科研产出
丝状真菌目标基因替换过程中的策略与方法
《遗传 》 2007 北大核心 CSCD
摘要：目标基因替换是基因功能分析的重要手段。随着基因组测序和转化技术的进展,该技术在丝状真菌功能基因组学中的应用越来越广泛,新的体系与方法不断建立和完善。文章在转化体系、打靶载体构建、突变体筛选等方面综述了丝状真菌目标基因替换过程中的策略与方法,并对各方法的优缺点及发展趋势进行了评述。
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松毛虫DpKettin基因片段的克隆与初步定位研究
《遗传 》 2007 北大核心 CSCD
摘要：对于ZW型鳞翅目昆虫,雄性为ZZ,雌性为ZW;细胞内Z染色体数与常染色体组数之比在雌雄间存在差异,雄性为2Z∶2A=1.0,雌性为Z∶2A=0.5,如果某物种一个基因(假如K基因)位于Z染色体上,另一个基因(假如N基因)位于常染色体上,则雄体中2K∶2N=1.0,雌体中K∶2N=0.5。研究利用家蚕、棉铃虫等昆虫Kettin基因序列,克隆了松毛虫的同源基因(DpKettin)片段,并采用荧光定量PCR技术,以松毛虫的ANT基因为参照基因,检测松毛虫雌雄不同个体间DpKettin基因与腺苷酸转移酶基因(ANT)的拷贝数之比,结果表明:雄体DpKettin∶ANT=1.0,雌体DpKettin∶ANT=0.5,说明DpKettin基因位于松毛虫Z染色体上。
关键词： DpKettin基因 ANT基因 荧光定量PCR Z染色体 松毛虫
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外来入侵害虫—西花蓟马分子鉴定
《生物入侵与生态安全——“第一届全国生物入侵学术研讨会”论文摘要集 》 2007 CSCD
摘要：西花蓟马Frankliniellaoccidentalis是世界范围内重要的经济作物害虫,我国于2003年首次报道发生并确定为危险性外来入侵害虫。为建立西花蓟马快速分子鉴定技术,本研究以西花蓟马及与西花蓟马亲缘关系非常近的花蓟马F.intonsa不同虫态基因组DNA为模板,利用已发表的通用引物CS249/CS250,扩增出核糖体DNA(ribosomalDNA)18S与28S之间区域,大小1.4Kb,并直接测序,利用DNAman对测序结果进行比对,设计扩增西花蓟马rDNA内转录间隔区1(ITS1)与内转录间隔区2(ITS2)之间的特意引物F1/F2。利用这两对引物建立了双、单管巢式PCR体...
气相色谱-质谱法测定哈茨木霉菌代谢产物中单端孢霉烯化合物的含量
《分析化学 》 2007 SCI 北大核心 CSCD
摘要：利用气相色谱-质谱法建立了哈茨木霉菌发酵代谢产物中活性有效成分单端孢霉烯化合物含量的分析测定方法。用乙酸乙酯提取样品,并测定提取液中单端孢霉烯化合物的含量,以保留时间和单端孢霉烯化合物的质谱特征离子峰(m/z292、277、149、135、121和107)为定性分析依据,用外标法定量。在所建立的分析条件下,单端孢霉烯化合物的保留时间为8.09min,方法检出限为0.04μg/L;在0.5~50μg/L范围内具有良好的线性关系,相关系数为0.9998;回收率102.3%;RSD为0.86%。方法灵敏度高,选择性好,准确度高,可为哈茨木霉菌菌株改造和发酵生产研究中单端孢霉烯化合物的跟踪检测提供灵敏、准确的分析手段。
关键词： 哈茨木霉 代谢产物 单端孢霉烯化合物 气相色谱-质谱
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鸭新城疫病毒和流感病毒多重RT-PCR鉴别诊断技术的建立和应用
《中国兽医学报 》 2007 北大核心 CSCD
摘要：对同样以引起鸭产蛋下降为主要特征的鸭流感病毒(AIV)分离株和鸭新城疫病毒(NDV)YH99V分离株,通过设计特异性引物和优化体系反应条件,建立了一种早期快速鉴别诊断鸭AIV和鸭NDV的单项RT-PCR方法和多重RT-PCR方法,AIV的扩增片段大小为483bp,NDV的扩增片段为310bp,电泳快速,易于区分。敏感性试验表明,该方法比HA敏感100倍以上;对AIV、YH99V、IBV、IBDV及正常鸡胚尿囊液的混合液检测显示,多重RT-PCR法具有很强的特异性。对鸭病毒性产蛋下降征侯群送检病料的检测证明,该方法能有效鉴别AIV和/或NDV单独感染或混合感染,阳性检出率明显高于HA方法。
关键词： 多重RT-PCR 鸭流感病毒 鸭新城疫病毒 鸭病毒性产蛋下降征侯群
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猪未成熟卵母细胞玻璃化冷冻的研究
《安徽农业科学 》 2007 北大核心 CSCD
摘要：研究了乙二醇(EG)、二甲基亚砜(DMSO)、丙二醇(PROH)和甘油(GLY)这4种渗透性冷冻保护剂及其两两组合对玻璃化冷冻未成熟(GV期)猪卵母细胞的影响;比较了3种不同冻前预处理方法和2种不同的解冻方法。结果表明:EG组卵母细胞所取得的成熟率为12.90%,与DMSO组(8.62%)及EG和DMSO混合组(9.61%)差异不显著(P>0.05),但明显好于其他各组(P<0.05);6步预处理法和3步预处理法所取得的卵母细胞存活率和成熟率显著高于1步预处理法(P<0.05),成熟率分别为12.33%和11.11%;3步和4步解冻法取得的成熟率要显著好于1步解冻法,成熟率分别达12.70%、10.47%。
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连续日称重杜洛克公猪的生长曲线分析
《浙江农业学报 》 2007 CSCD
摘要：利用14头杜洛克公猪1 596条连续日称重记录,进行了Logistic方程和Compertz方程的生长曲线拟合分析。结果表明:两种方程的拟合度(R2)在0.99以上,拐点体重和日龄差别不显著。但综合杜洛克公猪实际成熟体重考虑,用Compertz方程对杜洛克公猪进行生长曲线的拟合效果更好,更接近实际。
关键词： 杜洛克公猪 生长曲线 Logistic方程 Compertz方程
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~(137)Cs-γ射线辐射对早籼稻种子发芽及幼苗生长的影响
《浙江农业学报 》 2007 CSCD
摘要：分别用100,200,250,300,400,500 Gy等6种剂量和250 Gy剂量的137Cs-γ射线辐射15个不同遗传背景的早籼稻品种(系)的种子和糙米。结果表明:低剂量(小于300 Gy)辐射对种子的发芽率和幼苗生长影响不明显;高剂量(300~500 Gy)辐射对发芽率和幼苗生长有明显的抑制作用;250 Gy剂量辐射对糙米的发芽力的抑制作用比种子强;不同品种间千粒重、直链淀粉含量种子经250 Gy剂量辐射后发芽力和幼苗生长存在明显的差异。
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白菜雄性不育系及保持系的花器官和抗氧化酶活性的差异
《浙江农业学报 》 2007 CSCD
摘要：以3个遗传背景不同的父本转育而成的白菜不育系(04-256,04-320,04-376)及其相应的保持系(04-34,04-56,04-102)为材料,观察花蕾和花药等花器官的形态变化;同时对其开花期的花蕾、花茎、花瓣、雌蕊和叶子的ASA-POD(抗坏血酸过氧化物酶),POD(过氧化物酶),CAT(过氧化氢酶),SOD(超氧化物歧化酶)等抗氧化酶活性进行测定。结果表明:(1)3份不育材料不育度均为100%,不育系花蕾纤细、瘪,雄蕊乳白色、退化成短丝状、无花粉;(2)各器官的ASA-POD,POD,CAT,SOD等抗氧化酶的活性变化在开花期表现基本一致,花蕾的抗氧化酶活性不育系高于保持系,而雌蕊的酶活性表现则相反,抗氧化酶活性保持系均高于不育系,且每个对应的不育系和保持系材料间均达显著差异;保持系和不育系的花茎、花瓣、叶子的抗氧化酶活性不同。
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