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斜纹夜蛾酵母双杂交文库的构建及其在蜕皮激素受体互作蛋白筛选中的应用

昆虫学报 2016 北大核心 CSCD

摘要:【目的】蜕皮激素在昆虫变态发育中起着关键的调控作用。蜕皮激素活化为20-羟基蜕皮酮(20-hydroxyecdysone,20E)后与蜕皮激素受体二聚体〔蜕皮激素受体(ecdysone receptor,EcR)和超气门蛋白(ultraspiracle protein,USP)〕结合,启动20E诱导的级联反应。本研究旨在从互作蛋白角度探究EcR/USP自身调控的分子机理。【方法】以重要农业害虫斜纹夜蛾Spodoptera litura为研究对象,通过构建酵母双杂交筛选系统分别筛选了与EcR和USP相互作用的蛋白。【结果】文库转化效率达到3.0×106cfu/μg,文库滴度达到1.3×108cfu/m L,文库插入片段大小在500~2 000 bp之间。4种诱饵质粒(EcRA/p GBKT7,EcRB1/p GBKT7,USP1/p GBKT7和USP2/p GBKT7)对酵母细胞无毒性,并且无自激活性,说明构建的酵母双杂交文库质量可靠。用以上4种诱饵质粒筛选酵母双杂交文库,共得到110个互作蛋白,其中与EcRB1,USP1和USP2互作的蛋白分别有26,52和32个,未筛选到与EcRA互作的蛋白。随后,从中挑选了Dna J-5(Hsp40 homolog 5,一种热激蛋白分子伴侣),MBF2(mediator of Bm FTZ-F1 type 2,一种转录共激活子),polyubiquitin(多聚泛素类蛋白),esr16(ecdysteroid regulated 16k Da protein,一种蜕皮激素调控蛋白)和NEDD8-like(neural precursor cell expressed,developmentally down-regulated protein 8,一种泛素调节相关蛋白)5种蛋白,利用酵母双杂交和Far-Western印迹法进一步验证了蛋白间的互作关系。【结论】分子伴侣和泛素化修饰等在蜕皮激素受体调控中可能起着重要作用。本研究对深入理解昆虫变态发育的分子机理具有重要意义。

关键词: 斜纹夜蛾 变态发育 蜕皮激素受体 酵母双杂交文库 互作蛋白

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浅议农业科研事业单位固定资产管理

经贸实践 2016

摘要:农业科研事业单位的固定资产是农业科研事业单位正常运转的重要物质基础。本文论述了农业科研事业单位固定资产管理存在的主要问题,分析了造成问题的原因,并提出了进一步加强农业科研事业单位固定资产管理的对策。

关键词: 农业 科研事业单位 固定资产管理

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“紫叶甘薯1号”的抗氧化活性研究

农产品加工 2016

摘要:为开发自主培育新品种"紫叶甘薯1号"的应用前景,对其总黄酮含量和抗氧化活性进行了测试。试验结果表明,紫叶中总黄酮含量为5.21%,比普通紫薯高50%;紫叶对羟基自由基、超氧阴离子和DPPH·的清除能力分别比紫薯高4.6%,33%和15.6%。由此可见,紫叶甘薯1号作为一种高黄酮含量的原料,在保健品市场中具有良好的应用前景。

关键词: 紫叶甘薯1号 总黄酮 抗氧化活性

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优质杂交稻泰丰优208高产制种技术

杂交水稻 2016 北大核心 CSCD

摘要:泰丰优208是广东省农科院水稻研究所育成的感温型三系杂交稻组合。2015年春、夏季利用优质高产制种新技术,在海南省乐东县和湖南省芷江县制种泰丰优208共47 hm2,平均产量3.03 t/hm2,最高单产达3.45 t/hm2。

关键词: 杂交水稻 泰丰优208 制种技术

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南昆山毛叶茶咖啡碱合成酶的空间结构与活性位点分析

中国食品学报 2016 EI 北大核心 CSCD

摘要:咖啡碱合成酶是茶叶中咖啡碱生物合成途径的关键酶,目前尚无对茶叶咖啡碱合成酶分子结构和催化机制的报道。预测和分析其空间结构和活性位点具有重要意义。本研究以高咖啡碱南昆山毛叶茶为材料构建c DNA文库,采用同源探针筛选c DNA文库的方法获得咖啡碱合成酶基因,通过体外原核表达对其功能进行验证,并用Modeller9.10、Autodock4.0等软件预测其编码蛋白的空间结构和活性位点,结果是:克隆得到南昆山毛叶茶咖啡碱合成酶基因MYCS1,其ORF全长1 100 bp,编码369个氨基酸,原核表达蛋白具有咖啡碱合成酶的功能;MYCS1编码蛋白的三维模型由9个α-螺旋、7个β-折叠组成,整个蛋白有一个包含β-折叠链的球形结构域和一个由独特螺旋帽组成顶盖的活性空腔。该蛋白经多氢键与甲基供体SAM结合,结合域由Asp63、Gly65、Asp103、Ser138、Phe139、Ser155等氨基酸残基构成,与甲基受体(7-m X、Tb)的结合主要通过氢键作用,并受氨基酸残基π-π堆积作用和强疏水作用的影响。结合域主要包括Phe30、Thr31、Tyr156、Trp160、Phe321等氨基酸残基。结论:南昆山毛叶茶咖啡碱合成酶具有依赖S-腺苷甲硫氨酸甲基转移酶家族的结构特征,底物结合位点在保守结构域,与该家族酶存在共性,特异底物识别位点存在差异,该结果为深入研究茶叶咖啡碱合成酶的催化机制奠定了基础。

关键词: 南昆山毛叶茶 咖啡碱合成酶 空间结构 活性位点

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衡东县近十年蔬菜农药残留变化规律分析及控制对策

南方农业学报 2016 北大核心 CSCD

摘要:【目的】以湖南省衡东县为例,研究近十年蔬菜农药残留的变化规律,为衡东县蔬菜农药残留控制措施的制定提供科学依据。【方法】采用农药残留快速检测法,对2005~2014年衡东县专业蔬菜基地、农贸市场、9个超市的叶菜类、豆菜类、茄菜类和瓜菜类等四大类蔬菜的17912批蔬菜样品进行抽样检测,计算农药残留超标率,并对各类蔬菜的农药残留超标状况进行统计分析。【结果】近10年衡东县蔬菜农药残留整体水平逐年下降,超标率从2005年的10.84%下降到2014年的3.03%;蔬菜农药残留随季节变化较明显,超标率表现为秋季>夏季>冬季>春季;农药残留超标的蔬菜主要是豆菜类、叶菜类和茄菜类蔬菜,瓜菜类蔬菜超标较少;超市和农贸市场的蔬菜农药残留超标率明显高于专业生产基地,外地蔬菜的农药残留超标率高于本地蔬菜。【建议】加强宣传,提高农产品质量安全意识;强化技术培训,大力推广无公害蔬菜生产技术;强化基地准出和市场准入检测,保证上市蔬菜质量安全;加快蔬菜基地建设,推进蔬菜无公害产业化生产经营。

关键词: 蔬菜 例行监测 农药残留 规律分析 对策 湖南省衡东县

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高效液相色谱-串联质谱法测定大米与小米中柄曲霉素残留

分析测试学报 2016 北大核心 CSCD

摘要:通过优化提取溶剂及其体积、超声时间及吸附剂,建立了一种快速、简单、准确测定大米和小米中柄曲霉素的分析方法。以乙腈为提取溶剂,乙二胺-N-丙基硅烷(PSA)吸附剂净化,上清液过膜后进行分析,在电喷雾电离(ESI)模式下,采用多反应监测(MRM)模式进行测定。结果表明,柄曲霉素在0.1~100.0μg/L范围内呈良好的线性,相关系数不低于0.999 0。大米中柄曲霉素的检出限为0.03μg/kg,定量下限为0.1μg/kg,回收率为88.3%~91.5%,相对标准偏差(RSD)为2.3%~6.0%;小米中柄曲霉素的检出限为0.1μg/kg,定量下限为0.3μg/kg,回收率为92.7%~103.8%,RSD为2.2%~6.9%,符合痕量分析的要求。采用该方法分析收集的大米和小米样品,均未检出柄曲霉素。

关键词: 柄曲霉素 大米 小米 高效液相色谱-串联质谱(HPLC-MS/MS)

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生物炭复配调理剂对镉污染土壤性状和小白菜镉吸收及其生理特性的影响

南方农业学报 2016 北大核心 CSCD

摘要:【目的】研究生物炭复配调理剂(由生物炭与泥炭、石灰混合配制而成)修复中轻度镉(Cd)污染农田土壤的可行性,为其在中轻度Cd污染农田土壤上的应用提供科学依据。【方法】在网室进行生物炭复配调理剂的盆栽试验,设4个不同的用量梯度,分别为0(对照)、80、160、240 g/盆,分别用H0、H1、H2和H3表示,每盆用土4 kg,每处理4次重复,研究不同生物炭复配调理剂用量对土壤性状、小白菜Cd吸收及其生理特性的影响。【结果】生物炭复配调理剂能显著提高土壤pH、土壤微生物氮(MBN)含量和脲酶活性(P<0.05,下同),同时显著降低土壤有效态Cd(DTPA-Cd)(最大降幅37.1%)、微生物碳(MBC)含量和酸性磷酸酶活性。生物炭复配调理剂能有效降低小白菜Cd吸收量(最大降幅85.7%),小白菜细胞中丙二醛(MDA)含量及超氧化歧酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、过氧化物酶(POD)活性等抗逆性指标明显下降,同时小白菜Cd含量可降至0.10 mg/kg,符合食品安全标准;低用量(2%)的生物炭复配调理剂可使小白菜增产,高用量则不利于小白菜生长。【结论】生物炭复配调理剂可有效钝化土壤重金属Cd,改善土壤生化性状,显著减少小白菜对Cd的吸收,可应用于中低Cd污染农田土壤的修复,其最佳施用量宜为20~40 g/kg。

关键词: 生物炭 镉胁迫 微生物碳/氮 抗氧化酶

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树枝直刃剪切数学模型与试验

华南农业大学学报 2016 北大核心 CSCD

摘要:【目的】基于材料力学和弹性地基梁理论对直刃刀片剪切树枝过程进行理论建模,并根据该模型计算出直刃刀片剪切树枝所受的剪切力。【方法】以石硖品种龙眼树枝为试验材料,利用万能材料试验机和摩擦试验台等仪器测定龙眼树枝的相关力学特性参数和滑动摩擦因数,测量并用模型计算树枝不同含水率(w)、直径和不同刀片刃角下动刀片剪切龙眼树枝的峰值剪切力,剪切试验所用刀具的刃角分别为10°、20°和30°。【结果】当树枝直径为20.4 mm、相对含水率为76%、刀片刃角为20°时,刀片剪切力理论计算曲线与试验曲线趋势一致,峰值剪切力的误差约为2.3%;当树枝直径为15.3 mm,刀片刃角为20°,且树枝含水率大于纤维饱和点(30%)时,刀片峰值剪切力随含水率升高而增大,计算值在试验值的误差范围内;当树枝直径为24.6 mm、含水率为76%,且刀片刃角从10°增大到30°时,峰值剪切力显著增大,计算值处于试验值的误差范围内。【结论】该理论模型可用于预测剪切力并分析不同力学参数对峰值剪切力的影响,为修剪机具剪切机构的设计和优化提供参考。

关键词: 数学模型 直刃刀片 剪切 含水率 刃角,龙眼树枝 弹性地基梁理论

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利用SNP分子标记分析化橘红种质资源

分子植物育种 2016 北大核心 CSCD

摘要:本研究利用高分辨率熔解曲线(high resolution melting,HRM)方法对21份化橘红及3份近缘种质蜜柚和黄皮的25个单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphism,SNP)位点进行了基因分型。结果表明,所有样品在其中21个SNP位点表现出较好的多态性,共呈现出11种基因型,其中化橘红基因型有9种,SNP位点平均杂合度为0.363 1,多样性信息含量(PIC)平均值为0.266 3;21个SNP位点可将24份样本分为3类,化州橘红种质单独聚为一类,表明SNP分子标记将成为化州橘红种质资源评价及品种鉴定的一项重要工具。另外,化橘红种质资源可能存在更多的品系,而不止是当前认为的"正毛"、"密叶正毛"、"副毛"、"光青"、"假西洋"、"黄龙"6个品系,且化橘红种质资源存在着同名异物和同物异名的现象。本研究为化橘红种质资源鉴定提供了有效的方法和依据,应用前景广阔。

关键词: 化州橘红 单核苷酸多态性 高分辨率熔解曲线 聚类分析

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