科研产出
牛奶中6种黄曲霉毒素的3种液相色谱法比较
《食品工业 》 2016 北大核心
摘要：比较了牛奶中黄曲霉毒素测定的3种液相色谱分析方法。样品经直接稀释、免疫亲和柱净化,以乙腈-甲醇-水体积比(22︰22︰46)为流动相,分别经柱后光化学衍生化、未衍生化及碘衍生化-液相色谱-荧光法进行测定。柱后光化学衍生化,黄曲霉毒素M_2,M_1线性范围为0.02~20μg/L,G_2,B_2 0.005~20μg/L,G_1,B_1 0.01~20μg/L,相关系数≥0.999,定量限为0.000 5~0.002μg/kg,加标回收率79%~116%;柱后碘衍生化,M_2,M_1线性范围分别为0.02~20,0.05~20μg/L,其余4种均为0.01~20μg/L,相关系数≥0.999,定量限0.001~0.005μg/kg,回收率74~121%;未经衍生化直接进样,G_2,B_2线性范围0.005~20μg/L,其余4种为0.02~20μg/L,相关系数≥0.998,定量限0.000 5~0.003μg/kg,回收率82%~121%。结果表明,柱后光化学衍生测定6种黄曲霉毒素在线性范围、灵敏度和定量限等方面均具有优势。
关键词： 黄曲霉毒素 高效液相色谱 牛奶 光化学衍生化 碘衍生化 未衍生化
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擎天凤梨苞片叶绿素代谢关键基因的分离及褪绿的分子机理
《中国农业科学 》 2016 北大核心 CSCD
摘要：【目的】擎天凤梨是一种新潮花卉,其苞片在成花变色过程中常常伴随着绿色的逐渐消退。分离叶绿素生物合成与降解途径的关键基因,探索在苞片变色过程中叶绿素代谢的分子基础和机理,有助于解析呈色苞片中绿色退化的原因。【方法】通过c DNA文库构建及EST批量测序获得叶绿素合成关键酶:谷氨酰t RNA合成酶基因(glutamyl-t RNA synthetase,GTS)和尿卟啉原-Ⅲ合酶基因(uroporphyrinogen-Ⅲsynthase,UROS);通过同源克隆技术获得叶绿素降解关键酶:脱镁叶绿素酶(pheophytin pheophorbide hydrolase/pheophytinase,PPH)基因;通过采用透光系数法测量叶绿素含量、HPLC法测定类黄酮含量以及采用实时定量PCR法测定叶绿素代谢关键基因的基因表达模式,探索呈色苞片中绿色部分消失的分子机理。【结果】获得的GTS(Gen Bank:KP144289),序列长为1 140 bp,编译171AA的蛋白氨基酸序列,并存在Gln RS-cataytic core和Nt-trans superfamily保守区;获得的UROS(Gen Bank:KP144288)c DNA序列长为613 bp,编译188AA的蛋白氨基酸序列,并存在Hem D和Hem D Superfamily保守区;获得的PPH(Gen Bank:KP723523)c DNA序列长为266 bp,编译88AA的蛋白氨基酸序列,并存在Abhydrolase-6保守区。通过对不同变色阶段苞片的叶绿素、类黄酮含量测定以及叶绿素代谢相关基因的表达水平分析,可知苞片变色过程伴随着叶绿素含量的显著降低和类黄酮含量的明显增加,同时叶绿素合成相关的GTS和UROS表达水平也明显降低,而叶绿素降解关键酶基因PPH的表达水平在苞片变色初期显著上升,在变色完成后则降低到接近绿叶状态的最低水平。而作为对照材料的绿叶,其叶绿素含量是最高的,而类黄酮含量是最低的,同时叶绿素的合成相关酶基因表达量最高,而降解相关酶基因表达量最低,这与彩叶植物中叶绿素和类黄酮色素的表现较为一致。【结论】获得了擎天凤梨的叶绿素合成相关酶基因GTS和UROS以及降解关键酶基因PPH。由于叶绿素合成量减少,降解量显著增加引起叶绿素含量的降低,从而影响苞片变色过程中绿色的消退,并伴随类黄酮含量的增加。PPH在叶绿素的降解过程中起关键性作用。
关键词： 擎天凤梨 叶绿素 谷氨酰t RNA合成酶基因 尿卟啉原-Ⅲ合酶基因 脱镁叶绿素酶
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三个大豆品种萌发期和苗期的耐盐性比较
《浙江农业学报 》 2016 北大核心 CSCD
摘要：以3个大豆品种冀豆12、浙春4号和天隆一号为试验材料,分别研究了Na Cl(盐)处理对种子萌发和大豆幼苗植株生长的影响。种子萌发试验表明,高浓度盐处理显著抑制种子发芽,且不同品种之间差异显著,冀豆12表现相对较好。大豆2叶1心期,以100 mmol·L-1Na Cl浇施大豆幼苗1次,2 d后重复1次,并测定抗逆相关生理指标,结果表明,盐胁迫下大豆的叶绿素含量、根系活力、干质量均有所降低;丙二醛含量、过氧化物酶活性、超氧化物歧化酶活性、游离脯氨酸含量均升高,不同品种各指标的升降幅度各不相同。综合种子萌发及苗期耐盐性,试验初步判断冀豆12比其他2个品种更耐盐。
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茶多酚和葡萄籽提取物对假单胞菌抗生物被膜的抑制作用
《中国食品学报 》 2016 北大核心 CSCD
摘要：研究茶多酚(TP)和葡萄籽提取物(GSE)对假单胞菌生物被膜形成的影响。采用结晶紫法、XTT法和银染法评价TP和GSE在不同质量浓度和不同添加时间下对假单胞菌抗生物被膜的作用。结果表明,2株铜绿假单胞菌能够形成被膜,其中1~3 d是快速形成期。随着作用质量浓度增加,TP和GSE对假单胞菌生长和生物被膜的抑制作用增强(P<0.05),其MIC分别为1 mg/m L和2 mg/m L,在亚抑菌浓度仍表现明显的抗生物被膜作用(P<0.05)。1/2 MIC TP和GSE在被膜形成初期的12 h添加能显著抑制被膜形成(P<0.05),其中0 h添加效果最佳,抑制率为55%~67%;24 h后添加作用微弱,且TP和GSE不能清除成熟的生物被膜。TP和GSE处理组显著降低被膜菌的菌体活力(P<0.05),并且处理组细菌胞外分泌物低于对照组。TP和GSE在亚抑菌浓度下表现出较强的抗铜绿假单胞菌生物被膜作用,主要通过影响假单胞菌初期的粘附。本研究为植物多酚在食品贮藏和保鲜的广泛应用提供理论基础。
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26份黄麻种质资源产量性状的主成分聚类分析及其评价
《植物遗传资源学报 》 2016 北大核心 CSCD
摘要：为了解所收集黄麻种质资源的产量性状及遗传多样性,为黄麻育种和生产利用提供科学依据。本研究对26份黄麻品种(系)的8个产量性状进行主成分估算,并以前3个主成分为基础,分别作聚类分析和二维排序图。结果表明:参试材料产量相关性状的变异系数为2.54%~14.70%,其中,皮厚、单株鲜皮重、单株鲜骨重、鲜皮晒干率、单株干皮产量5个产量性状的变异系数超过10%,说明产量性状的变异潜力较高。主成分分析表明,单株鲜皮重因子、鲜皮晒干率因子、分枝高因子这3个主因子提供了原始性状88.247%的信息;在欧氏距离聚类图中,当取值D=2.15时,可把26个黄麻育成品种(系)分成4类,第Ⅰ类群包含18份材料,占69.23%,第Ⅱ类群包含5份材料,占19.23%,第Ⅲ类群只有1个品种(系),第Ⅳ类群包括黄麻179和宽叶长果2份材料,各个类群具有不同的特点,在黄麻杂交育种上可根据不同类别的特点加以利用;二维排序表明9(09品-11)、11(89m5-83)、12(09繁-7)、19(福黄麻1号)、21(黄麻831)、25(Y007-10)等6个高产品种(系)的3个主成分构成因子协调最好。将聚类分析和二维排序分析结合起来的分析方法,能较好地为黄麻品种改良以及亲本利用提供科学依据。
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实时荧光定量PCR法检测草莓镶脉病毒
《浙江农业学报 》 2016 北大核心 CSCD
摘要：为了建立一种特异、灵敏、快速检测草莓镶脉病毒(Strawberry vein banding virus,SVBV)的SYBR Green-Ⅰ实时荧光定量PCR方法,根据已有的检测SVBV的引物信息,合成引物,对不同草莓品种进行PCR扩增。经过克隆、测序及序列比对得到了感染SVBV的阳性植株,利用此植株PCR扩增产物构建重组质粒作为标准品,优化了PCR反应体系,标准曲线的循环阈值(Ct值)与模板浓度有良好的线性关系(R2=0.999 1);进行了灵敏度和重复性试验,敏感性可达到10~1拷贝·μL~(-1),约为普通PCR的1 000倍,重复性好;并与常规PCR方法进行了比较,成功建立了检测SVBV的实时荧光定量PCR法。用该方法检测了部分草莓品种的DNA样品,结果表明,大部分植株都带有SVBV。该方法具有很高的灵敏性和重复性,可用来快速检测草莓植株是否感染SVBV。
关键词： 草莓镶脉病毒 SYBR Green-Ⅰ 实时荧光定量PCR
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中国对虾(Fenneropenaeus chinensis)肌肉蛋白提取物对致敏小鼠体内酶的影响
《中国食品学报 》 2016 北大核心 CSCD
摘要：本文研究腹腔注射中国对虾(Fenneropenaeus chinensis)肌肉蛋白提取物前后小鼠体内几种酶因过敏反应而产生的变化。以小鼠的肝脏、肾脏、脾脏、血清为试验样本,对其体内的超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、谷胱甘肽-S-转移酶(GST)、一氧化氮合酶(NOS、iNOS、c NOS)、磷脂酶A2(PLA2)以及钙离子ATP酶(Ca2+-ATPase)的活性、浓度或m RNA相对表达量进行分析。测定结果显示:腹腔注射不同剂量虾蛋白粗提物后,各组小鼠血清中s Ig E水平显著增加,说明过敏模型已成功建立。过敏个体内肝、肾、脾和血清中SOD、POD、CAT、GSH-Px、GST、NOS(i NOS)活性明显提高,PLA2浓度也显著增加,而肝、肾、脾内Ca2+-ATPase m RNA相对表达量下降。本研究结果为中国对虾蛋白动物过敏的评价及反应机理提供一定理论依据。
关键词： 中国对虾 ICR小鼠 过敏 酶 双抗夹心ELISA RT-PCR
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基于超临界萃取与模拟移动床技术的铁皮石斛化学成分研究
《中国药学杂志 》 2016 北大核心 CSCD
摘要：目的对铁皮石斛化学成分提取并筛选主要活性指标,建立可靠的分离测定方法。方法采用超临界二氧化碳萃取(SFE)和模拟移动床(SMB)对铁皮石斛成分进行提取与分离。结果最优SFE萃取条件下,可得铁皮石斛粗萃物和柚皮素分别为46 g·kg-1和30 mg·kg~(-1);粗萃物中柚皮素在最优超临界流体模拟移动床(SF-SMB)条件下,得率由1 199 mg·kg~(-1)提高至2 400 mg·kg~(-1),粗萃物中特征峰(peak X)含量由4.99%增加至20.44%;分离纯化SF-SMB萃出液中富集的特征峰(peak X),采用GC-MS/IR鉴定出该化合物为4-烯丙基-2,6-二甲氧基苯酚。结论本实验可为铁皮石斛质量控制研究提供良好基础,可为铁皮石斛天然成分的工业化提取提供新思路。
关键词： 铁皮石斛 超临界二氧化碳萃取 模拟移动床 柚皮素 4-烯丙基-2,6-二甲氧基苯酚
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