系首批建设的四个创新团队之一。笔者在深入调研的基础上,全面分析了该团队的运行现状。指出生猪产业技术体系运行中存在的主要问题包括统筹规划和顶层设计需要进一步完善,交流合作机制、高效对接机制、考核评价机制需要进一步强化,信息化与电商平台建设存在困难,服务生猪产业发展的影响力需要进一步加强。并据此提出加强统筹协调、完善顶层设计,加强开放合作、完善沟通机制,加强上下联动、完善对接机制,改进评价标准、健全激励机制等对策建议。
关键词： 生猪产业技术体系 运行状况 存在问题 对策建议 天津
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2018年天津市原料奶细菌总数、体细胞数及奶牛乳房炎病原菌、耐药基因调研报告
《畜牧与兽医 》 2020 北大核心
摘要：本研究旨在调查天津市原料奶细菌总数、体细胞数及乳房炎病原菌、耐药基因,了解全市原料奶的质量状况及引起奶牛乳房炎发生的主要原因。采集天津市5家乳品加工企业奶罐车的原料奶样品,用于检测体细胞数和菌落总数;采集天津市奶牛养殖场储奶罐奶样品,用于检测体细胞数;采集奶牛场临床型乳房炎发病乳区的牛奶样品,用于检测乳房炎病原菌及耐药基因。结果显示:2018年天津市乳品加工企业原料奶体细胞数平均值为44.65万/mL,标准差42.41万/mL,变异系数94.97%,最大值为225.50万/mL,最小值为1.20万/mL,SCC≤50万/mL的样品占74.37%,50万/mL
关键词： 天津市 奶牛 原料奶 体细胞数 细菌总数 乳房炎 病原菌 耐药基因
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PstVosA1转录因子基因在调控小麦条锈菌耐高温反应中的生物学功能分析
《植物病理学报 》 2020 北大核心 CSCD
摘要：小麦条锈病是典型的冷凉生态区气传真菌病害,病原菌在越夏易变区(即秋季菌源基地)的越夏情况决定了冬季繁殖区条锈菌的初侵染菌源。小麦条锈病的发生流行极易受到温湿度关键气象因子的影响。近年来的调查研究发现,我国小麦条锈菌越夏海拔下限逐年下降,且越夏区范围进一步扩大,说明条锈菌耐高温胁迫能力增强,给未来小麦条锈病流行规律研究及制定防治策略带来了全新挑战。真菌特有的Velvet转录因子家族中VosA基因参与了真菌生长发育和次生代谢的调控,但关于该转录因子在条锈菌耐高温性中的作用却知之甚少。实时荧光定量PCR分析发现,温度敏感菌系蓬9和耐高温菌系A4在侵染寄主过程中PstVosA1基因均受高温胁迫诱导表达,但耐高温菌系PstVosA1相对表达水平明显高于温度敏感菌系蓬9。利用寄主诱导的基因沉默技术(HIGS)沉默小麦条锈菌耐高温菌系A4中的PstVosA1基因能显著降低在高温(21℃)接种条件下的平均发病严重度、孢子堆密度和生物量。研究结果说明PstVosA1基因正调控小麦条锈菌耐高温胁迫反应过程,增加该基因的表达水平,有利于增强小麦条锈菌耐高温性。
关键词： 小麦条锈病 转录因子 耐高温反应 寄主诱导的基因沉默(HIGS)
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不同耐贮性粉果番茄贮藏期间果实软化相关酶活性的研究
《保鲜与加工 》 2020 北大核心
摘要：以不同耐贮性的粉果番茄品种"欧盾"、"津粉207"为试材,研究在低温(10±0.2)℃贮藏期间果实硬度、乙烯释放量、细胞壁降解酶活、膜脂过氧化以及抗氧化酶活性的变化。结果表明:随着贮藏时间的延长,耐贮性强的"欧盾"品种番茄果实硬度下降较慢,乙烯释放量低,细胞壁降解酶活性、丙二醛含量、脂氧合酶(LOX)和抗氧化相关酶活性偏低;而"津粉207"品种番茄比"欧盾"品种番茄硬度下降快,乙烯释放量和丙二醛含量高,细胞壁降解酶活性、LOX和抗氧化相关酶的活性较高。
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复合益生菌对生猪健康状况影响的研究进展
《饲料研究 》 2020 北大核心
摘要：益生菌作为一种新型抗生素替代品被广泛应用于畜牧业中。文章从乳酸菌、枯草芽孢杆菌和酵母菌复合益生菌能够促进生猪对营养物质的消化吸收和肠道发育,维持肠道菌群平衡,进而改善生猪肠道健康等方面进行阐述,为其在生猪上的应用提供参考。
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新型双层立体栽培架不同基肥配比对草莓产量和品质的影响
《北方园艺 》 2020 北大核心
摘要：以草莓品种"红颜"为试材,采用新型双层立体栽培架种植模式,研究了发酵鸡粪和蚯蚓粪不同基肥配比对草莓产量和品质的影响,以期为提升草莓立体栽培的产量和品质提供参考依据。结果表明:基质和鸡粪的体积比为6∶1处理的产量最高,667 m~2产量最高为1 216.05 kg,基质和蚯蚓粪的体积比为4∶1处理产量次之,667 m~2产量为1 120.19 kg。不同处理的果实品质有一定的差异,综合比较以基质和蚯蚓粪的体积比为4∶1处理的品质最优,基质和鸡粪的体积比为6∶1处理的品质次之。鸡粪处理的植株干质量普遍高于蚯蚓粪处理。因此,新型立体栽培架基质和鸡粪的体积比为6∶1处理和基质和蚯蚓粪的体积比为4∶1处理产量和果实品质较优。
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一次性纸杯中全氟辛酸及全氟辛烷磺酸的膳食暴露研究
《食品工业科技 》 2020 北大核心
摘要：为了评估不同人群通过一次性纸杯摄入全氟辛酸(PFOA)及全氟辛烷磺酸(PFOS)的风险,采用超高效液相色谱串联质谱法测定一次性纸杯中PFOA及PFOS向不同食品中的迁移量,结合调查所得一次性纸杯的消费数据,利用点评估方法计算PFOA及PFOS通过一次性纸杯向不同人群的急性及慢性暴露量,并评估其急慢性暴露风险。结果表明,20种一次性纸杯中,PFOA及PFOS向食品中的迁移量分别为ND～23.70×10~(-3) ng/cm~2、ND～4.10×10~(-3) ng/cm~2;PFOA及PFOS的急性人群暴露量分别为45.67×10~(-3)～168.36×10~(-3) ng/(kg·d)和7.91×10~(-3)～29.14×10~(-3) ng/(kg·d),慢性人群暴露量分别为0.16×10~(-3)～4.05×10~(-3) ng/(kg·d)和0.02×10~(-3)～0.51×10~(-3) ng/(kg·d),均远低于欧盟推荐的每日摄入耐受量。人群通过一次性纸杯摄入PFOA及PFOS的风险处于可接受的水平。
关键词： 超高效液相色谱串联质谱法 一次性纸杯 全氟辛酸 全氟辛烷磺酸 迁移量 膳食暴露评估
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贝母属植物叶绿体基因组候选SNP位点应用分析
《分子植物育种 》 2020 北大核心 CSCD
摘要：贝母属植物是中国中药材的宝库,由于形态上难以区分,在民间应用、临床应用和中药市场中还存在混淆应用、以次充好的现象,急需开发基于新型分子标记位点的精准检测方法。本研究应用多重序列比对、SNP筛选等生物信息学分析手段,对贝母属15种植物28条叶绿体基因组序列进行分析。结果发现,贝母属叶绿体基因组DNA同源性达97.22%,通过分析共发现SNP位点5 879个,其中川贝母类鉴别候选位点71个,川贝母鉴别候选位点4个,瓦布贝母鉴别候选位点37个,太白贝母鉴别候选位点147个,浙贝母鉴别候选位点91个,湖北贝母鉴别候选位点271个,平贝母鉴别候选位点1 393个,伊贝母鉴别候选位点89个。本研究还对SNP位点在精准鉴定、精确定量应用方面进行了讨论,可为川贝母中药资源鉴定提供技术支撑。
关键词： 贝母属 叶绿体基因组 SNP位点 生物信息学分析 检测方法
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