科研产出
PRRSV N与GP5蛋白抗原表位的串联表达及其间接ELISA检测方法的建立
《西北农林科技大学学报(自然科学版) 》 2017 北大核心 CSCD
摘要:【目的】建立基于N与GP5蛋白抗原表位串联的猪繁殖与呼吸综合征病毒(Porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)抗体ELISA检测方法,为开发准确、廉价的PRRSV抗体检测试剂盒奠定基础。【方法】将PRRSV的N蛋白和GP5蛋白抗原表位串联优化后进行原核表达,以表达的目的蛋白为抗原,通过优化反应条件建立检测PRRSV抗体的ELISA方法,对其特异性、重复性进行检测。用建立的间接ELISA方法和商品化IDEXX试剂盒同时对临床送检的45份猪血清样品进行检测,计算其符合率。【结果】SDS-PAGE和Western Blot分析表明,表达的目的蛋白分子质量约为24.7ku,具有良好的生物学活性,且为可溶性表达。目的蛋白经纯化后作为抗原包被ELISA平板,建立检测PRRSV抗体的间接ELISA方法,优化后的ELISA条件为:抗原(纯化后的目的蛋白)包被量为5μg/mL、一抗(猪血清)1∶80稀释、酶标二抗1∶5 000稀释,以含50g/L脱脂奶粉的PBST作为封闭液,37℃孵育60min,抗体(一抗和酶标二抗)于37℃孵育90min,TMB避光显色8min;间接ELISA的判定标准为:OD450≥0.345 2为阳性,OD450<0.345 2为阴性。所建立的间接ELISA方法特异性强,对猪常见病原,如猪伪狂犬病毒、猪圆环病毒2型、猪瘟病毒和猪流行性乙型脑炎病毒高免血清检测均为阴性;重复性好,组内变异系数和组间变异系数分别为1.02%~3.94%和1.38%~4.83%。用所建立的间接ELISA方法对临床送检45份猪血清样品的检测阳性率为84.44%(38/45),商品化IDEXX试剂盒检测的阳性率为80%(36/45),2种方法的符合率为94.73%(36/38)。【结论】成功建立了基于N与GP5蛋白抗原表位串联的PRRSV抗体ELISA检测方法。
关键词: 猪繁殖与呼吸综合征病毒 N蛋白 GP5蛋白 抗原表位 串联表达 间接ELISA
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非致病性尖孢镰刀菌固体发酵条件筛选
《福建农业学报 》 2017 北大核心
摘要:为优化枯萎病植物疫苗工程菌株——非致病性尖孢镰刀菌FJAT-9290固体发酵条件,以产孢量为指标,分析了培养基初始含水量、初始接种量、培养温度和培养时间对菌株产孢量的影响,筛选出最优的发酵条件。结果表明,利用组培瓶培养7d,分别筛选出菌株生长的最佳初始含水量为50%、初始接种量为7%和培养温度为28℃,并在此基础上,利用聚丙烯塑料袋培养,发酵至20d时菌株的产孢量最高,孢子数量达6.35×108个·g-1,较初始接菌量增加了4个数量级。
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大田县茶园土壤和茶叶中锌含量及影响因素分析
《茶叶学报 》 2017
摘要:采集了大田县25份茶园土壤样品及相应的茶叶样品(一芽二叶),分析了茶园土壤和茶叶锌含量及其影响因素。结果表明:大田县茶园土壤全锌含量为60.1~210.0 mg·kg~(-1)(均值106.1 mg·kg~(-1)),高于福建省土壤全锌含量背景值(87.7 mg·kg~(-1));土壤有效锌含量为0.8~10.9 mg·kg~(-1)(均值为3.8 mg·kg~(-1)),约有20%土壤样品低于高产茶园土壤有效锌临界值(2.0 mg·kg~(-1));锌活化率1.1%~5.7%,均值为3.3%。供试茶叶锌含量为60.0~96.1mg·kg~(-1)(均值为73.0mg·kg~(-1)),明显高于我国茶叶锌含量的平均值(40.6mg·kg~(-1)),均达到了天然富锌茶标准。茶园土壤全锌与土壤有效锌之间呈极显著正相关。茶叶锌富集系数与土壤全锌、有效锌和锌活化率呈极显著负相关,与其它理化性质之间相关性不显著。总体而言,大田县茶园土壤全锌和有效锌含量丰富,茶叶中锌含量达到了天然富锌茶标准,具备开发天然富锌茶的潜力。
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不同类型果袋对‘巨玫瑰’葡萄果实品质的影响
《福建农业学报 》 2017 北大核心
摘要:以‘巨玫瑰’葡萄为试材,于花后15d分别采用白色木浆纸袋、半透明塑料袋及尼龙网袋3种果袋套袋,研究对其果实品质的综合影响。结果表明:3种果袋处理均能增大‘巨玫瑰’葡萄的果粒重、促进可溶性固形物含量积累,降低可滴定酸含量。不同处理间以套白色木浆纸袋处理综合表现最好:果实完全成熟时果形适中,果肉硬度0.081kg·cm~(-2),果粒重10.27g,可溶性固形物质量分数19.00%,总酸质量分数0.208%,含维生素C4.410mg·hg~(-1),固酸比值91.35,耐贮运性强。
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浅谈农业信息化对我国农业发展的促进
《农业开发与装备 》 2017
摘要:信息化技术改变了许多传统行业的发展,农业也不例外。较详细地阐述了我国农业信息化的发展现状,并对我国农业信息化发展展提出一些建议。
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